陈红杰
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 凝乳酶原(凝乳酶)二硫键Cys206-Cys210的定位突变被引量：7
- 2001年
- 在对凝乳酶原二硫键Cys2 0 6 Cys2 10进行定位突变过程中发现 ,在相应的模板序列中有自身形成自由能为 - 16 1kcal/mol的茎环结构倾向 ,妨碍与引物结合 ,从而难以合成突变的DNA ,采用快退火可解决此矛盾。 5个突变基因均能在大肠杆菌中高效表达 ,除C2 0 6A外 ,约占细胞总蛋白的 5 0 %左右。突变体的复性结果表明 ,Cys2 0 6 Cys2 10对凝乳酶原正确折叠不是绝对必需的 ,但相应位置的氨基酸取代对复性效率有显著影响 ,在 5个突变体中 ,C2 0 6A/C2 10A的复性率分别为C2 0 6S/C2 10S、C2 10A、C2 10S的 4 5倍、2 0倍和 30倍 ,而C2 0 6A完全不能复性。C2 0 6A/C2 10A与C2 0 6S/C2 10S的远紫外CD光谱与野生型基本相同 ,其荧光发射光谱与野生型相比最大发射峰不变 ,而荧光强度有显著增加。由于上述 3个蛋白具有相同比活 ,说明突变分子能形成具有生物活性的空间构象 ,而只是某些色氨酸残基微环境受到微扰。
- 陈红杰潘学峰张国宝刘年娟张渝英杨开宇
- 关键词：定位突变二硫键凝乳酶原凝乳酶蛋白质构象
- 凝乳酶(原)二硫键Cys206-Cys210功能的研究
- 凝乳酶原(凝乳酶)含有三对二硫键:Cys45-Cys50、Cys206-Cys210和Cys250-Cys283 .该实验曾证明Cys250-Cys283对凝乳酶原正确折叠至重要、不可或缺,而Cys45-Cys50对折叠...
- 陈红杰
- 关键词：二硫键重折叠
- 文献传递
