董菁
- 作品数：153 被引量：685H指数：23
- 供职机构：厦门大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金Scientific Research Foundation for the Returned Overseas Chinese Scholars, State Education Ministry福建省农科院青年科技人才创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗HBsAg单链抗体靶向干扰素的构建及原核表达
- 2001年
- 夏小兵成军杨继珍钟彦伟王刚刘研李克董菁
- 关键词：单链抗体干扰素抗病毒药HBSAG靶向
- 乙型肝炎病毒前前S区和前X区与肝细胞癌关系的研究
- 任建林潘金水董菁周飞许鸿志陈美娅卢雅丕肖鸿敏詹小娟张志平谢晨曦刘明施华秀陈建民王琳
- 乙型肝炎病毒前前S区和前X区与肝细胞癌关系的研究（WKZ0501）是厦门市科技局“乙型肝炎病毒感染相关性疾病的防治研究”立项子课题之－。 该研究的任务指标是： 摸清我市乙型肝炎病毒流行情况及我市流行的HBV株基因结构...
- 关键词：
- 关键词：乙型肝炎病毒肝细胞癌多肽HBV宿主蛋白
- 乙型肝炎病毒全S蛋白载体的构建及自激活的研究
- 目的探讨 HBV 含 S 编码区全 S 蛋白生物活性,并构建含全 S 基因真核表达质粒。方法用 PCR 法扩增含 Not Ⅰ与 SalⅠ酶切位点的全 S 基因序列,对 pDEST32载体及全 S 基因 PCR 产物经双酶...
- 周飞任建林卢雅丕王琳张波陈美娅董菁
- 文献传递
- 截短型乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白反式激活作用的初步研究被引量：34
- 2001年
- 目的 探讨乙型肝炎病毒 (HBV )表面抗原中蛋白羧基末端缺失突变体 (MHBst)的反式激活功能。方法 用聚合酶链反应 (PCR)扩增截短的HBV表面抗原中蛋白 (MHBst167)基因 ,克隆至真核表达载体 pcDNA3 .1(-)中 ,转染COS 7细胞 ,酶联免疫吸附法 (ELISA)检测细胞MHBst167蛋白的瞬时表达 ;与报告质粒 pSV lacZ共转染COS 7细胞 ,检测 β 半乳糖苷酶的活性。 结果 构建成含有约 5 0 0bp基因的质粒 pcDNA3 .1(-) Mt ,在COS 7细胞表达出相应蛋白 ,对pSV lacZ的表达具有反式激活作用。 结论 构建的表达载体能在哺乳动物细胞中表达 ,并具有反式激活功能。
- 刘妍成军董菁李克夏小兵王刚杨继珍王琳
- 关键词：乙型肝炎病毒反式激活表面抗原
- 人三叶因子1真核载体的构建与表达
- 目的构建人三叶因子1(hTFF1)的真核载体并在真核细胞中表达。方法从人胃黏膜提取总 RNA,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)制备总 cDNA,PCR 扩增 hTFF1基因,TA 克隆至 pGEMT 载体中,测序鉴定后...
