李忠稳
- 作品数：15 被引量：77H指数：4
- 供职机构：安徽医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省自然科学基金上海市博士后基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 库容性Ca^(2+)内流参与ACh诱导的大鼠远端结肠平滑肌收缩被引量：4
- 2006年
- 应用生物换能技术和Ca2+通道特异性阻断剂观察并记录大鼠离体远端结肠平滑肌收缩张力的变化,分析库容性 Ca2+内流(capacitative Ca2+ entry,CCE)是否与ACh诱导的离体远端结肠平滑肌收缩反应有关。结果表明,以无钙的Krebs 液灌流或应用EGTA螯合细胞外Ca2+后,高K+及ACh引起的远端结肠平滑肌收缩几乎完全消失。电压操纵性Ca2+通道阻断剂veiapamil也能减弱高K+及ACh引起的远端结肠平滑肌收缩,其减弱的程度分别为74％和41％。在无钙的Krebs液中, 5 μmol／L ACh可引起离体肠管瞬时性收缩,这是由肌质网(sarcoplasmic reticulum,SR)释放钙所致;然后加入10 μmol／L阿托品(atropine),并在此基础上恢复细胞外Ca2+(2．5 mmol／L),结肠平滑肌则出现持续性收缩,待收缩反应达峰值时,加入5μmol／L verapamil,收缩无明显变化,且该收缩反应对钙库操纵性通道(store-operated Ca2+ channel,SOCC)阻断剂La3+ 敏感,20,50和100 μmol／L的La3+使上述收缩张力分别降低15％,23％和36％,且呈浓度依赖性,但对Cd2+不敏感。研究结果提示,细胞外Ca2+内流对高K+及ACh介导的离体远端结肠平滑肌持续性收缩是必需的,由ACh诱导的远端结肠平滑肌收缩至少包括SR释放钙引起的短暂性收缩及受体操纵性Ca2+通道(receptor-operated Ca2+ channel,ROCC)、电压操纵性Ca2+通道(voltage-operated Ca2+ channel,VOCC)和CCE介导的胞外Ca2+内流等途径。这将从通道水平进一步分析消化管平滑肌收缩的机制和特征,亦将为预防和控制因胃肠动力紊乱所致的消化管疾病寻求有针对性的药物干预和治疗提供理论依据。
- 孔德虎周华宋洁柯道平胡金兰李忠稳马嵘
- 关键词：乙酰胆碱结肠
- P2受体介导对大鼠三叉神经节神经元电压门控性钙离子通道的作用被引量：6
- 2013年
- 目的应用全细胞膜片钳研究P2受体介导对大鼠的三叉神经节(TG)神经元上电压门控性钙离子通道(VGCC)的作用。方法急性分离大鼠TG神经元细胞,通过全细胞膜片钳记录电压门控性钙离子通道电流,分别灌流腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)及P2X、P2Y受体的激动剂,观察其对VGCC电流的作用。结果 ATP对大鼠TG神经元细胞的VGCC电流有可逆的抑制作用(P<0.05),P2X受体激动剂αβ-meATP能够显著抑制TG神经元的VGCC电流(P<0.05),而P2Y受体激动剂2-MeSADP对VGCC电流无明显作用。结论 P2受体介导对大鼠的TG神经元上VGCC电流有抑制作用。
- 孙晖李国超解敏刘悦雁李忠稳王烈成王元银周健张志愿
- 关键词：三叉神经节P2受体全细胞膜片钳
- 银杏叶总黄酮介导的豚鼠腹腔神经节细胞的去极化被引量：1
- 2006年
- 目的观察并分析银杏叶总黄酮(TFG)对豚鼠离体腹腔神经节(CG)细胞膜电位的影响。方法应用细胞内生物电记录技术和离体神经节灌流给药方法。结果TFG可使45·8%的CG细胞去极化,幅度和时程分别为(7·9±0·7)mV和(245·9±29·2)s,且表现剂量依赖性;10%超极化;另有10%出现先超极化后去极化的双相反应;还有34%几乎不发生反应。多数细胞的去极化可被低钙/高镁Krebs液部分阻断,但不受胆碱和肾上腺素受体阻断剂的影响。在TFG诱发的CG细胞去极化的同时伴膜电阻减小(47·2%)、增大(21·8%)或不变(30·9%);无钠或无钙的Krebs液可部分阻断CG细胞去极化,而四乙基铵则使细胞去极化增强。结论TFG可诱发豚鼠CG大多数细胞的去极化,其机制可能与Na+、Ca2+内流增强和K+外流减弱有关。
