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cDNA文库的构建策略被引量：16: 2003年; cDNA文库在基因分离和克隆中具有重要作用 .近年来 ,随着分子生物学技术的发展 ,cDNA文库构建方法有了很大改进和提高 .; 李海红王秦秦; 关键词：CDNA文库基因文库文库构建抑制消减杂交技术

一种鉴别免疫筛选噬菌体克隆真、假阳性的方法: 2006年; 目的探讨及早鉴别用免疫学方法筛选cDNA文库得到的阳性克隆是否真实可靠的方法.方法将阳性噬菌体克隆与宿主菌按一定的比例诱导培养后,取沉淀做SDS-PAGE后行W estern b lot;同时取出一个阳性克隆进行亚克隆,直至3次亚克隆均为全部阳性.结果3次亚克隆均为全部阳性的噬菌体克隆,在W estern b lot鉴定中也呈阳性反应.结论可用W estern b lot方法来鉴别用免疫学方法筛选cDNA文库得到的阳性克隆是否真实可靠.; 马丽菊李海红李晓进王秦秦; 关键词：WESTERN BLOT 免疫筛选 CDNA文库

云南个旧肺癌细胞系GLC-82cDNA文库的构建及N35蛋白的编码基因克隆研究: 王秦秦马丽菊李海红李继梅唐睿珠陈新明姜平; 为从基因水平了解云南个旧肺癌发生发展的病变机理，该项目在国家自然科学基金(项目编号：39960078)支持下,进行了云南个旧肺癌细胞相关蛋白特性分析,该糖蛋白分子在亚细胞结构中主要分布于胞核，在肿瘤细胞有丝分裂时明确地定...; 关键词：; 关键词：肺癌基因克隆亚细胞结构

云南个旧肺鳞癌YTMLC-90细胞株cDNA文库构建和鉴定被引量：2: 2004年; 目的 :构建云南个旧肺鳞癌YTMLC 90细胞株的cDNA文库。方法 :从培养的人肺鳞癌YTMLC 90细胞株中提取总RNA ,利用经修饰的oligo(dT)引物 (含SfiⅠB酶切位点 )合成cDNA第1链。同时 ,根据真核生物mRNA 5′端帽子结构的特点 ,利用SMART核苷酸 (含SfiⅠA酶切位点 )作为cDNA第 1链在mR NA 5′端延伸出去的模板。以此序列为引物 ,利用LD PCR(long distancePCR)合成双链cDNA。双链cDNA经SfiⅠ (ⅠA和ⅠB)酶切和过柱分级分离后 ,克隆入经SfiⅠ酶切的载体λTripIE× 2 ,经体外包装即为cDNA文库。结果 :人肺癌细胞株YTMLC 90的cDNA文库中 ,含有 1.0 1× 10 9pfu/L个重组子 ,重组率为 93.2 %。将该文库扩增后 ,克隆数可达 5 .2 4× 10 12 pfu/L ,插入cDNA的长度为 75 0～ 30 0 0bp。结论 :所构建的cDNA文库具有较好的质量 ,为进一步筛选、克隆肺癌特异性表达基因奠定了基础。; 李海红马丽菊王秦秦; 关键词：肺癌 CDNA文库

人蛋白磷酸酶2A点突变的肺癌相关性抗原基因: 人蛋白磷酸酶2Aα突变的肺癌相关基因序列及制备方法。本发明用特异性单克隆抗体N35对小细胞肺癌细胞H128cDNA表达文库进行免疫学筛选，获得了多核苷酸序列SEQ ID NO：1碱基的C－A点突变的cDNA片段；与Gen...; 王秦秦马丽菊李继梅唐睿珠李海红; 文献传递

肺癌相关性抗原基因的克隆与鉴定: 目的:外源基因导入表达载体后可在原核或真核系统表达出目的蛋白,应用针对该蛋白的特异抗体可从数目庞大的c DNA文库中免疫筛选出目的蛋白的编码基因或片段。用抗肿瘤单克隆抗体对肿瘤细胞的cDNA文库中进行免疫筛选,所获得的目...; 王秦秦马丽菊李海红李继梅; 文献传递

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李海红