王秦秦 作品数:76 被引量:110 H指数:6 供职机构: 昆明医学院第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 云南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
单克隆抗体N-35识别SLE血清相应抗原研究 1993年 本文应用间接酶联免疫吸附方法,对119例血清中N-35相应抗原表达进行检测,结果表明,59例系统性红斑狼疮阳性表达率为71%,18例肺癌阳性表达为50%,12例良性疾患阳性表达率为25%,10例乳癌阳性表达为20%,20例健康献血者假阳性表达为15%,红斑狼疮与良性疾病和健康人之间阳性率比较有显著性差异(P<0.01),鉴于该抗体与红斑狼疮血清反应阳性率高,提示进一步研究,为SLE诊断提供新途径将会有一定意义。我们在用自制的鼠抗人肺癌单克隆抗体(McAb)N-35、F-19和SIA_2进行肺癌血清相关抗原研究过程中,发现McAb N-35对SLE血清有较高的阳性反应率,本文特将初步结果简报如下: 姜平 陈新明 孟桦 王秦秦 郝萍 董坚 周克敏关键词:单克隆抗体 ELISA 红斑狼疮 肺癌细胞相关蛋白分子N35的实验研究 被引量:2 2000年 目的分析肺癌相关蛋白N35的有关特性 ,探讨其潜在的临床应用价值。方法以抗人肺癌mAbN 35作为免疫探针 ,用免疫沉淀和免疫印迹法 ,测定其相关抗原在肺癌组织、肺癌细胞系GLC 82 ,宫颈癌细胞系HeLa ,肝癌细胞系HepG 2 ,乳腺癌细胞系PMC ,正常人心脏及肺组织的存在与分布情况 ;用N 聚糖酶酶解方法确定肺癌相关蛋白N35与糖蛋白分子的关系 ;用差速离心技术分离出肺腺癌细胞系GLC 82亚细胞结构中的胞膜、胞核及线粒体成分 ,经免疫印迹法测定相关蛋白N35在亚细胞结构中的分布状况 ;用免疫荧光技术检测肺癌相关蛋白N35在肿瘤细胞有丝分裂过程中的功能结构定位。结果肺癌相关蛋白N35是一种糖蛋白分子 ,不存在于正常人心脏及肺组织蛋白组分中 ,而是以不同分子质量的形式分布于GLC 82 ,HeLa,HepG 2和PMC细胞蛋白中 ;在亚细胞结构中主要分布于胞核 ,线粒体次之 ,胞膜上分布最少 ,不支持其以膜蛋白或跨膜蛋白的形式存在 ;在肿瘤细胞有丝分裂进入S至G2 期时 ,明确地定位于中心粒(centriole)结构上 ,提示其功能可能与肿瘤细胞的无限制增殖有关。结论肺癌相关蛋白N35是一种只存在于肿瘤细胞并与其无限增殖密切相关的蛋白分子 ,有可能具有调节肿瘤细胞生长的作用。 王秦秦 姜平 李继梅 唐睿珠 陈新明关键词:肺癌细胞 中心粒 宣威肺腺癌细胞系XLA-07的建立及特征 被引量:1 2012年 目的建立云南省宣威地区女性肺腺癌细胞系,为研究该地区女性肺癌发病机制提供体外实验模型。方法以手术切除的肺癌组织为标本,采用原代细胞培养法进行体外培养,建系后通过检测细胞形态、细胞生长曲线、群体倍增时间、细胞分裂指数、细胞周期和软琼脂克隆形成率、染色体核型、细胞角蛋白、CD分子、体外侵袭力和异种移植致瘤性等指标,分析鉴定所建细胞系的主要细胞生物学特征。结果新建立的XLA-07细胞生长稳定,可连续长期传代,形态呈梭形与多边形,异型性明显,电镜下可见微腺腔与排列紊乱的微丝,免疫细胞化学染色显示细胞角蛋白7、细胞角蛋白18、广谱角蛋白和上皮细胞膜抗原均呈阳性,细胞高表达CD59与CD13,细胞生长曲线呈“S”形,群体倍增时间约46.7h,细胞分裂指数为1.5%,软琼脂克隆形成率为8.3%,细胞周期G0/G1期占76.9%,G2/M期占8.0%,S期占15.1%,染色体主干系为亚三倍体核型,众数为66条,中位数64条,符合恶性腺上皮细胞特征。体外侵袭力检测发现细胞可穿过细胞外基质胶,但未能在裸鼠皮下形成稳定的移植瘤。无支原体污染。结论新建立了一个人肺腺癌细胞系,命名为XLA-07,该细胞系符合建系标准,是一个新建立的宣威女性肺腺癌细胞系。 马丽菊 王红治 边莉 邵文萍 唐睿珠 王秦秦 金克炜关键词:细胞系 细胞培养技术 肺肿瘤 腺癌 高血压病中不同证型代谢差异及心脏重构性变化 马以骝 杨志敏 余化霖 李劲涛 王秦秦 李玉 王义 刘文春 高血压病伴随的血液动力学紊乱和心血管重构及代谢率乱,参与导致心脑肾等器管的损害,是高血压病持续和恶化的基础和心脑血管事件和病残病死率的独立危险因素。该课题对高血压病心血管重构及代谢紊乱与中医辨证分型间关系进行了较全面和深...