邝钢 作品数:103 被引量:242 H指数:8 供职机构: 河北医科大学第四医院 更多>> 发文基金: 河北省医学科学研究重点课题 河北省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
Ras相关区域家族7基因在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义 被引量:1 2014年 目的:检测人食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中Ras相关区域家族7(Ras-association domain family 7,RASSF7)基因的mRNA、蛋白表达情况及其甲基化状态,探究RASSF7在ESCC发生发展中的作用。方法:组织标本取自河北医科大学第四医院2011—2012年间手术切除的69例ESCC原发灶组织及癌旁组织。分别应用RT-PCR及甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)方法检测DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycitydine,5-Aza-dC)处理前后的4株食管癌细胞系(TE13、T.Tn、YES-2、Ec109)和69例病灶组织及其癌旁组织中RASSF7 mRNA表达水平及甲基化状态,应用免疫组织化学方法检测69例ESCC组织及相应癌旁组织中RASSF7的蛋白表达。结果:RASSF7基因在TE13、T.Tn、YES-2细胞系中表达阳性,在Ec109细胞系中表达缺失;经5-Aza-dC处理后,RASSF7在TE13、T.Tn、YES-2细胞中表达下调,在Ec109细胞中表达阳性。5-Aza-dC处理前后4株食管癌细胞系中均未检测到RASSF7的甲基化。人ESCC组织中RASSF7的mRNA相对表达量(0.63±0.08 vs 0.42±0.20,P<0.01)与蛋白表达阳性率[81.2%(56/69)vs 53.6%(37/69),P<0.01]均显著高于相应癌旁组织,且均与患者的淋巴结转移情况及分化程度有关(P<0.05或P<0.01),与TNM分期、年龄和性别无关(均P>0.05)。ESCC组织和相应癌旁组织中均未检测到RASSF7的甲基化。结论:4株食管癌细胞系、人ESCC组织和癌旁组织中RASSF7基因的表达差异与RASSF7本身甲基化状态无关,ESCC组织中RASSF7的高表达可能参与了ESCC的发生及转移。 崔建利 郭炜 郭艳丽 沈素朋 邝钢 杨植彬 董稚明关键词:食管鳞状细胞癌 甲基化 β-环连蛋白抑制基因2甲基化状态对贲门腺癌发生发展的影响及机制 被引量:1 2016年 [目的]检测贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)及相应癌旁组织中β-环连蛋白抑制基因2(dishevelled-binding antagonist of beta-catenin 2,DACT2)的表达情况及其临床意义,探讨引起基因表达异常的可能机制及对Wnt通路活化的影响。[方法]应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)、RT-PCR分别检测河北省上消化道肿瘤高发区104例贲门腺癌及相应癌旁非肿瘤组织中DACT2基因的甲基化状态及m RNA的表达情况。应用免疫组织化学(IHC)检测β-catenin蛋白的表达。[结果]在104例贲门腺癌组织标本中,DACT2基因的甲基化发生率为60.6%(63/104),明显高于癌旁非肿瘤组织(P<0.01);且在发生该基因的甲基化的贲门腺癌标本中其m RNA表达及Wnt通路中心因子β-catenin的异常表达率均明显高于未发生该基因甲基化的贲门癌组织(P<0.01);且该基因的甲基化状态与肿瘤患者的病理分级、临床分期、淋巴结转移和上消化道肿瘤家族史相关(P<0.05),而与肿瘤患者的年龄、性别无关(P>0.05)。[结论]基因启动子区的高甲基化状态是DACT2基因表达下调的机制之一,其低表达可引起Wnt/β-catenin信号传导通路的异常活化并在贲门腺癌的发生发展中发挥一定的作用。 郭艳丽 周珍 郭炜 董稚明 邝钢 杨植彬关键词:甲基化 贲门腺癌 食管鳞癌及贲门腺癌中分泌型卷曲相关蛋白4基因启动子区甲基化状态的联合检测 被引量:4 2010年 目的:检测食管鳞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)和贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)中分泌型卷曲相关蛋白4(secreted frizzled related protein 4,SFRP4)的基因甲基化状态,探讨其与食管鳞癌和贲门腺癌发生的关系。