熊轶
- 作品数：9 被引量：13H指数：2
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：广东省社会发展攻关项目国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 预先服用灵芝孢子降低维甲酸诱导的孕鼠胚胎神经管畸形发生率被引量：6
- 2006年
- 目的探讨预先服用灵芝孢子能否降低维甲酸诱导的胚胎神经管畸形的发生率。方法将胚胎(embryo,E)0d孕鼠随机分为正常对照组、溶剂组、模型组和灵芝孢子组,每组5只。灵芝孢子组孕鼠于E0d起即给予胃饲灵芝孢子溶液,溶剂组孕鼠胃饲等量溶剂。至E7.75d时,模型组和灵芝孢子组孕鼠一次性胃饲全反式维甲酸。E10.5d时取孕鼠胚胎,计算神经管畸形发生率及测量胚胎顶臀距。采用免疫荧光组织化学染色和流式细胞术检测胚胎神经管神经上皮细胞巢蛋白的表达及细胞周期分布,采用DNA定量荧光染色及RT-PCR技术检测胚胎神经管细胞周期素依赖性蛋白激酶2(cyclin-dependentkinase2,Cdk2)和Cdk4mRNA的转录水平。结果孕鼠胚胎神经管畸形发生率模型组为79.41%,灵芝孢子组为21.67%;顶臀距模型组为(3.62±1.27)mm,灵芝孢子组为(5.84±0.92)mm。胚胎神经管神经上皮细胞巢蛋白表达阳性率模型组为32.44%,灵芝孢子组为77.65%。模型组孕鼠胚胎神经管神经上皮细胞G0/G1期比例为82.80%,灵芝孢子组为53.74%。灵芝孢子组Cdk4mRNA转录水平高于正常对照组和溶剂组,但未检测到Cdk2mRNA。结论预先服用灵芝孢子能够降低维甲酸诱导的孕鼠胚胎神经管畸形的发生率。
- 张伟曾园山熊轶陈穗君钟志强
- 关键词：神经管畸形灵芝孢子维甲酸巢蛋白
- 灵芝孢子防止妊娠高血压大鼠的胎鼠及其生后幼鼠海马细胞增殖下降和神经元存活减少被引量：1
- 2007年
- 目的探讨灵芝孢子对妊娠高血压大鼠的胎鼠及幼鼠海马细胞增殖下降和神经元存活减少的干预作用。方法40只SD妊娠大鼠分为正常对照组、N硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)+蒸馏水组、L-NAME+精氨酸组、L-NAME+灵芝孢子组。采用免疫组织化学、Western blotting、RT-PCR、流式细胞计数和电镜等技术对海马组织进行检测。结果应用L-NAME后,E21海马低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达增加,直到P30时仍有表达。E21海马微血管密度增高,P30海马毛细血管结构异常。E21海马细胞的增殖下降,P30海马神经元减少。应用灵芝孢子后,E21海马HIF-1α和VEGF低水平表达,在P30时则未见表达。E21海马微血管密度达到正常水平,P30海马毛细血管结构正常。E21海马细胞增殖上升,P30海马神经元恢复性增多。结论灵芝孢子能防止妊娠高血压大鼠的胎鼠及幼鼠海马细胞增殖下降和神经元存活减少。
- 程进军曾园山张惠君陈穗君张伟熊轶钟志强
- 关键词：灵芝孢子低氧诱导因子-1Α
- 灵芝孢子在预防维甲酸诱导胚胎小鼠发生神经管畸形过程中对Cdk4表达的影响被引量：1
- 2006年
