靳少华
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- 体外高效诱导人胚胎干细胞定向分化为胰岛细胞的可行性研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨体外诱导人胚胎干细胞(hESs)定向分化为胰岛细胞的可行性。方法体外分三阶段诱导hESCs定向分化为胰岛细胞。第一阶段:予以活化素-A、渥曼青霉素诱导分化形成定型内胚层;第二阶段:采用维甲酸(RA)、NOGGIN、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导胰腺细胞定向分化;以EGF扩增胰腺祖细胞;第三阶段:采用尼克酰胺、唾液素4、bFGF及骨形成蛋白(BMP4)促进胰岛细胞成熟;观察诱导各阶段细胞形态变化,免疫荧光法鉴定胰十二指肠同源异型盒基因(PDX-1)、胰高糖素、胰岛素、C肽、葡萄糖转运子2(glut-2)表达。结果诱导14 d时hESs出现胰高糖素荧光表达;20 d时细胞出现PDX-1和C肽共表达;22 d形成的成熟胰岛细胞出现glut-2和胰岛素的阳性表达;胰岛素阳性细胞占17.1%,C肽阳性细胞占3.8%。结论体外可简单高效的诱导hESs定向分化为成熟胰岛细胞。
- 华秀峰王延伟刘芙君靳少华孟晓梅李华峰王海燕李建远
- 关键词：胚胎干细胞分化胰岛细胞胰岛素C肽
- 人胚胎干细胞体外定向诱导分化胰岛细胞移植治疗非肥胖-联合免疫缺陷糖尿病小鼠
- 2013年
- 目的探讨人胚胎干细胞(hESs)体外定向诱导分化胰岛细胞移植治疗非肥胖-联合免疫缺陷(NOD/SCID)糖尿病小鼠的可行性。方法体外分四阶段诱导hESs定向分化为胰岛细胞:第一阶段,予以活化素A(activin A)、渥曼青霉素(wortmannin)诱导分化形成定型内胚层;第二阶段,予以全反式维甲酸(RA)、NOGGIN、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导胰腺细胞定向分化;第三阶段,予以表皮生长因子(EGF)扩增胰腺祖细胞;第四阶段,予以尼克酰胺(nicotinamide)、唾液素4(exendin-4)、bFGF及骨形成蛋白(BMP4)促进胰岛细胞成熟;观察诱导各阶段细胞形态变化、免疫荧光鉴定胰十二指肠同源异型盒基因(PDX-1)、胰高糖素、胰岛素、C肽、葡萄糖转运子2(Glut-2)的表达;四阶段分化成熟的胰岛细胞体外检测胰岛素释放反应并植入链脲菌素(STZ)诱导形成的NOD/SCID糖尿病小鼠一侧附睾脂肪垫内,观察血糖变化。结果诱导第四阶段14天时hESs出现胰高糖素荧光表达;20天时细胞出现PDX-1和C肽共表达;22天形成的成熟胰岛细胞出现Glut-2和胰岛素的阳性表达;流式鉴定胰岛素阳性细胞占17.1%,C肽阳性细胞占3.8%;体外检测有葡萄糖刺激的胰岛素释放反应。分化成熟胰岛细胞约(3～5)×106植入NOD/SCID糖尿病小鼠体内可以逆转其高血糖至少8周。结论体外定向诱导hESs分化形成的胰岛细胞植入NOD/SCID糖尿病小鼠附睾脂肪垫内可以逆转其高血糖。
- 华秀峰王延伟丛晋刘芙君孟晓梅李华峰靳少华王海燕李建远孙强
- 关键词：胚胎干细胞胰岛细胞C肽
- 人胚胎干细胞体外定向诱导分化胰腺前体细胞及胰岛细胞移植治疗NOD/SCID糖尿病小鼠被引量：2
- 2014年
- 目的 探讨人胚胎干细胞（human embryonic stem cells,hESCs）体外定向诱导分化胰腺前体细胞及胰岛细胞移植治疗非肥胖糖尿病/严重联合免疫缺陷（non-obese diabetic/severe combined immunodeficient,NOD/SCID）小鼠的可行性.方法 体外分4阶段诱导hESCs定向分化为胰岛细胞：①诱导分化形成定型内胚层;②诱导胰腺细胞定向分化;③扩增胰腺前体细胞;④促进胰岛细胞成熟.观察诱导各阶段细胞形态变化、免疫荧光鉴定胰十二指肠同源异型盒基因（PDX-1）、胰高糖素（glucagon）、胰岛素（insulin）、C肽（C-peptide）、葡萄糖转运子2（Glut-2）的表达.3阶段及4阶段分化形成的细胞分别植入链脲菌素（streptozotocin,STZ）诱导形成的NOD/SCID糖尿病小鼠一侧附睾脂肪垫内,观察血糖变化.结果 hESCs诱导4阶段细胞表达胰高血糖素、胰岛素、Glut-2;共表达PDX-1和C肽;流式鉴定诱导4阶段胰岛素阳性细胞为17.1％;体外检测有葡萄糖刺激的胰岛素释放反应;3阶段及4阶段分化形成的细胞分别植入NOD/SCID 糖尿病小鼠体内可逆转其高血糖至少12周.结论 体外定向诱导hESCs分化形成的胰腺前体细胞及胰岛细胞分别植入NOD/SCID小鼠可逆转其高血糖.
- 华秀峰孙强李华峰孟晓梅王延伟于胜强丛晋刘芙君靳少华王海燕李建远唐与晓
- 关键词：胚胎干细胞分化胰岛细胞NODSCID
