李晓进
- 作品数：19 被引量：44H指数：4
- 供职机构：云南省第二人民医院更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金云南省应用基础研究基金云南省科技厅-昆明医学院应用基础研究联合专项资金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学更多>>
- 白血病细胞系K562侧群细胞的分选及其初步研究被引量：1
- 2010年
- 近年来对干细胞和肿瘤研究的深入,已表明干细胞自我更新和肿瘤的生成有惊人的相似之处,而且肿瘤中某些数量极少的细胞具有干细胞特性,提出了肿瘤干细胞学说,认为肿瘤干细胞是肿瘤的转移、复发和耐药的根源.
- 范瑞华李惠民李晓进喻镁佳金从国
- 关键词：侧群细胞白血病细胞系分选细胞自我更新细胞特性细胞学说
- 斯钙素2在高糖诱导的肝细胞炎症反应中的作用机制被引量：4
- 2019年
- 目的研究斯钙素2(STC2)在糖尿病肝病中的作用机制。方法分析GEO数据库,筛选与糖尿病肝病模型相关的新颖分子。分析链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病模型小鼠肝脏的STC2的表达水平。高糖诱导处理LO2肝细胞,检测STC2表达变化,并分析TNF-α和IL-6的变化,评价STC2与TNF-α和IL-6的表达相关性。构建稳定高表达STC2的LO2细胞株,qRT-PCR分析高糖处理下过表达细胞与对照细胞中TNF-α和IL-6的表达。Western Blot分析STC2过表达细胞与对照细胞的STAT3和NF-κB的激活水平;MTT实验检测过表达STC2的LO2细胞的增殖能力。结果高脂饮食和STZ诱导糖尿病模型小鼠的肝组织STC2表达水平显著增加。在LO2肝细胞中,高糖能够诱导STC2的表达,并诱导炎症因子TNF-α和IL-6的表达,STC2与TNF-α和IL-6的表达存在正相关的关系。过表达STC2能够激活STAT3和NF-κB通路,并抑制肝细胞的增殖。结论在高糖环境下肝细胞的STC2被诱导表达,并且与促炎性因子TNF-α和IL-6存在正相关的关系。过表达STC2还能够激活STAT3和NF-κB通路,并抑制肝细胞的增殖。
- 陶文玉陈郊丽李晓进熊煜欣洪超王晓苓
- 关键词：炎症信号通路肝细胞增殖
- 实时定量荧光反转录-聚合酶链反应检测急性白血病AML1／ETO融合基因
- 2009年
- 目的建立实时定量荧光反转录-聚合酶链反应（RQRT—PCR）的方法并用来检测急性髓系白血病（AML）-M2患者中AML1／ETO融合基因的拷贝数，观察患者体内融合基因阳性率、该融合基因转录水平的变化情况及AML1／ETO融合基因阳性患者对治疗的反应。方法利用含AML1／ETO融合基因的Kasumi-1细胞株构建质粒标准品并制作标准曲线，检测25例AML—M2患者的骨髓及外周血标本45份，个别患者连续监测融合基因转录表达水平。25例患者均同时行流式细胞术免疫分型检测及骨髓细胞染色体检查，确诊后给予MA方案进行诱导缓解。结果7例（28％）AML—M2初发确诊患者检测到AML1／ETO阳性（AML1／ETO：ABL为0．01～19．2），其中5例（20％）有t（8；21）（q22；q22）。连续监测患者融合基因转录表达水平与临床缓解和复发的变化情况相吻合。7例AML1／ETO融合基因阳性患者均在MA治疗1个疗程后达完全缓解，AML1／ETO融合基因下降3个数量级。其余18例完全缓解11例。连续监测7例AML1／ETO融合基因阳性患者6个月均处于完全缓解状态。结论RQRT—PCR技术成熟、操作简便，检测白血病融合基因结果准确稳定，对于临床明确诊断、具体分型、动态观测肿瘤负荷、选择治疗方案、评估治疗效果和预后都有较大价值。
- 李斌喻镁佳梁洋李晓进胡杰陈琪李惠民
- 关键词：白血病基因融合反转录聚合酶链反应AML1/ETO
- NSE在骨髓瘤骨病中的表达被引量：7
- 2012年
