邵建伟
- 作品数:8 被引量:8H指数:2
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- 黑龙江省部分规模化奶牛场布鲁氏菌血清抗体回顾性检测与示范场净化效果评价
- 采用间接ELISA、竞争ELISA对2009~2011年采自黑龙江省16个奶牛场的4830份血清样本进行回顾性检测,并对此期间的2个布病净化示范场样本进行验证性检测,以期了解2009~2011年间黑龙江省布鲁氏菌血清学状...
- 邵建伟刘洪涛曹永生张润祥曹翀彭统全张永根张维银甘文平罗清华高明春王君伟
- 关键词:酶联免疫吸附试验
- 文献传递
- 黑龙江省部分规模化奶牛场布鲁菌病血清抗体回顾性检测与示范场净化效果评价被引量:1
- 2014年
- 采用间接ELISA、竞争ELISA对2009-2011年采自黑龙江省16个奶牛场的4 830份血清样本进行回顾性检测,并对此期间的2个布鲁菌病净化示范场样本进行验证性检测,以期了解2009-2011年间黑龙江省布鲁菌血清学状况,并对布鲁菌病牛净化示范场的净化效果进行评价。结果显示,2009-2011年间黑龙江省部分规模化奶牛场布鲁菌血清抗体阳性率较低;2个布病净化示范牛场连续三年始终保持在布鲁菌病净化水平;采用"检疫+扑杀"的净化流程后,2个规模化奶牛场达到净化水平,说明其布鲁菌病净化程序具有实践意义,值得推广。
- 邵建伟刘洪涛曹永生张润祥曹翀彭统全张永根张维银甘文平罗清华高明春王君伟
- 关键词:酶联免疫吸附试验
- 牛α0干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及抗病毒活性鉴定
- (目的)本研究克隆了牛α0干扰素(BoIFN-α0)成熟肽基因,使其在真核细胞中表达并研究其表达蛋白的活性。(方法)通过PCR方法扩增得到BoIFN-α0成熟肽基因,然后将其连接到含分泌信号肽序列的Pichiapasto...
- 彭统全邵建伟张润祥曹翀马波高明春王君伟
- 关键词:巴斯德毕赤酵母分泌表达抗病毒活性
- 文献传递
- 东北白鹅CD8α基因的克隆及其胞外区基因的表达与抗血清的制备
- 2015年
- 根据GenBank公布的绿头鸭CD8α(AF378373)基因序列设计引物,通过RT-PCR获得东北白鹅CD8α基因。根据测序结果设计特异性引物,克隆得到东北白鹅CD8α胞外区基因,并在pET-30a(+)及pET-28a(+)/Rosetta(DE3)pLysS系统中进行原核表达。经IPTG诱导重组蛋白质获得表达,Ni-NTA柱亲和层析获得纯化的重组蛋白质,以纯化的重组蛋白质(pET-30a-CD8ex)为免疫原制备兔抗鹅CD8α胞外区抗血清。I-ELISA、Western blot分析表明抗血清可特异识别分离获得的东北白鹅外周血T淋巴细胞与重组蛋白质(pET-28a-CD8ex),间接免疫荧光试验证实,纯化的抗血清可特异性识别瞬时真核表达的鹅CD8α胞外区蛋白质。利用激光共聚焦显微镜观察到分离获得的鹅外周血淋巴细胞的细胞膜处出现明显的荧光信号。本研究结果说明制备的抗血清可作为鹅CD8+T淋巴细胞的检测试剂。
- 张雪莲魏双施刘晓玫邵建伟张树栋李珊珊高明春张文龙邢育钢马波王君伟
- 关键词:东北白鹅CD8Α基因表达T淋巴细胞
- 牛分枝杆菌CFP-10基因的原核表达及其表达产物的变态反应原性的鉴定
- 2014年
- 以牛分枝杆菌基因组为模板,PCR扩增获得CFP-10基因,并连入pET-32a(+)载体,获得了重组质粒pET-32a-CFP-10。将重组质粒转入宿主菌大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后,重组蛋白rCFP-10以可溶形式表达并被纯化,将rCFP-10在致敏豚鼠皮内做迟发型变态反应(DTH)检测,并以PPD作为阳性对照。结果显示,测得rCFP-10组豚鼠皮肤红斑直径平均值为10mm,接近于PPD组(13mm)。结果证明,以pET-32a(+)为载体进行原核表达,获得的重组蛋白rCFP-10依然具有较强的迟发型变态反应原性,同时也证明了CFP-10具有作为皮试诊断试剂抗原的潜力,这一结果为牛结核病新型DTH皮试诊断的研究奠定了基础。
- 刘洪涛宋林张海丽尹尧邵建伟高明春王君伟
- 关键词:CFP-10迟发型变态反应牛结核病原核表达
- 东北白鹅CD4基因的克隆及其胞外区的表达与抗血清的制备被引量:4
- 2014年
- 本研究根据GenBank公布的绿头鸭CD4(AF378701)基因序列设计引物,RT-PCR获得东北白鹅CD4基因。根据测序结果设计特异性引物,克隆得到东北白鹅CD4胞外区基因,并在pET-32a(+)/Rosetta(DE3)pLysS系统中进行原核表达。经IPTG诱导重组蛋白获得表达,Ni-NTA柱亲和层析获得纯化的重组蛋白,以纯化的重组蛋白为免疫原制备兔抗鹅CD4胞外区抗血清。I-ELISA、Western blot和流式细胞仪分析表明抗血清可特异识别重组蛋白以及分离获得的东北白鹅外周血T淋巴细胞,间接免疫荧光试验证实纯化的抗血清可特异性识别瞬时真核表达的鹅CD4胞外区蛋白。以上结果说明制备的抗血清可作为鹅CD4+T淋巴细胞的检测试剂。
- 张雪莲魏双施邵建伟母晓宇高明春张文龙马波王君伟
- 关键词:东北白鹅CD4基因表达T淋巴细胞
- 牛α0干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及抗病毒活性鉴定被引量:3
- 2015年
- 克隆牛α0干扰素(BoIFN-α0)成熟肽基因,使其在真核细胞中表达,并研究其表达蛋白质的活性。通过PCR方法扩增得到BoIFN-α0成熟肽基因,然后将其连接到含分泌信号肽序列的Pichia pastoris表达载体pPICZαA上,构建重组质粒pPICZαA-BoIFN-α0,重组质粒经PmeⅠ酶切线性化后电转化宿主菌GS115。转化子经100μg·mL-1 zeocinTM筛选和PCR鉴定,阳性重组菌经甲醇诱导后实现了BoIFN-α0在毕赤酵母系统中的分泌表达。结果表明:SDS-PAGE和Western blot结果显示表达产物相对分子质量约为18和21ku,推测表达产物发生了一定程度的糖基化。细胞病变抑制试验结果表明,重组BoIFN-α0具有较高的抗病毒活性,达到5.72×106 U·mg-1。这些研究结果为牛IFN-α的更深层次应用奠定了基础。
- 彭统全邵建伟张润祥曹翀马波高明春王君伟
- 关键词:巴斯德毕赤酵母分泌表达抗病毒活性
- 牛IFN-α1、IFN-α7、IFN-α14的酵母表达及其理化性质与生物学活性研究
- 干扰素(interferon, IFN)是在病毒或干扰素诱生剂的作用下,由特定细胞所产生的,具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用的一类高活性、多功能分泌性糖蛋白,是动物机体抵抗病毒入侵的第一道防线。通常将干扰素分为Ⅰ型、...
- 邵建伟
- 关键词:巴斯德毕赤酵母分泌表达理化性质
- 文献传递