- 目的探讨预先服用灵芝孢子在降低维甲酸诱导胚胎小鼠发生神经管畸形过程中对依赖细胞周期蛋白激酶4(cyclindependentproteinkinase4,Cdk4)表达的影响。方法于孕期小鼠E0d时给予灵芝孢子组的孕鼠胃饲灵芝孢子溶液,8g·kg-1·d-1。实验对照组的孕鼠胃饲等量溶剂。于E7.75d时,两组孕鼠一次性胃饲维甲酸,剂量为50mg/kg体重。正常对照组孕鼠胃饲等量灵芝孢子溶剂,但是在E7.75d时,仅给予维甲酸溶剂。空白对照组孕鼠常规饲养不作任何处理。在孕期E10.5d时取出4组孕鼠的胚胎,应用免疫荧光组织化学染色和Westernblot检测胚胎神经管神经上皮Cdk4表达情况。结果实验对照组孕鼠胚胎神经管神经上皮细胞Cdk4的表达明显降低,而灵芝孢子组胚胎表达Cdk4的强度明显高于实验对照组。正常对照组与空白对照组相比Cdk4的表达无统计学意义(P>0.05)。结论灵芝孢子可能是通过增强神经管神经上皮细胞表达Cdk4降低维甲酸诱导胚胎小鼠神经管畸形的发生。
- 张伟曾园山熊轶唐久余陈穗君钟志强
- 关键词：灵芝孢子维甲酸神经管畸形胚胎
- 人神经营养素-3受体TrkC基因重组腺病毒载体的表达和生物学活性检测
- 2006年
- 目的探讨人神经营养素-3受体TrkC基因重组腺病毒载体(Adeno-TrkC)在神经干细胞内的表达及其对神经干细胞的生物活性作用。方法用RT-PCR检测Adeno_TrkC感染的293细胞的TrkCmRNA含量。用免疫细胞化学和Westernblotting检测Adeno-TrkC感染的神经干细胞表达TrkC受体蛋白。在体外培养条件下,观察人神经营养素-3(NT-3)对感染了Adeno-TrkC的神经干细胞分化为神经元样细胞和星形胶质样细胞的影响。结果在Adeno-TrkC感染的293细胞和神经干细胞中检测到TrkCmRNA和TrkC受体蛋白,且表达产物和其配体NT-3结合后能使体外培养的神经干细胞更多地分化为神经元样细胞,分化率达到55.2%,均高于其他对照组。结论Adeno_TrkC能在神经干细胞内表达TrkC受体蛋白,这种TrkC受体蛋白具有促进神经干细胞分化为神经元样细胞活性的作用,这为进一步应用NT-3和TrkC联合进行基因治疗中枢神经损伤研究奠定了基础。
- 王俊梅曾园山黄文林熊轶王延华
- 关键词：TRKC重组腺病毒WESTERNBLOTTING
- 灵芝孢子降低维甲酸诱导的孕鼠胚胎神经管畸形的发生被引量：1
- 2007年
- 目的探讨灵芝孢子能否促进受维甲酸诱导,而停滞在G0/G1期的胚胎神经管神经上皮细胞重新进入细胞周期循环,继续增殖和分化,减少神经管畸形的发生。方法于实验对照组和灵芝孢子组小鼠孕期胚胎(E)7.75d时一次性胃饲全反式维甲酸,造成这两组孕鼠的胚胎出现神经管畸形。然后,给予灵芝孢子组孕鼠胃饲灵芝孢子溶液。在孕期E10.5d时取出两组孕鼠的胚胎,分别计数胚胎的神经管畸形发生率。应用免疫荧光组织化学染色和流式细胞仪检测胚胎神经管神经上皮的巢蛋白(nestin)表达情况。应用DNA定量荧光染色和RT-PCR技术检测胚胎神经管依赖细胞周期蛋白激酶2(Cdk2)mRNA和Cdk4 mRNA的转录。结果灵芝孢子组孕鼠胚胎的神经管畸形发生率显著低于实验对照组。神经管神经上皮细胞表达nestin的百分率也明显大于实验对照组。实验对照组孕鼠胚胎的神经管细胞在G0/G1期的比例则显著高于灵芝孢子组,但是实验对照组神经管细胞S期的比例低,低于灵芝孢子组形态正常的胚胎神经管细胞。RT-PCR检测发现,灵芝孢子组孕鼠胚胎神经管细胞能够正常转录Cdk4 mRNA,而实验对照组则低转录Cdk4 mRNA。结论灵芝孢子能够减少维甲酸诱导的妊娠小鼠孕期E10.5d胚胎神经管畸形的发生。
- 熊轶曾园山张伟陈穗君钟志强
- 关键词：灵芝孢子维甲酸神经管畸形巢蛋白胚胎
- 人神经营养素-3基因重组腺病毒载体的构建、表达和生物活性检测被引量：5
- 2005年
