杨继珍
- 作品数:32 被引量:230H指数:12
- 供职机构:解放军第302医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 肝硬变顽固性腹水超滤浓缩回输术的护理
- 1998年
- 1.术前护理 1.1 要求有一个清洁、安静、明亮的操作间。1.2向患者说明腹水超滤浓缩回输的原理、意义及注意事项,以减轻或消除患者的顾虑和恐惧心理,以利术中配合。1.3术前二日开始使用抗生素,术日晨停用利尿剂。1.4术日晨嘱患者少量进食以清淡质软为宜。1.5术前测体温、脉搏、呼吸、血压、腹围及体重,并做好记录,嘱排空尿液。1.6准备好药物并建立静脉通路。
- 张彬陈德永杨继珍生翠娟李保森兰云吕京
- 关键词:腹水超滤浓缩回输术中配合静脉通路顽固性腹水
- 硕大利什曼原虫激活蛋白激酶C受体的基因克隆与序列分析被引量:3
- 2001年
- 成军夏小兵王刚刘妍钟彦伟王琳杨继珍
- 关键词:利什曼原虫基因克隆多聚酶链反应
- 抗HBsAg人源单链可变区抗体的筛选与可溶性抗体的表达被引量:12
- 2001年
- 采用噬菌体表面展示技术 ,以从乙型肝炎病毒 (HBV)表面抗原 (HBsAg)阳性血清超速离心纯化的HBsAg为固相抗原 ,从噬菌体单链可变区半合成抗体库中经过 5轮“吸附 洗脱 扩增”筛选过程 ,获得特异性较强的HBsAg人源单链可变区抗体 (ScFv)克隆并提取质粒 ,经SfiⅠ /NotⅠ酶切鉴定后 ,亚克隆到 pCANTAB5E表达载体中 ,转化大肠杆菌XL1 Blue。经IPTG诱导后 ,表达的可溶性HBsAg特异性ScFv以 5 0 %硫酸胺沉淀 ,经SDS PAGE电泳表明 ,XL1 Blue中表达的HBsAg可溶性ScFv的分子量约 2 8kD。免疫活性检测结果表明 ,该单链抗体具有较强的抗原结合活性和特异性。HBsAg人源单链抗体的筛选和表达成功 ,为今后HBsAg人源抗体的研究和应用奠定了基础。
- 钟彦伟成军施双双夏小兵李克董菁刘妍杨继珍
- 关键词:HBSAG噬菌体单链抗体HBV
- 人肝再生增强因子在毕赤酵母中的表达
- 2001年
- 夏小兵成军王刚杨继珍刘妍董菁王琳李克
- 关键词:肝再生增强因子毕赤酵母人胎肝
- 墨西哥利什曼原虫无鞭毛体蛋白的基因克隆化与序列分析被引量:10
- 2000年
- 目的克隆墨西哥利什曼原虫(L.mex)WR972株的无鞭毛体蛋白(amastin)的编码基因,并对其同源核苷酸序列进行分析。方法根据已克隆的亚马逊利什曼原虫无鞭毛体蛋白的编码基因序列,设计并合成无鞭毛体蛋白基因特异性引物,以墨西哥利什曼原虫WR972株的基因组DNA作为模板,进行多聚酶链反应(PCR)扩增。将扩增的DNA片段克隆到pCR2.1T载体中,进行测序,并对同源的核苷酸序列分析、比较。结果从体外培养的墨西哥利什曼原虫WR972株提取基因组DNA,以无鞭毛体蛋白基因特异性引物进行PCR扩增获得550bp的DNA片段。克隆到pCE2.1T载体片段进行的序列测定结果表明,获得了墨西哥利什曼原虫的无鞭毛体蛋白编码基因片段,与亚马逊利什曼原虫的无鞭毛体蛋白基因之间具有高度的同源性。结论实现了墨西哥利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因的克隆化,为进一步研究其表达及作为疫苗研究的候选基因奠定了基础。
- 成军钟彦伟刘妍董菁杨继珍陈菊梅
- 关键词:利什曼原虫基因克隆化
