冯祥汝
- 作品数：13 被引量：28H指数：3
- 供职机构：吉林大学人兽共患病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 鲤鱼白细胞介素10(IL-10)基因cDNA克隆及序列分析(英文)
- 2012年
- [目的]获取鲤鱼全长IL-10(interleukin 10)cDNA,并对其序列进行分析。[方法]利用DD-RTPCR(differential display RT-PCR)方法获得差异表达IL-10cDNA片段,以地高辛标记做为探针,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,克隆鲤鱼IL-10全长cDNA,并对该序列进行序列分析和同源性比较。[结果]鲤鱼全长IL-10cDNA共1117bp,包含55bp的5’端非编码区,一个540bp的编码179个氨基酸的开放阅读框及522bp的3’端非编码区。其中,3’非编码区包含3个mRNA不稳定基序"ATTTA";该蛋白序列具有IL-10家族的典型序列特征;序列同源性比较表明,所获得的序列与GenBank上登录的鲤鱼IL-10基因同源性为89.1%。[结论]该试验为进一步研究IL-10在体内的表达方式、功能特点、调控机理及其在炎症反应和免疫应答中的作用机制奠定了基础。
- 冯祥汝陈义龙赵晓王文东张俊辉杨振国孙真贾生美卢强
- 关键词：WORDSCARPSEQUENCE
- 鲤鱼白细胞介素10基因克隆、鉴定及差异表达分析
- 细胞因子是由多种免疫细胞产生的蛋白分子，作用于其他细胞，在启动和调节免疫过程中起到重要的作用。IL-10首次是作为一种免疫抑制性细胞因子而在小鼠中被发现。IL-10主要由Th2细胞产生，除此之外，其他免疫细胞，如单核细胞...
- 冯祥汝
- 关键词：鲤鱼白细胞介素10CDNA克隆荧光定量PCR
- 文献传递
- 鲤鱼白细胞介素10基因组DNA克隆及序列分析
- 2013年
- 为获得鲤鱼白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)全长基因组序列,本研究利用鲤鱼IL-10全长cDNA序列(Gen-Bank登录号:JX524550),通过在两端非编码区设计引物,以提取的鲤鱼脾脏基因组为模板,使用PCR方法成功获得鲤鱼IL-10全长基因组序列。鲤鱼IL-10基因组全长2176bp,GenBank登录号为JX524551。将所获得的序列与其他物种IL-10基因组序列相比,结果发现都含有5个外显子,4个内含子,外显子在进化上相对保守,剪切位点都符合"gt......ag"规则;序列包含540bp的开放阅读框,编码179个氨基酸,有2段典型的IL-10氨基酸信号基序。
- 冯祥汝陈义龙孙真贾生美王文东张俊辉杨振国卢强
- 关键词：鲤鱼白细胞介素10基因组克隆
- 鲤鱼外周血白细胞TLR5M全长cDNA克隆及序列分析被引量：1
- 2013年
- 本试验以鲤鱼TLR5M的EST序列为基础进行5'-RACE试验,获得了其cDNA的全长序列。结果表明,该序列共3182 bp,包含38 bp的5'端非编码区,486 bp的3'端非编码区,1个2658 bp的开放阅读框(ORF),共编码885个氨基酸。序列同源性比对结果表明,该序列与麦瑞加拉鲮鱼TLR5基因同源性高达84.46%。
- 孙真贾生美冯祥汝陈义龙翟新新沈雪飞张俊辉王文东杨振国卢强
- 关键词：鲤鱼克隆
- 鲤鱼白细胞介素-1β全长cDNA的克隆·鉴定及其差异表达分析被引量：8
- 2011年
- [目的]进行鲤鱼白细胞介素-1β(IL-1β)全长cDNA的克隆、鉴定及其差异表达分析。[方法]利用DD-RTPCR方法获得差异表达cDNA片段,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行筛选,克隆了鲤鱼IL-1β的全长cDNA,并进行了序列分析和差异表达分析。[结果]获得的阳性克隆含有1个大小为831 bp编码276个氨基酸的完整开放阅读框。聚类分析表明,鲤鱼IL-1β氨基酸序列与日本鲤鱼紧密聚为一支,氨基酸序列的同源性达95%,之后聚类顺序依次为鲫鱼、斑马鱼、猪、牛、马、人和小鼠。差异表达分析表明,经有丝分裂原刺激后前期(4 h)白细胞中IL-1β的表达量显著增大,但随着时间推移(12,24 h)并非一直较同期大,表达量总体趋势成峰形。[结论]为进一步研究IL-1β在体内的表达方式、功能特点和调控机理以及在炎症反应、应急反应和免疫应答的作用机制奠定了基础。
- 何江帅卢强李伟赵晓冯祥汝陈义龙
- 关键词：鲤鱼白细胞介素-1ΒCDNA克隆差异表达分析
- 鲤鱼肿瘤坏死因子受体相关因子6全长cDNA克隆及序列分析
- 2013年