- 胡金兰张玲孔淼柯道平黄九龙李忠稳马嵘孔德虎
- 银杏叶提取物对大鼠冷应激引起的胃肠动力紊乱及NO含量变化的影响被引量：15
- 2005年
- 目的探讨银杏叶提取物对冷束缚应激引起的胃肠动力紊乱及NO含量变化的影响。方法采用冷束缚应激的方法建立肠功能紊乱模型,应用葡聚糖蓝2000(DB2000)作为染料观察EGb和冷束缚应激状态对胃排空率、小肠推进率的影响,并利用比色法观察大鼠胃肠组织、血浆中NO含量的变化。结果冷束缚应激可抑制大鼠胃排空速度(P<0.05)及小肠推进率(P<0.01),EGb干预可明显拮抗冷束缚应激引起的胃排空速度及小肠推进率降低(P<0.05);EGb可以降低冷束缚应激引起的血浆中NO含量的升高(P<0.01)。结论EGb对冷束缚应激所诱发的肠道功能紊乱具有正向调解作用,NO可能在这一过程中发挥了作用。
- 柯道平杜鹃唐影高莉李忠稳胡金兰王刚孔德虎
- 关键词：银杏叶提取物冷束缚应激胃肠动力一氧化氮
- 银杏叶总黄酮对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用被引量：11
- 2006年
- 目的探讨银杏叶总黄酮(FG)对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用及其机制。方法利用链脲佐菌素(STZ)制备实验性糖尿病大鼠心肌损伤模型,并采用分光光度法和电镜测微技术分别观察了不同剂量的FG对糖尿病大鼠心肌组织丙二醛(MDA)、肌酸激酶(CK)、一氧化氮(NO)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)的活性的影响以及心肌超微结构的改变。结果100、200mg/(kg·d)的FG可明显抑制心肌MDA含量升高及CK含量的降低;50、100、200mg/(kg·d)的FG可提高心肌SOD活力,也可显著抑制心肌NO含量的降低及NOS活性的下降,其中200mg/(kg·d)的FG还可提高心肌LDH活力。电镜下观察:糖尿病大鼠心肌损伤主要表现为心肌纤维水肿或断裂,肌小节失去正常结构,部分横纹消失,线粒体肿胀;200mg/(kg·d)的FG可明显逆转心肌损伤。结论FG对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用,可能与抑制心肌组织氧化应激、抗自由基损伤、防止NO的降低及减轻心肌组织损伤等过程有关。
- 宋洁胡金兰柯道平黄九龙周华李忠稳马嵘孔德虎
- 关键词：自由基
- 大鼠结肠平滑肌细胞的钙库操纵性通道被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨大鼠结肠平滑肌细胞是否存在钙库操纵性通道(SOC)。方法:荧光探针Fura-2/AM标记细胞内游离Ca2+后,用荧光分光光度计检测毒胡萝卜素(thapsigargin)和咖啡因(caffeine)耗竭胞内钙库后激活的SOC通道对酶解分离的大鼠结肠平滑肌细胞[Ca2+]i的影响。结果:在无Ca2+缓冲液中,thapsigargin(1μmol/L)以及caf-feine(10 mmol/L)分别使[Ca2+]i由静息时(68.32±3.43)nmol/L升高至(240.85±12.65)nmol/L(、481.25±34.77)nmol/L,继之,向细胞外液中引入两种浓度的Ca2+(1.5 mmol/L和3.0 mmol/L),导致[Ca2+]i进一步升高,分别为(457.55±19.80)nmol/L、(1005.93±54.62)nmol/L;(643.88±34.65)nmol/L、(920.16±43.25)nmol/L。且上述升高效应对维拉帕米(verapamil,5μmol/L)以及KCl引起的细胞膜去极化不敏感,但可被La3+(1 mmol/L)抑制。结论:在酶解分离的大鼠结肠平滑肌细胞上,存在胞内钙库耗竭激活的SOC通道,为支持在电兴奋性细胞上存在库容性Ca2+内流提供了实验和理论依据。
- 周华孔德虎马嵘柯道平李忠稳胡金兰宋洁
- 关键词：结肠平滑肌细胞毒胡萝卜素咖啡因
- 银杏叶提取物对大鼠不同状态胃动力的影响及其机制被引量：1
- 2008年