关键词:关键词:高血压病 中医辨证分型 心脏重构 慢性粒细胞白血病演变过程中BCR-ABL作用的分子机制 被引量:1 2007年 慢性粒细胞白血病CML是造血干细胞的恶性克隆增生性疾病。目前认为BCR—ABL是CML发病的主要分子机制,就慢性粒细胞白血病演变过程中的BCR—ABL作用的分子机制研究新进展作一综述。 李彩霞 白鹏 王秦秦关键词:CML 分子机制 shRNA对肺癌相关基因抑制作用的实验研究 2007年 目的:利用RNA干扰(RNAi)技术,研究突变型蛋白磷酸酶2A(PP2A)α催化亚基编码基因的小发夹RNA(shRNA)对人肺癌GLC-82细胞的影响。方法:根据靶基因的不同区域设计4组shRNA,采用体外转录法合成,利用阳离子脂质体转染入GLC-82细胞,孵育48小时后,观察细胞形态学改变,MTT法检测细胞的存活率,免疫印迹法检测蛋白质的表达。结果:与空白对照相比,4组shRNA作用不尽相同,其中一组shR-NA可以明显抑制细胞的增殖,出现部分细胞脱落死亡,并且抑制GLC-82细胞目的蛋白的表达。结论:成功筛选出一段能特异而高效地抑制突变型PP2Aα催化亚基基因表达的shRNA,为进一步研究该基因的功能和作用机制提供了新的手段。另外,应用RNA干扰技术可抑制突变型PP2Aα催化亚基编码基因在人肺癌GLC-82细胞中的表达,有望成为肺癌基因治疗新的研究线索。 徐鹏飞 王秦秦 朱中山关键词:SHRNA RNAI 突变型 治疗性单克隆抗体研究新进展 被引量:8 2007年 治疗性单克隆抗体的快速发展在人类以肿瘤为主的多种疾病的治疗方面发挥至关重要的作用。为了降低鼠源抗体引起的超敏反应,治疗性单克隆抗体已由改型抗体,人源化抗体发展到全人抗体。随着生物技术的不断发展,相信人源化单克隆抗体的前景会越来越广泛。 贾建桃 马丽菊 王秦秦关键词:单克隆抗体 人源化 人源化抗体 麦芽凝聚素层析柱纯化的肺癌相关抗原 2000年 目的纯化并分析肺癌相关抗原的有关特性。方法采用商品化麦芽凝聚素 Wheatgerm L ectin- Sepharose- 6 MB层析柱和自制抗人肺癌单克隆抗体 N- 35 - Sepharose- 4B层析柱纯化肿瘤相关抗原 ,比较纯化结果 ;用免疫印技术测定肺癌相关抗原在肺癌、肝癌、宫颈癌、乳腺癌细胞及正常人心脏及肺组织的存在及分布情况 ;用差速离心技术分析肺癌相关抗原在亚细胞结构的布状况 ;用免疫荧光技术探测肺癌相关抗原在肿瘤细胞有丝分裂过程中的染色体结构定位。结果经麦芽凝聚素纯化的肺癌相关抗原 N35以不同分子量形式存在于肺癌、肝癌、宫颈癌及乳腺癌细胞的蛋白组分中 ,在正常人心脏及肺组织中无表达 ;在亚细胞结构中主要分布于胞核 ,线粒体次之 ,胞膜上分布最少 ,主要不以膜蛋白或跨膜蛋白的形式存在 ,并定位于肿瘤细胞有丝分裂中期 (methaphase)的中心粒 (centriole)结构上。结论肺癌相关抗原 N35是一种重要的肿瘤相关抗原 ,其功能很可能与肿瘤细胞无限制增殖活动有关。麦芽凝集素亲和层析法是纯化肺癌相关蛋白 N35简便有效的途径。 王秦秦 姜平 李继梅 唐睿珠 陈新明关键词:肺癌相关抗原 肺肿瘤 超声热疗抗肿瘤实验研究 超声热疗结合手术或放疗治疗恶性肿瘤是近年来发展的一种临床综合治疗方案。我院肿瘤放疗科引进一台 KL-800型微电脑超声肿瘤治疗仪,对各种表浅恶性肿瘤特别是鼻咽癌颈部淋巴结转移.乳腺癌胸壁转移热疗后立即放疗,已取得可喜的疗... 唐睿珠 李继梅 王秦秦 谢道昌 蔡朝英托瑞米芬联合顺铂对人肺腺癌细胞株GLC-82的抑制作用研究 被引量:1 2009年 目的研究托瑞米芬(TOR)对人肺腺癌细胞株GLC-82的抑制作用及其与顺铂(DDP)联用的协同效应,为肺癌的综合治疗提供新思路。方法用MTT显色法检测TOR及与DDP联用后对GLC-82细胞的抑制作用,测定其吸光度(absorbance,A)值。采用real time RT-PCR法检测细胞p53、p21基因的表达,Western Blotting法检测p53、p21蛋白表达,探讨其可能的机制。结果TOR能直接抑制GLC-82细胞的生长,浓度大于5μmol/L的TOR可明显增强DDP的细胞毒副反应,DDP可协同TOR提高p53和p21基因mRNA的表达水平,且DDP联合TOR后使p53及p21蛋白表达增加。结论TOR与DDP联用对GLC-82细胞具有显著的协同抗肿瘤效应。TOR可能与p53蛋白依赖机制以及P21蛋白诱导表达有关。 夏云红 张灿珍 马丽菊 王秦秦关键词:肺癌细胞株 托瑞米芬 顺铂