- 抗CD95单克隆抗体诱导的活化T细胞凋亡时转录因子nur77的表达
- 1999年
- 以抗CD95的特异性单克隆抗体(CH-11)诱导人T细胞Jurkat细胞系发生凋亡,Jurkat细胞在发生凋亡过程中出现典型的DNA梯形片段化,以荧光染料(PI)标记的流式细胞学技术对于发生凋亡的细胞进行定量测定,证实发生凋亡的细胞百分比在各个时间点上为6.1%~43.5%之间。以电泳泳动迁移率(EMSA)对于发生凋亡的细胞核中转录因子nur77的表达进行了研究,发现以抗CD95单克隆抗体诱导的活化T细胞发生凋亡时,nur77转录因子表达水平有显著提高。研究结果对了解细胞凋亡时的信号转导与分子生物学机制具有重要意义。
- 成军斯崇文王勤环刘妍刘妍洪卫国杨继珍
- 关键词:CD95细胞凋亡T细胞转录因子
- 杜氏利什曼原虫蛋白磷酸酶-2C的基因克隆化与序列分析被引量:6
- 2001年
- 目的 克隆杜氏利什曼原虫 (Leishmaniadonovani,Ld) 1S株蛋白磷酸酶 2C(PP2C)的编码基因 ,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗研究奠定基础。方法 体外培养杜氏利什曼原虫 1S株无鞭毛体 ,常规方法从虫体提取制备基因组DNA。以夏科氏利什曼原虫 (Leishmaniachagasi,Lc)的PP2C基因序列为参照 ,设计并合成利什曼原虫PP2C基因序列特异性的引物。结果 以杜氏利什曼原虫的基因组为模板 ,利用多聚酶链反应 (PCR)技术 ,扩增获得了杜氏利什曼原虫PP2C的全长编码基因。基因序列测定结果表明 ,杜氏利什曼原虫 1S株PP2C基因序列长度为 1317bp ,开放读码框架由 12 2 1bp组成 ,编码产物为 40 6个氨基酸残基。获得的杜氏利什曼原虫 1S株的PP2C基因与来源于夏科氏利什曼原虫的PP2C氨基酸残基序列的同源性为 95 % (387/ 40 6 )。结论 本研究克隆了杜氏利什曼原虫的PP2C基因 。
- 成军夏小兵王刚刘妍钟彦伟王琳杨继珍
- 关键词:杜氏利什曼原虫蛋白磷酸酶2C基因疫苗T细胞抗原基因克隆化
- 乙型肝炎病毒X基因在真核细胞中的表达及反式激活SV40病毒早期启动子的研究被引量:1
- 2001年
- 刘妍董菁成军夏小兵李克王琳施双双段惠娟杨继珍
- 关键词:反式激活细胞启动子SV40基因
- 丙型肝炎病毒核心蛋白人源单链可变区抗体的筛选与鉴定被引量:19
- 2001年
- 目的筛选、鉴定抗丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白的人源单链可变区抗体(ScFv)。方法采用噬菌体表面展示技术,以重组的HCV核心蛋白为包被抗原,从噬菌体单链可变区抗体库中经过3轮“吸附-洗脱-扩增”筛选过程,获得抗原结合活性较强的HCV核心蛋白特异性人源单链可变区抗体片段阳性克隆,并对其进行免疫学及核苷酸序列测定。结果筛选得到的ScFv片段具有抗HCV核心蛋白的特异性,基因序列分析结果表明符合人源单链可变区抗体基因序列的结构特征。结论利用噬菌体抗体库技术,成功获得HCV核心蛋白的特异性人源单链可变区抗体的编码基因。
- 钟彦伟成军施双双夏小兵王刚杨继珍陈菊梅
- 关键词:噬菌体丙型肝炎病毒病毒核心蛋白
- 抗HBsAg单链抗体靶向干扰素的构建及原核表达
- 2001年
- 夏小兵成军杨继珍钟彦伟王刚刘研李克董菁
- 关键词:单链抗体干扰素抗病毒药HBSAG靶向