- 目的探讨银杏叶提取物(EGb)对正常状态和冷束缚应激引起的胃肠功能紊乱的情况下大鼠胃动力的影响及可能机制。方法采用冷束缚应激的方法建立胃肠功能紊乱模型,应用葡聚糖蓝2000(DB-2000)作为染料观察EGb在正常及应激状态对胃排空速率的影响;并利用比色法观察大鼠胃组织和血浆中一氧化氮(nitricoxide,NO)含量的变化。结果在正常状态下,EGb对胃排空速率无显著性影响。冷束缚应激可导致大鼠胃排空减慢(P<0.05)。EGb干预可明显拮抗应激引起的胃排空减慢(P<0.05)。EGb对正常大鼠胃组织和血浆中NO含量没有影响;冷束缚应激可导致胃内NO含量降低(P<0.01),而血浆中NO升高(P<0.01)。EGb可降低应激引起的血浆NO含量的升高(P<0.01)。结论EGb在不同状态下对大鼠胃动力的影响有所不同,具有正相调节作用。NO可能参与了EGb对大鼠胃动力的调节作用。
- 杜鹃柯道平胡金兰李忠稳孔德虎
- 关键词：银杏叶提取物胃动力冷束缚应激一氧化氮
- 库容性Ca^(2+)内流介导大鼠远端结肠平滑肌收缩被引量：25
- 2006年
- 目的探讨库容性Ca2+内流(capac itative Ca2+entry,CCE)是否参与大鼠远端结肠平滑肌兴奋-收缩偶联过程。方法利用器官离体装置、张力换能器、Powerlab 4/25T数据采集分析系统测定远端结肠平滑肌的张力。结果毒胡萝卜素(thapsigargin,TG,10 nmol.L-1~1μmol.L-1)诱导结肠平滑肌条产生持续的张力性收缩,不同浓度TG所致的同步收缩反应张力不同。在无钙Krebs液(包含1 mmol.L-1EDTA)中使用TG将肌条培养35 m in后,再加入Ca2+2.5mmol.L-1,比未使用TG处理的肌条产生的收缩张力明显提高(99%±28%vs70%±8%)。且TG耗竭胞内钙库后再复钙所致的收缩效应,不受L型钙通道阻断剂verapam il影响,但可被SOC通道阻断剂La3+减弱。结论TG耗竭胞内钙库后再复钙诱导的大鼠远端结肠平滑肌收缩反应由CCE介导,提示CCE是提供大鼠远端结肠平滑肌收缩的激活信号Ca2+的来源之一,参与完成结肠平滑肌兴奋-收缩偶联过程。
- 柯道平周华李忠稳孔德虎马嵘
- 关键词：毒胡萝卜素
- 豚鼠离体心肌缺血再灌注的电生理模型被引量：3
- 2007年
- 目的应用计算机信号采集和处理技术研究豚鼠离体心肌细胞正常、缺血及再灌注时的电生理特性。方法离体细胞灌流,细胞内微电极记录,计算机信号采集与处理。结果豚鼠右心室乳头肌肌细胞静息电位RP为-72±6.58 mV,动作电位峰值(APA)为112.22±8.65 mV,0相最大去极化速率(Vmax)为107.37±10.55 mV.s-1。复极达峰值电位的10%、50%、90%所需时间(APD10、APD50、APD90)分别为39.25±8.55 ms、123.45±15.25 m s和169.35±18.12 ms。缺血缺氧台氏液灌流的心肌细胞APA与Vmax降低,APD90显著缩短,与缺血缺氧前相比有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。再灌注2 min内可见AP缺血缺氧样变化加重,Vmax继续降低,与缺血缺氧灌流相比有显著性意义(P<0.01)。豚鼠再灌注10 min后RP与AP波形基本恢复正常。结论计算机信号采集和处理技术在心肌细胞电生理研究方面的应用,为全面的分析心肌细胞生物电的变化及其形成机制,亦为深入研究病理及药物作用情况下对生物电的影响提供真实客观的数据。
- 范一菲陈志武胡金兰李忠稳孔德虎
- 关键词：缺血再灌注电生理
- 慢性房颤患者心肌瞬时外向钾通道电流密度变化被引量：1
- 2009年
- 目的旨在研究慢性房颤患者心房肌瞬时外向钾通道电流的变化,为房颤机制的阐明提供更多的实验依据。方法心房肌标本取材于体外循环手术患者右心耳。采用全细胞膜片钳技术研究心房肌瞬时外向钾通道电流密度的变化。结果慢性心房颤动患者心房肌瞬时外向钾通道电流密度降低,在测试电位-20mV以上各电位水平时均有显著性差异(n=16,P<0.05)。结论慢性房颤时瞬时外向钾电流密度降低对房颤的电重构起一定的作用。
- 李忠稳陈丽孔德虎柯道平杨艳曾晓荣
- 关键词：膜片钳心房颤动
