梁佳 作品数:36 被引量:71 H指数:4 供职机构: 河北医科大学第四医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河北省自然科学基金 河北省医学科学研究重点课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
miR-6867及其宿主基因RAPGEFL1在食管鳞状细胞癌组织和细胞系中的表达及甲基化状态 被引量:1 2017年 目的:检测miR-6867及其宿主基因Rap型鸟苷酸交换因子1(rap guanine nucleotide exchange factor like 1,RAPGEFL1)在食管癌细胞系及食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达水平及甲基化状态,并探讨其在ESCC发生发展中的作用。方法:选取河北医科大学第四医院2014年1月至2016年1月收治的ESCC手术患者组织标本87例。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-6867及RAPGEFL1在食管癌细胞系和ESCC组织及其相应癌旁组织中的表达水平,分析miR-6867和RAPGEFL1基因表达之间的相关性。应用甲基化特异性PCR法(MSP)检测RAPGEFL1在食管癌细胞系和ESCC组织及其相应癌旁组织中的甲基化状态。结果:miR-6867在ESCC组织中的相对表达量显著低于其相应癌旁组织(P<0.05),并与淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05);RAPGEFL1基因在ESCC组织中的表达显著低于其相应癌旁组织(P<0.05),并与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期相关(P<0.05);miR-6867与RAPGEFL1在ESCC组织中的表达呈明显正相关(P<0.05)。5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)处理后,4种食管癌细胞系中miR-6867和RAPGEFL1基因的表达均增高,并且其甲基化程度明显降低。RAPGEFL1基因在ESCC组织中的甲基化率显著高于其相应癌旁组织(P<0.05),并与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期有关(P<0.05)。结论:ESCC的发生发展可能与miR-6867和RAPGEFL1的异常低表达及RAPGEFL1高甲基化状态有关,miR-6867与RAPGEFL1表达具有一致性,且RAPGEFL1基因启动子区甲基化可能是导致miR-6867与RAPGEFL1表达沉默的机制之一。 梁佳 邝钢 徐凤楼 郭炜 沈素朋 董稚明关键词:食管鳞状细胞癌 TGF-β诱导的linc01503促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖、侵袭及EMT过程 被引量:5 2020年 目的:探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)linc01503在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)组织和细胞中的表达及其对ESCC细胞增殖、侵袭及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法:选取2012年1月至2014年12月河北医科大学第四医院收治的119例ESCC患者的癌及癌旁组织标本,应用qPCR法检测ESCC组织及ESCC细胞系(Kyse150、Kyse170、Eca109、TE1和TE13)中linc01503的表达水平;分别用pGPU6-shRNAlinc01503转染、TGF-β1处理ESCC细胞,用qPCR法检测转染前后EMT相关基因及处理前后linc01503表达的变化,用MTS及Transwell小室法检测linc01503对ESCC细胞增殖及侵袭的影响。结果:linc01503在ESCC组织和细胞系中高表达(均P<0.05),ESCC组织中linc01503高表达与患者淋巴结转移、浸润深度、TNM分期有关联,并与生存期密切相关(均P<0.05)。TGF-β处理促进ESCC细胞的EMT过程,同时诱导linc01503表达明显上调。