方法:应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)及RT-PCR的方法检测49例食管鳞癌及58例贲门腺癌中SFRP4基因的甲基化状态及其mRNA表达情况,应用免疫组织化学法检测Wnt通路中心因子β-catenin蛋白的表达情况,并分析其与临床病理参数间的关系。结果:在食管鳞癌及贲门腺癌中,SFRP4基因的甲基化率分别为42.6%(21/49)和72.4%(42/58),均明显高于癌旁非肿瘤组织(P<0.01)。在贲门腺癌中SFRP4基因的高甲基化与肿瘤患者的临床分期相关,与病理分级无关;而在食管鳞癌中,该基因的甲基化与各临床病理指标均无关(P>0.05)。SFRP4基因在食管鳞癌及贲门腺癌中mRNA阳性表达率分别为69.3%(34/49)和44.8%(26/58),均明显低于癌旁非肿瘤组织(P<0.05),且肿瘤组织中mRNA表达与该基因的甲基化状态明显相关(P<0.01)。通路中心因子β-catenin蛋白在食管鳞癌及贲门腺癌中的异质表达率分别为65.3%(32/49)和86.2%(50/58),均明显高于癌旁非肿瘤组织(P<0.01),且其异质表达与SFRP4基因的甲基化状态相关(P<0.05)。结论:SFRP4基因的高甲基化状态可能是引起贲门癌及食管癌发生的共同分子机制之一,并有可能通过Wnt/β-catenin信号转导通路发挥作用。检测SFRP4基因甲基化状态对于贲门腺癌的预后评估有一定参考价值。 郭艳丽 郭炜 邝钢 杨植彬 董稚明关键词:Β连环素 胃癌组织中Sox7、Sox17基因甲基化及临床意义 被引量:3 2015年 [目的]检测胃癌组织及相应癌旁组织中Sox7、Sox17基因的甲基化状态,探讨其与胃癌发生的关系及对预后的影响。[方法]应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)、RT-PCR方法检测96例胃癌及相应癌旁组织中Sox7、Sox17基因的甲基化状态及m RNA表达情况。[结果 ]在96例胃癌组织标本中,Sox7、Sox17基因的甲基化率分别为49.0%(47/96)、78.1%(75/96),均明显高于癌旁非肿瘤组织(P<0.01);癌组织中Sox7、Sox17m RNA阳性表达率分别为30.2%(29/96)、14.6%(14/96),均明显低于癌旁非肿瘤组织(P<0.01)。Sox7、Sox17基因的甲基化率均与该基因的m RNA表达密切相关(P<0.01);癌组织中Sox7、Sox17基因的甲基化状态与胃癌患者的病理分级、临床分期及淋巴结转移均无关,但两基因共同甲基化率与淋巴结转移相关。对96例胃癌患者进行随访,失访率为10.4%。Sox7基因甲基化组与非甲基化组的5年累积生存率分别为23.4%和46.9%,Sox17基因甲基化组与非甲基化组的5年累积生存率分别为30.6%和52.4%,而Sox7、Sox17基因共同甲基化组与非共同甲基化组的5年累积生存率分别为13.9%和48.3%。[结论 ]胃癌患者中Sox7、Sox17基因甲基化状态与胃癌患者的生存相关。 郭艳丽 郭炜 张国强 邝钢 杨植彬 董稚明关键词:胃癌 甲基化 喉鳞状细胞癌中MMP1和TIMP3表达的相关性分析 2010年 目的探讨喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)中基质金属蛋白酶1(matrixmetalloproteinase 1,MMP1)和基质金属蛋白酶抑制因子3(tissue inhibitor of metalloproteinase 3,TIMP3)mRNA和蛋白的表达,探讨MMP1和TIMP3在LSCC发展和监测中的意义。方法分别应用逆转录-聚合酶链反应及免疫组织化学SP法,检测LSCC组织中MMP1和TIMP3 mRNA及蛋白表达情况。结果 MMP1 mRNA在LSCC组织中的表达0.66±0.26高于癌旁组织0.49±0.23(P<0.05),TIMP3 mRNA在LSCC组织中的表达0.34±0.21低于癌旁组织0.49±0.24(P<0.05);MMP1在LSCC组织和癌旁组织中的蛋白表达阳性率分别为82.4%和18.2%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);TIMP3在LSCC组织和癌旁组织中的蛋白表达阳性率分别为80.4%和100%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);MMP1和TIMP3 mRNA及蛋白表达与组织病理学分级、淋巴结转移相关(P<0.05),而与年龄无关(P>0.05);LSCC组织中MMP1和TIMP3 mRNA及蛋白表达未检测到相关性(P>0.05)。结论 MMP1和TIMP3表达与LSCC的发生发展、浸润及转移有关,检测LSCC组织中的MMP1和TIMP3的基因及蛋白表达情况,有助于判断LSCC的转移、TNM分期及预后情况。 