刘妍
- 作品数：609 被引量：1,563H指数：29
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金Scientific Research Foundation for the Returned Overseas Chinese Scholars, State Education Ministry北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学政治法律化学工程更多>>
- 丙型肝炎病毒基因工程抗体研究
- 成军钟彦伟王刚刘妍施双双董菁李莉张玲霞陈菊梅
- 该课题组进行了丙型肝炎病毒基因工程抗体研究。研究HCV抗原靶位的基因工程抗体并进行人源化，为HCV诊断、治疗和预防开辟新途径。应用噬菌体抗体库技术，获得特异性的HCV人源化基因工程抗体。利用分子生物学和免疫学等技术进行上...
- 关键词：
- 关键词：丙型肝炎病毒人源基因工程抗体免疫组化
- 乙型肝炎病毒X蛋白的功能研究进展被引量：12
- 2002年
- 乙型肝炎病毒 (HBV)的慢性感染是引发肝细胞癌的主要危险因子 ,了解 HBV X蛋白在病毒复制及肝细胞基因表达调节中重要的生物学作用对于弄清 HBV慢性感染的预后非常重要。本文对 X蛋白的反式激活作用 ,X蛋白对细胞凋亡及在 DNA损伤修复中的作用 ,X相关蛋白的功能及 X蛋白的致癌和转化作用等研究进展做较全面的综述。
- 陆荫英刘妍
- 关键词：反式激活作用乙型肝炎病毒X蛋白
- 乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因XTP12的克隆化被引量：1
- 2004年
- 目的:应用基因表达谱芯片技术及生物信息学技术筛选并克隆乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白反式激活新型靶基因,进一步阐明HBV感染相关性疾病的发病机制. 方法:以HBV X蛋白表达质粒pcDNA3.1(-)-X转染HepG2 细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,提取总RNA 进行逆转录,对产物行基因表达谱芯片分析.应用分子生物学技术,结合生物信息学技术,克隆HBV X反式激活作用的新的靶基因. 结果:对于所获基因片段序列分析表明,其中之一为新型基因片段.从HepG2细胞提取总RNA,以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术扩增获得该新基因的全长序列,并测序证实,因其可以被X蛋白反式激活,故命名为X蛋白反式激活蛋白12(XTPl2),已在GenBank中注册,注册号: AY598792.PS2TP1基因的编码序列全长为731个核苷酸(nt),编码产物由230个氨基酸残基(aa)组成. 结论:HBV X反式激活新靶基因被成功克隆,为进一步研究HBV X蛋白的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定基础.
- 宫嫚成军纪冬刘妍郭江王建军戴久增李筠
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因克隆
- 应用抑制性消减杂交技术克隆HBV全S蛋白反式激活蛋白1的反式激活基因被引量：1
- 2005年
- 目的:应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建乙型肝炎病毒(HBV)全S蛋白反式激活蛋白1(CSTP1)的反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HBVCSTP1反式激活相关基因.方法:以HBVCSTP1表达质粒pcDNA3.1(-)-CSTP1转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,从中提取mKNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.结果:成功构建入HBVCSTPl反式激活基因差异表达的cDNA消减文库.文库扩增后得到86个白色克隆,进行菌落PCK分析,均得到100-1000bp插入片段.挑取25个含有插入片段的阳性克隆测序分析,获得23个已知基因序列和2个未知基因.未知基因的功能还正在研究中.结论:应用SSH技术成功构建了HBVCSTP1反式激活基因差异表达的cDNA消减文库.该文库的建立为进一步阐明HBVCSTP1反式调节的靶基因及致肝病发生的分子生物学机制提供理论依据.