linc01503敲低明显抑制细胞的增殖及侵袭能力(均P<0.05),同时明显增加了E-cadherin的表达而降低了N-cadherin、vimentin基因的表达(均P<0.05)。结论:linc01503作为TGF-β的下游效应基因之一,促进了ESCC细胞的增殖、侵袭及EMT过程。 郭艳丽 牛云峰 梁晓亮 郭炜 沈素朋 梁佳 董稚明关键词:食管鳞状细胞癌 转化生长因子-Β 上皮间质转化 食管鳞癌中miR-203b的表达及其甲基化状态的研究 目的:检测miR-203b基因在食管鳞状细胞癌(Esophageal squamous cell carcmoma,ESCC)中的表达及其甲基化状态,探讨miR-203b基因在食管鳞癌发生发展中的作用。方法:分别应用实时... 梁佳 董稚明 郭艳丽 沈素朋 郭炜关键词:食管鳞癌 DNA甲基化 文献传递 LINC00997在胃贲门腺癌中表达的临床意义及其对SGC7901细胞迁移、侵袭和EMT的影响 被引量:2 2022年 目的:检测LINC00997在胃贲门腺癌(GCA)组织及胃癌细胞中的表达,分析其表达与患者临床病理特征和预后的关系,探讨敲减LINC00997对胃癌SGC7901细胞迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:基于TCGA和GTEx数据库分析LINC00997在胃癌组织中的表达及其与患者预后的关系。应用qPCR法检测68例GCA组织和相应癌旁组织以及胃癌细胞中LINC00997的表达水平,分析其表达与患者临床病理特征及预后的关系。通过划痕愈合、Transwell侵袭实验分别检测敲减LINC00997对SGC7901细胞迁移和侵袭的影响,qPCR法和WB法检测敲减LINC00997对EMT相关标志物E-cadherin、N-cadherin及vimentin表达的影响。结果:LINC00997在胃癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05),且LINC00997高表达组患者的OS及DFS显著低于LINC00997低表达组患者(P<0.01或P<0.05)。在68例在GCA组织中,LINC00997的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01),其表达与患者淋巴结转移、TNM分期及OS相关联(P<0.05或P<0.01)。敲减LINC00997的SGC7901细胞的迁移和侵袭能力均显著降低(均P<0.01),细胞中E-cadherin的表达显著升高,N-cadherin、vimentin的表达均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:LINC00997在GCA组织和胃癌细胞中高表达,其高表达可能促进了胃癌细胞的迁移、侵袭及EMT进程,有望成为GCA患者预后评估的分子标志物。 梁佳 沈素朋 郭炜 郭艳丽 董稚明关键词:SGC7901细胞 迁移 上皮间质转化 胃贲门腺癌中长链非编码RNA FOXD3-AS1的表达及其对肿瘤生物学行为的影响 被引量:2 2021年 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)FOXD3-AS1在胃贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)中的表达及其对肿瘤生物学行为的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测FOXD3-AS1在GCA中的表达。应用细胞功能实验检测FOXD3-AS1异常表达与肿瘤生物学特征的关系;qRT-PCR及Western blot法检测FOXD3-AS1异常表达对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子mRNA及蛋白表达的影响。结果GCA组织中的FOXD3-AS1表达量明显高于癌旁正常组织(Z=-2.695,P=0.007),FOXD3-AS1的表达水平与临床分期(Z=-2.981,P=0.003)和淋巴结转移(Z=-3.43,P=0.001)相关。FOXD3-AS1在胃癌细胞中的表达均高于空白对照组(P<0.05)。细胞增殖实验、平板克隆形成、划痕愈合实验以及Transwell侵袭实验结果显示,FOXD3-AS1敲低明显抑制细胞的体外增殖、迁移、侵袭能力;FOXD3-AS1敲低上调胃癌细胞中E-cadherin mRNA及蛋白的表达,同时下调N-cadherin、β-catenin和vimentin的表达(P<0.05)。