邝钢 张笑盈 杨植彬 郭炜 何洪涛关键词:间质胶原酶 免疫组织化学 转录因子SOX7基因在贲门腺癌中的异常表达及其甲基化状态 被引量:5 2014年 目的:检测贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)组织及相应癌旁非肿瘤组织中Y性别决定区基因7(sex determining region Y-box 7,SOX7)的甲基化状态及其对SOX7 mRNA表达、Wnt通路中心因子β-catenin异质表达的影响及与临床病理特征之间的相关性。方法:选择河北医科大学第四医院胸外科2006-2012年手术切除的GCA及癌旁组织各130例,应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)、RT-PCR分别检测130例GCA及癌旁组织中SOX7基因的甲基化状态及其mRNA表达情况,应用免疫组织化学方法检测标本中β-catenin蛋白的表达。分析SOX7的甲基化状态与临床病理特征、SOX7 mRNA表达、β-catenin蛋白的异质表达及上消化道肿瘤家族史(upper gastrointestinal cancers,UGIC)的关系。结果:GCA组织中SOX7的甲基化率显著高于癌旁组织为[57.7%(75/130)vs 30.8%(40/130),P<0.01],其高甲基化仅与肿瘤患者的淋巴结转移情况有关(P<0.05),与肿瘤组织的病理分级及临床分期均无关(P>0.05)。GCA组织中SOX7mRNA的表达量明显低于癌旁非肿瘤组织[(0.414±0.054)vs(0.695±0.034),P<0.01〗],其β-catenin蛋白的异质表达率显著高于癌旁组织(85.4%vs 43.1%,P<0.01);GCA组织中SOX7基因mRNA表达情况及β-catenin蛋白的异质表达率均与该基因的甲基化状态有关(P<0.05),并且SOX7基因的甲基化状态与贲门癌患者的上消化道家族史密切相关(P<0.01)。结论:Cp G岛甲基化是SOX7基因表达下调的机制之一,并可能通过Wnt/β-catenin信号转导通路的激活在贲门腺癌的发生中扮演着重要的角色。 郭艳丽 邓良勇 郭炜 邝钢 杨植彬 董稚明关键词:贲门腺癌 甲基化 WNT信号通路 人食管鳞状细胞癌中微RNA-1250及其宿主基因AATK的表达及甲基化状态分析 被引量:5 2017年 目的:探讨微RNA-1250(microRNA-1250,miR-1250)及其宿主基因细胞凋亡关联酪氨酸激酶(apoptosis-associated tyrosine kinase,AATK)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)发生和发展中的作用。方法:分别采用实时荧光定量PCR法和甲基化特异性PCR法检测AATK基因在食管癌细胞系和ESCC组织及其相应癌旁正常组织中的表达情况和甲基化状态,同时采用实时荧光定量PCR法检测miR-1250在ESCC组织及其相应癌旁正常组织中的表达情况。然后,分析miR-1250表达和AATK基因表达及其甲基化状态分别与ESCC组织病理学特征的关系,以及三者之间的相关性。结果:5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dC)处理后,4株食管癌细胞系中AATK基因表达水平明显升高(P值均<0.05),并且其甲基化程度明显降低。在ESCC组织中,AATK mRNA平均表达量低于癌旁正常组织(P<0.05),AATK基因甲基化率明显高于癌旁正常组织(P<0.05);AATK mRNA相对表达量和AATK基因甲基化率均与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期密切相关(P值均<0.05),而与患者年龄和性别无关(P值均>0.05)。同时,ESCC组织中miR-1250相对表达量明显低于癌旁正常组织(P<0.05),并与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期密切相关(P值均<0.05),而与患者年龄和性别无关(P值均>0.05)。ESCC组织中miR-1250与AATK mRNA表达明显相关(P<0.05),而且miR-1250和AATK mRNA表达与AATK基因甲基化状态也均明显相关(P值均<0.05)。结论:ESCC的发生和发展可能与miR-1250和AATK低表达以及AATK基因高甲基化状态有关,而且miR-1250与AATK mRNA表达具有一致性。 卢帆 徐凤楼 邝钢 董稚明 郭艳丽 沈素朋 梁佳 刘胜男 郭炜关键词:食管肿瘤 DNA甲基化 长链非编码RNA XLOC_005009对食管鳞状细胞癌生物学特性的影响 被引量:1 2017年 目的:探讨长链非编码RNA XLOC_005009基因对食管鳞状细胞癌(ESCC)的体外增殖、迁移、侵袭和细胞周期与细胞凋亡等生物学特性的影响。