- 卢雅丕董菁周飞王琳张波陈美娅任建林
- 文献传递
- 乙型肝炎病毒前-X融合蛋白结合蛋白的筛选
- 2010年
- 目的利用酵母双杂交技术自肝细胞cDNA文库中筛选HBV前-X(pre-X)融合蛋白结合蛋白,探讨pre-X融合蛋白的生物学功能。方法 PCR扩增HBV pre-X基因序列,根据酵母双杂合体系构建诱饵质粒pDEST32-pre-X,并测定DNA序列验证。将质粒pDEST32-pre-X转化为酵母细胞MaV203,应用Western blot验证pre-X融合蛋白在酵母细胞中正确表达,再与转化为人肝细胞cDNA文库质粒的酵母细胞pDEST22配合,在营养缺陷型培养基和X-gal上三重筛选阳性菌落,提取阳性酵母菌落的猎物质粒进行DNA测序。利用核苷酸数据库及生物信息学技术,对筛选结果进行分析。结果成功构建pDEST32-pre-X诱饵质粒,Western blot证实转化诱饵质粒的酵母细胞能正确表达pre-X融合蛋白,pDEST32-pre-X及正常成人肝细胞cDNA文库共转化酵母细胞后,选择性培养出45个菌落,经缺陷培养基分离及X-gal检测后筛选出3个阳性克隆,测序结果为一种蛋白,即TCP1蛋白。结论用酵母双杂交技术筛选出1个与pre-X融合蛋白相互作用的肝细胞结合蛋白,为进一步研究HBV pre-X融合蛋白的作用提供了新线索。
- 肖鸿敏任建林潘金水施华秀许鸿志周飞董菁
- 关键词：乙型肝炎病毒酵母双杂交技术结合蛋白
- siRNA干扰纤维蛋白原α链基因对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2012年
- 背景:纤维蛋白原(FG)是由肝细胞合成、分泌的糖蛋白。除凝血和纤溶外,FG在细胞增殖、血管发生、肿瘤的发生、进展和转移中亦发挥重要作用。肝细胞癌患者血浆FG水平显著高于健康人。目的:观察以RNA干扰技术抑制FGα链(FGA)基因对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建FGA siRNA干扰质粒,将重组质粒pU6-FGA siRNA稳定转染入人肝癌细胞株HepG2,同时设置空质粒载体pU6转染组作为对照。以RT-PCR、蛋白质印迹法在mRNA和蛋白质水平验证干扰效果,以CCK-8实验和流式细胞术检测各组HepG2细胞的增殖和凋亡情况。结果:FGAsiRNA转染组HepG2细胞FGA mRNA和蛋白表达明显低于空载体转染组,细胞增殖显著受抑(P<0.001),细胞凋亡显著增加(P<0.001)。结论:RNA干扰技术能有效下调人肝癌细胞的FGA表达,抑制肿瘤细胞生长增殖并促进其凋亡。FGA可能成为肝细胞癌治疗的潜在靶点之一。
- 李莹莹巴亚斯古楞董菁任建林
- 关键词：纤维蛋白原RNA干扰细胞增殖
- 乙型肝炎病毒基因组准种与变异特点的研究被引量：44
- 2002年
- 探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因组异质性及其生物学意义。以已知HBV基因序列为依据 ,设计特异性多聚酶链反应 (PCR)引物 ,自 2例慢性HBV感染患者外周血血清中扩增HBV基因组序列 ,克隆入pGEMTeasy质粒 ,随机挑选克隆进行DNA测序并加以比较。测序结果发现 ,来源不同的 5株HBV全基因组核苷酸序列的一致率为 93 6 % ,不同克隆的 4个开放读码框架长度有明显区别 ,氨基酸序列中存有移框、缺失、替换等多种变异类型。说明来源于同一患者的HBV基因组序列之间存在有较明显的变异现象 ,在患者体内构成了准种群。
- 董菁李进施双双皇甫竞坤成军王勤环洪源李莉
- 关键词：乙型肝炎病毒基因组准种HBV
- 乙型肝炎病毒基因组新基因的研究及意义
- 乙型肝炎病毒(HBV)是一种嗜肝部分双链DNA病毒,基因组长度只有3.2kb,结构基因与调节基因序列之间重叠,甚至结构基因序列之间重叠,因此HBV DNA序列的利用率之高实属罕见.1979年首次报道HBV DNA的全基因...
- 成军董菁杨倩
- 关键词：乙型肝炎病毒流行株全基因序列血清型
- 文献传递
- 乙型肝炎病毒序列准种个体化特征的研究被引量：17
- 2002年
- 以乙型肝炎病毒(HBV)多聚酶 (P)逆转录酶 (RT)区及表面抗原 (HBsAg)主蛋白、e抗原 (HBeAg)氨基酸序列异质性来探讨HBV准种群在感染个体中的变异特点。应用多聚酶链反应 (PCR)方法自 8例慢性HBV患者血清中扩增靶基因 ,克隆入T载体 ,随机挑选 2 7株克隆测序 ,将获得基因的推断氨基酸序列进行比较后发现 :病毒结构/非结构蛋白氨基酸序列存在广泛的变异现象 ,替换突变表现出一定的个体特异性 ,其结果是导致HBV在特定的患者体内可能存在特征性的变异。本研究提示HBV在患者体内的蛋白序列多样性是乙型肝炎慢性化的一个重要原因。
- 董菁成军皇甫竞坤洪源王刚陈国凤李莉张玲霞陈菊梅
- 关键词：乙型肝炎病毒准种E抗原HBV
