全胜
- 作品数:7 被引量:16H指数:2
- 供职机构:浙江大学城市学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 大肠杆菌LTKA63突变体的构建及重组LTKA63免疫佐剂活性机理的研究被引量:1
- 2006年
- 目的 构建大肠杆菌不耐热肠毒素A亚单位(heat-labile enterotoxin subunitA,LTA)基因减毒突变体LTKA63及其原核表达系统,探讨重组LTKA63(rLTKA63)粘膜免疫佐剂活性的机制。方法采用高保真PCR从大肠杆菌44815株基因组DNA中扩增LTA基因,利用定位突变技术构建LTKA63突变体,T-A克隆后测序。采用无His-tag的原核表达载体pET-15b。构建LTKA63原核表达系统,通过SDS-PAGE鉴定表达产物。采用三色流式细胞术确定rLTKA63激活T细胞途径。结果从大肠杆菌44815株DNA模板中扩增获得预期大小的LTA基因条带。与报道的LTA序列比较,所克隆的LTA基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99.03%~99.61%和98.33%~99.22%。LTA基因定位突变后获得序列正确的LT-KA63突变体。rLTKA63表达量占细菌总蛋白的15%左右。rLTKA63作用后Th1和Th2细胞较阴性对照组分别增加21.9%和36.2%。结论本文成功地构建了LTKA63原核表达系统,所表达的rLTKA能同时激活Th1和Th2细胞。
- 全胜夏肖萍胡伟航
- 关键词:大肠杆菌TH1/TH2
- 重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位基因表达系统构建被引量:5
- 2003年
- 从E .coli 4 4 815株基因组DNA中扩增不耐热肠毒素B亚单位 (LTB)基因并分析了核苷酸序列 ,构建pET32a的LTB表达载体 ,在E .coliBL2 1DE3宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导表达 ,采用SDS PAGE鉴定表达产物。克隆的LTB基因与报道的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为 99.12 %~ 99.71%和 97.5 8%~ 99.19% ,pET32a LTB BL2 1DE3系统表达的rLTB量约占细菌总蛋白的 30 %。
- 全胜严杰
- 关键词:B亚单位基因表达系统
- 雷公藤红素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡及其机制研究
- 目的探讨雷公藤红素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的作用及其机制。方法在24孔细胞培养板中每孔接种1×10/ml的HL-60细胞,37℃、5%CO条件下预培养24 h。试验组加入终浓度分别为0.5、1.0、1.5和...
- 夏肖萍全胜
- 文献传递
- 老年慢性支气管炎血清IL、TNF-α、NO、CRP变化探讨被引量:10
- 2006年
- 目的:探讨白细胞介素6(IL6)、IL8、肿瘤坏死因子α(TNFα)、一氧化氮(NO)及C反应蛋白(CRP)在慢性支气管炎(慢支)发生和演进中的作用。方法:检测30例慢支患者急性发作期和临床缓解期血清IL6、IL8、TNFα、NO、CRP水平,并以30例健康人血清中IL6、IL8、TNFα、NO、CRP水平作为对照。结果:30例慢支患者急性发作期(急性发作组)血清IL6、IL8、TNFα、NO、CRP显著高于缓解期(P<0.01),而缓解期(临床缓解组)血清IL6、IL8、TNFα、NO、CRP与对照组相比仍然有差异(P<0.05)。慢支患者血清IL6与IL8、IL6与TNFα、IL6与NO、IL6与CRP、IL8与TNFα、IL8与CRP、TNFα与CRP水平均呈正相关,余者之间无明显相关性。结论:①慢支急性发作期和临床缓解期血清CRP增高能反映其炎性变化;②免疫细胞分泌IL6、IL8、TNFα参与慢支的炎性反应;③IL6与肺血管的损伤有关;④血清NO降低反映肺血管的损伤。
- 胡伟航陈斓全胜
- 关键词:慢性支气管炎白细胞介素6白细胞介素8
- 空肠弯曲菌fliG基因敲除突变株动力、体外趋化和小鼠定植能力的改变
- 2009年
- 空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)是人类细菌性胃肠炎的病原体。趋化是细菌向合适的寄生部位定向运动,也是空肠弯曲菌在宿主空肠黏膜表面实现定植的关键起始步骤,该趋化运动由趋化相关二元信号系统(che-TCS)以MCPs→Ches→Flis/Mots方式调控。FliG是Fli蛋白家族成员,一些病原菌的FliG被证明是鞭毛马达蛋白,也是细菌鞭毛马达中开关复合体的必需组分,但空肠弯曲菌FliG在细菌趋化中的作用未明。本研究中,我们根据同源重组原理,构建空肠弯曲菌NCTC11168株fliG基因敲除(fliG-)突变株,然后对fliG-突变株的动力、趋化和定植能力进行测定。动力实验和体外趋化实验结果证实,fliG-突变株在半固体琼脂平板上的菌落直径、在硬琼脂平板上对0.2mol/L脱氧胆酸钠(SDC)的趋化聚集环直径均明显小于野生株(P<0.05)。与野生株比较,黏附于BALB/c-ByJ小鼠空肠黏膜表面以及空肠内容物中的fliG-突变株数量也明显减少(P<0.05)。实验结果表明,fliG是空肠弯曲菌鞭毛动力以及细菌感染时向空肠黏膜趋化运动的必需基因。
- 全胜夏肖萍赵欣罗依惠严杰
- 关键词:空肠弯曲菌基因敲除趋化定植
- 血管内皮生长因子受体2抗原肽-MHC I类分子单链三聚体DNA疫苗及用途
- 本发明属于生物技术领域,本发明提供了一种新的编码主要组织相容性抗原I类分子(H-2D<Sup>b</Sup>)限制性的血管内皮生长因子受体2抗原肽KDR2、b2微球蛋白(b2m)和H-2D<Sup>b</Sup>的单链三...
- 潘建平张立煌张大勇张翀方洁全胜王宝明
- 文献传递
- 一种新型小白鼠饲养笼
- 本实用新型涉及一种鼠笼,尤其是涉及一种新型小白鼠饲养笼。一种新型小白鼠饲养笼,包括笼体和带网格的上盖,其特征在于所述的上盖上设置有一个或多个二氧化碳传感器,所述的上盖中部嵌设有透明的饲养水瓶,所述的饲养水瓶表面设置有液面...
- 全胜张立煌潘建平林毓方洁郭君平
- 文献传递