结论FOXD3-AS1在GCA组织和细胞中的表达明显上调,敲低FOXD3-AS1可以抑制胃癌的发生、发展。 杨阳 王欣晨 牛云峰 郭炜 梁佳 郭艳丽 董稚明关键词:胃肿瘤 贲门腺癌 长链非编码RNA 上皮-间质转化 长链非编码RNA ZNF667-AS1在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其DNA甲基化状态的研究 被引量:8 2018年 目的检测长链非编码RNA ZNF667-AS1在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达及甲基化状态。方法应用qPCR和MSP法检测DNA甲基化转移酶抑制剂5-Aza-dC处理前后食管癌细胞系(Kyse170、Eca109、TE1和TE13)、ESCC及相应癌旁正常组织中ZNF667-AS1基因的表达,及其CpG岛三个区域的甲基化状态。结果在5-Aza-dC处理后的四株细胞系中,ZNF667-AS1基因的表达均增高,且其CpG岛三个区域甲基化程度均降低。ZNF667-AS1基因在ESCC组织中的表达显著低于相应癌旁正常组织,且该基因CpG岛远端启动子区及第一外显子区甲基化率在ESCC与相应癌旁正常组织中的差异均具有统计学意义(均P<0.05)。ESCC组织中CpG岛近端启动子区甲基化率显著高于相应癌旁正常组织,并与组织分化程度、TNM分期密切相关,ZNF667-AS1基因CpG岛近端启动子区发生甲基化的ESCC组织中,低表达例数高于高表达例数,差异具有统计学意义。结论 ZNF667-AS1基因在食管癌细胞系和ESCC组织中的低表达与ESCC的发生发展密切相关,且其近端启动子区的高甲基化状态可能是导致其表达沉默的机制之一。 吴璇 邝钢 任利兵 郭炜 梁佳 康小亮 郭艳丽 董稚明关键词:食管鳞状细胞癌 长链非编码RNA DNA甲基化 食管鳞癌中DACT2基因表达及甲基化状态研究 被引量:4 2017年 [目的]检测食管鳞状细胞癌(ESCC)中DACT2基因表达及启动子区甲基化状态,探讨DACT2基因在食管鳞癌发生发展中的作用。[方法]分别应用逆转录—聚合酶链反应(RTPCR)以及甲基化特异性PCR(MSP)的方法检测DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-d C)处理前后的食管癌细胞系(TE1、TE13、T.Tn、Eca109)以及食管鳞癌组织及相应癌旁组织中DACT2 m RNA表达情况及启动子区甲基化状态。[结果]经5-aza-d C处理后4种食管癌细胞系中DACT2基因的表达均增高。4种未经5-aza-d C处理的食管癌细胞系中DACT2基因呈高甲基化状态。应用5-aza-d C处理后,DACT2基因在4种细胞系中均呈非甲基化状态。DACT2基因在食管鳞癌组织中的表达显著低于癌旁组织(0.66±0.53 vs 0.95±0.64,t=-2.43,P=0.018),并与淋巴结转移密切相关(t=-2.030,P=0.048)。食管鳞癌组织中DACT2基因的启动子区甲基化率显著高于癌旁组织(50.0%vs 21.1%,χ2=9.439,P=0.002),并与TNM分期、组织学分化程度和淋巴结转移密切相关(P均<0.05)。发生DACT2基因甲基化的食管鳞癌组织中DACT2基因的表达量显著低于未发生甲基化的食管鳞癌组织(0.46±0.32 vs 0.78±0.61,t=-2.341,P=0.023)。[结论 ]DACT2基因在食管鳞癌中的异常低表达与食管鳞癌的发生、发展密切相关,且其启动子区甲基化可能是导致其表达沉默的机制之一。 刘磊 周珍 邝刚 沈素朋 梁佳 郭炜 郭艳丽 董稚明关键词:食管鳞癌 DNA甲基化 贲门腺癌中DDX11-AS1的异常表达及其作用 被引量:2 2020年 目的探讨长链非编码RNA DDX11-AS1在贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)中的表达及其作用。方法应用qRT-PCR法检测GCA中DDX11-AS1的表达;应用MTS、Transwell侵袭实验检测DDX11-AS1异常表达对胃癌BGC823细胞增殖、侵袭能力的影响。结果DDX11-AS1在GCA组织中表达明显上调,DDX11-AS1高表达与GCA患者淋巴结转移、浸润深度、TNM分期有关(P均<0.01),并与生存期密切相关(P<0.01),且可作为GCA患者独立的预后因素(P<0.01)。DDX11-AS1在胃癌细胞中高表达,敲低DDX11-AS1表达明显抑制胃癌细胞BGC823的增殖及侵袭能力(P<0.01)。