- 白桂芹成军张树林刘妍刘蔚张黎颖
- 关键词：抑制性消减杂交技术反式激活基因S蛋白CDNA消减文库HBV基因差异表达
- 乙型肝炎病毒相关的肝硬化患者外周血单个核细胞基因表达谱的研究
- 2006年
- 目的分析乙型肝炎病毒(HBV)相关的肝硬化患者外周血单个核细胞的基因表达谱,探索慢性HBV相关的肝硬化形成的分子机制。方法应用含14000条人体cDNA的微阵列芯片和来自外周血单个核细胞的标记cDNA,分析了10例慢性HBV相关肝硬化患者和10例健康人基因表达谱。通过应用GenePix4000B扫描仪和ImaGene3.0分析软件比较Cy5标记的慢性HBV相关肝硬化来源cDNA与Cy3标记的健康人来源cDNA的杂交结果,获得个体基因的相对表达比值。结果在14000条基因中,差异表达的基因有199条,占1·42%。其中108条基因表达水平上调,91条基因表达水平下调。这些差异表达的基因主要为细胞信号转导、细胞周期和代谢、凋亡及炎症相关类基因。结论HBV相关肝硬化发病过程中,发现众多基因的差异表达,为进一步阐明慢性HBV相关的肝硬化形成的分子机制提供基础。
- 李莉韩萍刘妍纪冬陈国凤朱传琳
- 关键词：基因表达外周血单个核细胞肝炎肝硬化
- 丙型肝炎病毒NS5A蛋白的反式激活作用研究被引量：1
- 2003年
- 0引言
丙型肝炎病毒(HCV)是一种单股正链RNA病毒,编码一种多蛋白分子,在病毒和宿主细胞蛋白酶的共同裂解作用下,至少裂解为3种结构蛋白(C、E1和E2)和6种非结构蛋白(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)[1,2].NS5 A是非结构蛋白的一种,哺乳动物细胞表达的NS5A蛋白以两种形式存在,分子量分别为56 kD和58 kD.HCV NS5A是HCV基因组编码的一种最为重要的具有多种生物学活性的非结构蛋白质[3-5],是HCV基因组编码的一种具有反式激活作用等多种生物学活性的非结构蛋白质.其基因序列的变异,决定部分HCV病毒株对于IFN-α治疗的疗效应答.HCV NS5A蛋白还具有结合双链RNA激酶(PKR)的生物学活性,对于HCV感染的靶细胞的细胞周期与细胞凋亡的分子生物学调节机制密切相关[6].
- 王建军刘妍成军杨倩杨艳杰
- 关键词：丙型肝炎病毒NS5A蛋白反式激活细胞凋亡
- 四跨膜蛋白超家族与肝炎病毒的关系被引量：1
- 2004年
- 张黎颖成军纪冬刘妍党晓燕王春花邓红刘敏
- 关键词：肝炎病毒细胞间粘附分子病毒性肝炎发病机制
- 应用抑制性消减杂交技术克隆HBV全S蛋白反式激活蛋白1的反式激活基因
- 目的应用抑制性消减杂交技术(SSH)构建乙型肝炎病毒(HBV)全S蛋白反式激活蛋白1 (CSTP1)的反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HBV CSTP1反式激活相关基因。方法以 HBV CSTP1表达质粒pc...
- 白桂芹成军张树林刘妍刘蔚张黎颖
- 文献传递
- 应用抑制性消减杂交技术筛选乙型肝炎病毒核心抗原反式调节基因
- 2004年
- 目的:筛选与克隆HBcAg反式调节基因,了解其在体内的调节功能线索及机制. 方法:以分子生物学技术构建HBcAg的真核表达载体pcDNA3.1(-)-HBcAg,以毒乏达质粒pcDNA3.1(-)-HBcAg转染HepG2细胞,以空载体pcDN.A3.1(-)为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经Rsa Ⅰ酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接, 构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析. 结果:成功构建人HacAg激活基因差异表达的cDNA消减文库.文库扩增后得到33个阳性克隆,进行菌落PCR分析,均得到206-800 bp插入片段.对插入片段测序,并通过生物信息学分析获得其全长基因序列,结果共获得17种编码基因. 结论:筛选到的cDNA全长序列,包括一些与细胞生长调节、物质代谢及肿瘤发生密切相关的蛋白编码基因,推测了HBcAg在体内可能存在的调控机制的线索,尚需进一步的实验证明.
- 徐志强张鸿飞成军王建军刘妍纪冬
- 关键词：抑制性消减杂交技术乙型肝炎病毒核心抗原反式调节基因
- 应用基因表达谱芯片技术筛选NS4ATP2蛋白反式调节基因
- 2005年
- 目的:对丙型肝炎病毒非结构蛋白4A(HCVNS4A)反式激活新基因NS4ATP2转染肝癌细胞的基因表达谱进行分析,探索该基因表达对肝细胞基因表达的调节机制及其生物学功能.方法:应用基因表达谱芯片技术对重组表达质粒pcDNA3.1(-)-NS4ATP2和pcDNA3.1(-)空载体分别转染的HepG2细胞的mRNA的差异性表达进行检测.结果:基因表达谱芯片所检测的1152条目的基因均为GenBank中登录的基因,NS4ATP2表达质粒转染的细胞有29条差异表达基因,其中12条基因表达增强,17条基因表达降低.这些差异表达的基因与细胞信号转导、凋亡、肿瘤的发生密切相关.结论:基因表达谱芯片技术对于初步探索新基因的功能提供重要的资料.本实验结果为进一步阐明NS4ATP2生物学功能及HCV-NS4A的致病机制提供了理论依据.
- 杨(?)成军赵英仁黄燕萍刘妍
- 关键词：基因表达谱芯片技术反式调节基因P2蛋白PCDNA3重组表达质粒