- 目的多发性骨髓瘤(MM)是来源于B淋巴细胞的恶性肿瘤,以终末分化的浆细胞的克隆性增生为显著特征。骨质破坏是其突出的临床特点之一,与疾病的预后直接相关。多种细胞因子参与了骨质破坏的过程。加强对MM骨病机制的研究将为临床靶向治疗和改善患者生存质量提供更好的依据。本研究旨在探讨神经元特异性烯醇化酶(NSE)在骨髓瘤骨病中的作用。方法采用ELISA和实时荧光定量RT-PCR方法,对MM患者血浆和骨髓中以及骨髓瘤细胞株U266中NSE水平进行定量分析,初步分析其在骨髓微环境中的表达情况,了解其与MM骨病的关系。结果U266和67%的患者中NSE水平明显高于对照组(P<0.01),且随着临床分期和骨质破坏程度的增加,NSE表达总体呈上升趋势。结论 U266和大部分骨髓瘤骨病患者中NSE表达水平增高,且与MM骨病程度和疾病分期相关,提示NSE可能在骨髓瘤骨病中起重要作用。
- 高维李惠民李晓进李斌何迪喻镁佳
- 关键词：多发性骨髓瘤神经元特异性烯醇化酶骨质破坏
- 人淋巴瘤Raji细胞系中的边缘细胞:淋巴瘤干细胞存在之可能被引量：1
- 2011年
- 背景:已有研究提示急性白血病、多发性骨髓瘤中肿瘤干细胞富集于SP细胞中,且免疫表型及生物学特性相比于主群细胞存在明显的异质性。而关于淋巴瘤淋巴瘤干细胞的研究报道甚少。目的:检测人淋巴瘤Raji细胞系中是否存在SP细胞,分选该群细胞后观察其与非SP细胞在分化抗原和P-糖蛋白表达以及细胞周期方面的差异,探讨淋巴瘤干细胞存在的可能性。方法:Hoechst-33342染色细胞后运用带紫外激发光的流式细胞仪进行Raji细胞系SP细胞的检测及分选。观察不同质量浓度维拉帕米对SP细胞抑制的程度,选择最佳抑制浓度。分选后分别检测SP和非SP细胞P-糖蛋白、分化抗原CD34,CD19,CD20,CD5表达以及细胞周期,并进行对比。结果与结论:Raji细胞系中存在SP细胞,比例在2%左右,当维拉帕米质量浓度为50mg/L时能被完全抑制。SP和非SP细胞CD20阳性表达率分别为18.2%和93.6%,CD5阳性表达率分别为78.0%和22.2%;P-糖蛋白表达差异无显著性意义,但SP中阳性细胞的平均荧光强度强于非SP细胞。提示Raji细胞系中SP与非SP细胞在分化程度、多药耐药性方面具有明显的差异,SP细胞是具有明显"异质性"的细胞亚群。据此可初步推测,Raji细胞系的构成也类似肿瘤干细胞分级组成模式,而淋巴瘤干细胞则有可能富集于SP亚群中。
- 谢健李晓进金从国喻美佳李惠民
- 关键词：淋巴瘤SP细胞分化抗原肿瘤干细胞
- 一定浓度下三氧化二砷对T细胞淋巴瘤Hut-78细胞株增殖的影响被引量：2
- 2011年
- 背景:近年来有将三氧化二砷试用于T细胞肿瘤的有效报道,但未见其治疗机制的相关研究。目的:检测三氧化二砷对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞的抑制增殖、诱导凋亡及细胞周期的影响。方法:分别采用MTT、PI单标记流式细胞术和TUNEL法检测2,5,10μmol/L的三氧化二砷干预24,48,72h,对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞株抑制增殖、诱导凋亡和细胞周期的影响,及其凋亡相关基因bcl-2及血管内皮细胞生长因子基因表达的变化。结果与结论:在一定的浓度范围内,三氧化二砷对Hut-78细胞存在增殖抑制作用,其增殖抑制作用在一定程度上可能与下调血管内皮细胞生长因子基因的表达有关,同时还存在一定的细胞毒作用;三氧化二砷可诱导Hut-78细胞发生凋亡,凋亡机制主要发生在G2～M期,其凋亡作用可能与下调bcl-2基因表达有关。三氧化二砷对Hut-78细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用呈时间剂量依赖性。
- 张学美王婷李晓进赵亮李惠民
- 关键词：三氧化二砷T细胞淋巴瘤细胞增殖细胞凋亡BCL-2基因
- 白血病K562细胞株侧群细胞的分选及其初步研究
- ＜正＞目的:鉴定人慢性粒细胞白血病细胞株K562中是否存在侧群（SP）细胞,并观察该SP细胞亚群与非SP（NSP）细胞亚群在部分白细胞分化抗原,耐药蛋白,细胞周期以及BCR/ABL融合基因表达差异,从而进一步认识SP细胞...