- 目的构建具有生物活性的人神经营养素_3(NT_3)基因重组腺病毒表达载体。方法从人脑组织mRNA中扩增NT_3基因全长cDNA,定向克隆于穿梭质粒pShuttle中,获得一个带有CMV启动子的质粒。再与腺病毒骨架DNA(Adeno-X viral DNA)体外连接,形成重组腺病毒质粒(pAd_NT_3)。用pAd_NT_3转染人胚肾293细胞后包装成有感染能力的重组腺病毒颗粒(Adeno_NT_3)。结果NT_3基因RT-PCR扩增产物约801 bp。Adeno_NT_3 PCR鉴定为正确重组子。RT_PCR、免疫细胞化学、ELISA及Western blot检测显示,Adeno_NT_3能在其转染的293细胞表达和分泌NT_3。这种NT_3能使体外培养的神经干细胞更多地分化为神经元样细胞。结论应用体外连接法成功构建了人NT_3基因重组腺病毒表达载体,其表达产物具有促进神经干细胞分化为神经元样细胞的活性作用。
- 王俊梅曾园山刘然义吴立志薛刚黄文林熊轶王延华
- 关键词：神经营养素-3重组腺病毒神经干细胞免疫细胞化学
- 灵芝孢子能够调节妊高征大鼠所生幼鼠海马线粒体相关分子物质的水平
- 2007年
- 目的:探讨灵芝孢子对妊高征大鼠所生幼鼠海马线粒体相关分子物质的影响。方法:用一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂N硝基左旋精氨酸甲酯(Nw-nitro-L-arginine methylester,L-NAME)给予大鼠腹腔注射制备妊高征模型,在此基础上胃饲灵芝孢子。应用cAMP放免法、RT-PCR、酶活力检测等技术评价灵芝孢子对妊高征大鼠所生幼鼠海马线粒体相关分子物质水平的影响。结果:妊高征孕鼠的刚分娩幼鼠海马cAMP水平、线粒体DNA(mtDNA)水平及ATP合酶活力都降低。pgc1α表达水平与正常对照大鼠比较没有变化。生后30 d的幼鼠海马cAMP水平、mtDNA水平、ATP合酶活力和pgc1α表达水平低于正常对照大鼠。胃饲灵芝孢子后,妊高征大鼠的刚分娩幼鼠和生后30 d的幼鼠海马cAMP水平和mtDNA含量恢复到正常对照大鼠水平,ATP合酶活力和pgc1α表达水平也有恢复性增高。结论:灵芝孢子具有调节妊高征大鼠所生幼鼠海马线粒体相关分子物质水平的作用。
- 程进军曾园山熊轶张伟陈穗君钟志强
- 关键词：灵芝孢子海马线粒体线粒体DNA
- 灵芝孢子在降低维甲酸诱导胚胎小鼠发生神经管畸形过程中对Cdk4表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的探讨灵芝孢子在降低维甲酸诱导胚胎小鼠发生神经管畸形过程中对依赖细胞周期蛋白激酶4(Cdk4)表达的影响。方法给予实验对照组和灵芝孢子组妊娠E7.75d的小鼠一次性胃饲维甲酸,造成这2组孕鼠的胚胎出现神经管畸形。然后,给予灵芝孢子组孕鼠胃饲灵芝孢子溶液。在孕期E10.5d时取出2组孕鼠的胚胎,应用免疫荧光组织化学染色和Western blotting检测胚胎神经管神经上皮依赖细胞周期蛋白激酶4(Cdk4)的表达情况。结果在灵芝孢子组可以观察到形态正常的胚胎中,神经管的神经上皮细胞有Cdk4的表达,其表达水平与空白对照组及正常对照组相比较没有明显差异。在灵芝孢子组形态异常的胚胎中,其神经管的神经上皮细胞也有Cdk4的表达,但其表达水平与空白对照组及正常对照组相比较是低的。结论灵芝孢子可能是通过促进神经管神经上皮细胞上调Cdk4的表达来减轻维甲酸诱导的胚胎小鼠神经管畸形。
- 熊轶曾园山唐久余张伟陈穗君钟志强
- 关键词：灵芝孢子维甲酸神经管畸形免疫荧光组织化学胚胎小鼠
- 体外构建人工神经网络样导管复合体移植治疗大鼠全横断脊髓损伤的实验研究
- 本研究旨在探讨应用体外构建的人工神经网络样导管复合体移植治疗大鼠全横断脊髓损伤，观察这种治疗策略能否更好地促进受损伤脊髓运动功能的恢复，并分析其中可能的作用机制，为临床治疗急性脊髓损伤提供新策略及其实验依据。本研究共分为...
- 熊轶
- 关键词：人工神经网络全横断脊髓损伤急性脊髓损伤神经干细胞
- 文献传递