结论DDX11-AS1在GCA中可能作为癌基因发挥作用,其高表达促进了GCA的发生、发展,并有望成为GCA患者预后评估的候选分子标志物。 郭艳丽 王会恩 尹情 韩俊淑 郭炜 沈素朋 梁佳 董稚明关键词:贲门肿瘤 腺癌 长链非编码RNA lncRNA NUP50-AS1在食管鳞癌组织中的表达及其对Eca109细胞恶性生物学行为的影响 被引量:4 2018年 目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)NUP50-AS1在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer, ESCC)组织及细胞株中的表达及其对人食管癌Eca109细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:选取自2015年1月至2016年12月河北医科大学第四医院生物标本库的49例ESCC手术患者的癌组织和相应癌旁组织,qRT-PCR检测ESCC癌组织、癌旁组织及5种食管癌细胞株(TE1、TE13、Eca109、Kyse150和Kyse170)中NUP50-AS1表达水平。shRNA转染NUP50-AS1后,选用sh2-NUP50-AS1进行后续功能实验。采用MTS法、克隆形成实验检测敲减NUP50-AS1表达对Eca109细胞增殖的影响,划痕实验检测敲减NUP50-AS1表达对细胞迁移的影响,Transwell小室实验检测敲减NUP50-AS1表达对细胞侵袭的影响。结果:NUP50-AS1在ESCC组织中的相对表达量显著高于癌旁组织(2.003±0.870 vs 1.000±0.000,P<0.05);NUP50-AS1在ESCC组织中的表达水平与淋巴结转移及TNM分期相关(均P<0.01),NUP50-AS1在5株食管癌细胞系中相对表达量均明显上调(P<0.05),其中Eca109细胞的NUP50-AS1表达水平最高。转染后,sh2-NUP50-AS1转染组干扰效率最高,敲低NUP50-AS1可明显抑制Eca109细胞增殖、迁移和侵袭能力。结论:ESCC组织中lncRNA NUP50-AS1表达明显高于癌旁组织,且与癌症分期和淋巴结转移有关,敲减其表达明显抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,NUP50-AS1的高表达可能与ESCC的发生发展密切相关。 梁佳 吴璇 邝钢 任利兵 沈素朋 郭炜 郭艳丽 朱景云 董稚明关键词:食管鳞状细胞癌 ECA109细胞 生物学行为 MiR-4659b和长链非编码RNA XLOC_008370在食管鳞癌中的表达及临床意义 被引量:1 2017年 [目的]检测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中微小RNA 4659b(micro RNA-4659b,miR-4659b)和长链非编码RNA XLOC_008370(long non-coding RNA XLOC_008370,lnc RNA XLOC_008370)的表达,探讨miR-4659b和XLOC_008370在ESCC发生及发展中的作用机制。[方法 ]应用实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)的方法检测miR-4659b和XLOC_008370在50例ESCC组织中的表达情况及相关性。[结果]ESCC组织中miR-4659b的相对表达量显著高于相应癌旁组织[(0.034±0.013)vs(0.005±0.002),t=15.205,P<0.05]。miR-4659b的相对表达量与ESCC患者淋巴结转移有关[(0.039±0.011)vs(0.023±0.009),t=5.708,P<0.05]。XLOC_008370在ESCC中的相对表达量显著低于相应癌旁组织[(0.0019±0.0012)vs(0.020±0.0146),t=-8.921,P<0.05]。XLOC_008370的相对表达量与ESCC患者淋巴结转移有关[(0.0016±0.0010)vs(0.023±0.0014),t=-2.040,P<0.05],并且XLOC_008370与miR-4659b的相对表达量呈负相关(r=-0.829,P<0.05)。[结论 ]miR-4659b在ESCC中表达上调而XLOC_008370表达降低,且两者之间有相关性,提示miR-4659b与XLOC_008370可能存在一定的调控作用,这一机制可能在ESCC发生发展中起重要作用。 刘磊 沈素朋 邝钢 梁佳 郭炜 董稚明 王佳磊关键词:微小RNA 长链非编码RNA 淋巴结转移