- 李惠民范瑞华李晓进喻镁佳
- 文献传递
- 骨髓增殖性疾病JAK2V617F点突变研究被引量：2
- 2009年
- 本研究旨在对bcr/abl融合基因阴性的骨髓增殖性疾病(MPD)病人进行JAK2V617F点突变检测,探讨该突变在此类病人中的发生率和临床意义。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测70例典型MPD病人bcr/abl融合基因,用等位基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR)检测样本JAK2V617F点突变,对有突变的病例进行测序验证。结果表明,慢性髓系白血病(CML)病人bcr/abl融合基因均为阳性,JAK2V617F突变为阴性;余bcr/abl融合基因均为阴性,JAK2V617F阳性率在真性红细胞增多症(PV)病人为75%,在原发性血小板增多症(ET)病人为30%,在特发性骨髓纤维化(IMF)病人为50%。JAK2V617F在CML和bcr/abl阴性MPD病人中的分布有显著性差异(p<0.05)。结论:JAK2V617F可能为真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、特发性骨髓纤维化的特征性分子事件,可作为一个独立的分子指标用于此三类疾病的临床诊断。
- 徐媛媛李惠民李晓进杨玲胡灯明
- 关键词：骨髓增殖性疾病JAK2V617F
- 血液肿瘤细胞株中侧群细胞的检测和分选被引量：7
- 2010年
- 背景:侧群细胞广泛分布在多种成体组织,胚胎和某些肿瘤细胞系中,在不同的成体组织中含量不尽相同。血液肿瘤是危害人类的主要疾病之一,在血液肿瘤进行侧群细胞分布和方法研究对认识侧群细胞有重要的意义。目的:鉴定血液肿瘤的4个细胞株中是否存在侧群细胞,并掌握稳定的检测和分选侧群细胞的方法。方法:利用干细胞高效能将Hoechst33342荧光染料泵出细胞的特性,采用流式细胞仪检测在NB4、Raji、K562/ADM和K562细胞株中是否存在侧群细胞;对分选后K562两亚群细胞进行侧群细胞检测,以检测分选细胞的纯度。结果与结论:经Hoechst33342染色,流式细胞仪分析结果显示在4个血液肿瘤细胞株NB4、Raji、K562/ADM和K562细胞株中均存在侧群细胞,这群细胞比例均少,分别为0.8%、2.7%、1.3%和2.7%,能被Verapamil完全抑制。分选K562细胞侧群和非侧群细胞再次检测发现分选细胞纯度高。
- 范瑞华李惠民李晓进喻镁佳金从国
- 关键词：白血病干细胞侧群细胞流式细胞术肿瘤干细胞细胞株
- 神经元特异性烯醇化酶和U266细胞株对破骨样细胞作用的研究被引量：1
- 2016年
- 目的探讨神经元特异性烯醇化酶(NSE)和人多发性骨髓瘤细胞U266对人破骨样细胞(OLC)功能的影响。方法采用正常人外周血单个核细胞加用细胞核因子κB受体激治蛋白配体(RANKL)+巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的方法诱导培养OLC;实验分3组,NSE组:将6孔培养板中培养14d的OLC,分别加入100ng/mL重组人NSE培养24、48、72h;共培养组:将6孔Transwell小室下室中培养14d的OLC,各上室分别加入1×105/孔U266细胞进行共培养24、48、72h;对照组:单独培养的OLC。通过实时荧光定量PCR比较NSE和U266细胞株对OLC的RANKL、扩胃蛋白(OPG)、IL-6和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)mRNA转录水平的影响。结果共培养组、NSE组和对照组RANKL、OPG、IL-6mRNA在OLC均不表达;与对照组相比,共培养组、NSE组的TRAP mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01);TRAP mRNA表达水平的升高尤其以48h和72h明显。结论本试验中OLC表达TRAP,NSE是促进骨髓瘤骨病中OLC分化和成熟的因素,提示NSE能增强OLC的活性。
- 袁忠涛卿晨李晓进张学美史明霞黄颖李惠民
- 关键词：磷酸丙酮酸水合酶骨髓瘤骨病破骨细胞酸性磷酸酶