方法:收集2015-2016年河北医科大学第四医院肿瘤研究所57例ESCC患者手术切除的癌组织及癌旁组织标本。应用实时荧光定量PCR检测XLOC_005009基因在人ESCC细胞系Eca109、Kyse170与ESCC组织及其癌旁组织的表达,构建pc DNA3.1-XLOC_005009过表达质粒并转染Eca109、Kyse170细胞,应用MTS法、克隆形成实验、划痕实验、Transwell小室、流式细胞术分别检测转染前后细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭、细胞周期与凋亡的变化。结果:XLOC_005009 m RNA在食管癌组织中的表达明显低于癌旁组织(0.06±0.06 vs 0.21±0.19,P<0.05),且食管癌细胞XLOC_005009 m RNA表达亦均低于对照组(P<0.05)。转染过表达质粒的Eca109和Kyse170细胞XLOC_005009基因表达显著高于对照组(Eca109细胞:039±0.17 vs0.02±0.00;Kyse170细胞:0.35±0.08 vs 0.01±0.01,均P<0.05)。与对照组相比,XLOC_005009基因过表达Eca109和Kyse170细胞增殖能力细胞显著减弱(P<0.05);克隆形成率显著减少(P<0.05);穿膜细胞数显著减少[Eca109细胞:(146.40±34.47)vs(193.00±26.33);Kyse170细胞:(157.80±32.51)vs(269.00±29.89),均P<0.05];Eca109细胞迁移率无显著变化,Kyse170细胞迁移率明显减小(P<0.05);S期细胞比例增加,细胞凋亡影响不明显。结论:XLOC_005009低表达与食管癌的发生发展密切相关,XLOC_005009过表达可抑制食管癌细胞的体外增殖、侵袭与迁移能力。 刘胜男 徐凤楼 卢帆 董稚明 邝钢 郭艳丽 沈素朋 梁佳 郭炜关键词:食管鳞癌 长链非编码RNA 喉鳞状细胞癌中LOX和CDH13的表达及意义 目的:探讨喉鳞状细胞癌(Laryngeal Squamous Cell Carcinoma,LSCC)组织中赖氨酰氧化酶(Lysyloxidase,LOX)和H-钙粘蛋白(H-cadherin,CDH13)mRNA的表达... 邝钢 赵瑞力 高国政 郭炜 杨植彬 董稚明关键词:喉鳞癌 LOX MRNA 文献传递 miR-6867及其宿主基因RAPGEFL1在食管鳞状细胞癌组织和细胞系中的表达及甲基化状态 被引量:1 2017年 目的:检测miR-6867及其宿主基因Rap型鸟苷酸交换因子1(rap guanine nucleotide exchange factor like 1,RAPGEFL1)在食管癌细胞系及食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达水平及甲基化状态,并探讨其在ESCC发生发展中的作用。方法:选取河北医科大学第四医院2014年1月至2016年1月收治的ESCC手术患者组织标本87例。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-6867及RAPGEFL1在食管癌细胞系和ESCC组织及其相应癌旁组织中的表达水平,分析miR-6867和RAPGEFL1基因表达之间的相关性。应用甲基化特异性PCR法(MSP)检测RAPGEFL1在食管癌细胞系和ESCC组织及其相应癌旁组织中的甲基化状态。结果:miR-6867在ESCC组织中的相对表达量显著低于其相应癌旁组织(P<0.05),并与淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05);RAPGEFL1基因在ESCC组织中的表达显著低于其相应癌旁组织(P<0.05),并与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期相关(P<0.05);miR-6867与RAPGEFL1在ESCC组织中的表达呈明显正相关(P<0.05)。5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)处理后,4种食管癌细胞系中miR-6867和RAPGEFL1基因的表达均增高,并且其甲基化程度明显降低。RAPGEFL1基因在ESCC组织中的甲基化率显著高于其相应癌旁组织(P<0.05),并与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期有关(P<0.05)。结论:ESCC的发生发展可能与miR-6867和RAPGEFL1的异常低表达及RAPGEFL1高甲基化状态有关,miR-6867与RAPGEFL1表达具有一致性,且RAPGEFL1基因启动子区甲基化可能是导致miR-6867与RAPGEFL1表达沉默的机制之一。 梁佳 邝钢 徐凤楼 郭炜 沈素朋 董稚明关键词:食管鳞状细胞癌