- 本试验以鲤鱼外周血白细胞肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)EST序列为基础,经地高辛标记后作为探针,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,从重组噬菌体中经过两轮筛选获得阳性克隆。序列分析结果显示,该序列包含有5′-非编码区(5′-UTR)25bp;3′-非编码区(3′-UTR)535bp,存在2个mRNA不稳定基序ATTTA;开放阅读框ORF长1632bp,编码543个氨基酸。预测蛋白质等电点为5.88,分子质量大小为61.773ku。序列同源性比对结果表明,所获得的序列与GenBank上登录的鲤鱼TRAF6a基因同源性达99%。蛋白质序列分析结果发现,其具有TRAF家族的典型序列特征。
- 贾生美孙真冯祥汝陈义龙沈雪飞翟新新张俊辉杨振国王文东卢强
- 关键词：鲤鱼肿瘤坏死因子受体相关因子6克隆
- 鲤鱼γ-2β干扰素基因组DNA克隆及序列分析被引量：2
- 2013年
- 试验参考鲤鱼γ-2β干扰素(interferonγ-2β,IFNγ-2β)全长cDNA序列,在其两侧非翻译区和外显子设计2对引物,以提取的鲤鱼脾脏基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得了IFNγ-2β的全长基因DNA序列。结果表明,获得的基因组DNA全长2084bp,GenBank登录号为JX181981,序列分析结果显示该基因进化较保守,和其他物种一样都含有4个外显子和3个内含子,各外显子碱基数与哺乳动物中相对应的外显子碱基数基本相同,且外显子、内含子剪接位点均遵守GT-AG规则。
- 陈义龙孙真贾生美冯祥汝王文东张俊辉杨振国卢强
- 关键词：鲤鱼克隆
- 白细胞介素-10的生物学功能及其在疾病中的作用研究进展被引量：10
- 2012年
- 白细胞介素-10(IL-10)是一种多效性细胞因子,可抑制T细胞、单核细胞和巨噬细胞的活性和效应功能,其主要功能是限制或终止炎症反应。除此之外,IL-10还能调节B细胞、NK细胞、细胞毒性T细胞和辅助T细胞、肥大细胞、粒细胞、树突状细胞、角化细胞和内皮细胞的生长或分化。文章综述其主要的生物学功能及其与多种疾病间的关系。
- 冯祥汝陈义龙卢强
- 关键词：白细胞介素-10生物学功能疾病
- 鲤鱼肿瘤坏死因子α1基因cDNA的克隆及序列分析被引量：2
- 2011年
- 试验以鲤鱼外周血白细胞肿瘤坏死因子α1(tumor necrosis factor alpha 1,TNFα1)EST序列为基础,经地高辛标记作为探针对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,从0.9×104个重组噬菌体中,经过2轮筛选获得3个阳性克隆。序列分析结果显示,该序列包含128 bp的5′非编码区(5-′UTR),423 bp的3′非编码区(3-′UTR),开放阅读框ORF长768 bp,共编码255个氨基酸,在其3′非编码区存在几个ATTTA不稳定基序。预测蛋白等电点为8.20,分子质量大小为28.1 ku。序列同源性比较结果表明,所获序列与GenBank上登录的鲤鱼TNFα基因的同源性达94%。蛋白质的序列和结构分析结果发现,其具有TNF家族的典型序列特征、1个跨膜区结构和1个假定的产生成熟肽的裂解位点。
- 赵晓何江帅冯祥汝陈义龙王彬李伟张俊辉王文东杨振国卢强
- 关键词：鲤鱼克隆
- 鲤鱼白细胞介素10(IL-10)基因cDNA克隆及序列分析被引量：5
- 2012年
- [目的]获取鲤鱼全长IL-10(interleukin 10)cDNA,并对其序列进行分析。[方法]利用DD-RTPCR(differential display RT-PCR)方法获得差异表达IL-10 cDNA片段,以地高辛标记做为探针,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,克隆鲤鱼IL-10全长cDNA,并对该序列进行序列分析和同源性比较。[结果]鲤鱼全长IL-10 cDNA共1 117 bp,包含55 bp的5'端非编码区,一个540 bp的编码179个氨基酸的开放阅读框及522 bp的3'端非编码区,其中,3'非编码区包含3个mRNA不稳定基序"ATTTA";该蛋白序列具有IL-10家族的典型序列特征;序列同源性比较表明,所获得的序列与GenBank上登录的鲤鱼IL-10基因同源性为89.1%。[结论]该试验为进一步研究IL-10在体内的表达方式、功能特点、调控机理及其在炎症反应和免疫应答中的作用机制奠定了基础。
- 冯祥汝陈义龙赵晓王文东张俊辉杨振国孙真贾生美卢强
- 关键词：鲤鱼IL-10克隆
