邱业峰
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：解放军军需大学更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- EGF-PE35KDEL重组毒素的基因构建及表达被引量：1
- 2003年
- 目的 构建表达有特异细胞毒性融合蛋白的工程质粒。方法 利用PCR扩增出PE3 5KDEL基因片段 ,经酶切后插入EGF PET2 8A载体 ,并转化至BL2 1(DE3 )中。采用Westernblot对重组毒素进行鉴定。结果EGF PE3 5KDEL重组毒素占菌体总蛋白的 2 0 % ,分子量约为 410 0 0。结论 EGF PE3
- 李树民李丽萍岳玉环李铁征邱业峰朱平
- 关键词：基因构建绿脓杆菌外毒素重组毒素
- 人恶性黑色素瘤A375细胞黑素刺激素受体(MC1R)的检测
- 2005年
- 目的检测人恶性黑色素瘤A375细胞膜上MC1R蛋白及其cDNA,为研究黑色素瘤细胞表面受体及靶向配体奠定基础。方法利用放射配体分析法检测人恶性黑色素瘤A375细胞膜上的MC1R蛋白;用RTPCR方法扩增人恶性黑色素瘤A375细胞MC1R的cDNA,并克隆至pMD18T质粒,进行酶切分析鉴定及扩增片段DNA序列测定。结果放射配体分析结果表明,125IαMSH可与人恶性黑色素瘤A375细胞膜特异结合。RTPCR结果显示,扩增产物的大小与MC1R的cDNA相符。测序结果证实扩增片段为MC1R基因的特异片段。结论证实人恶性黑色素瘤A375细胞膜上表达MC1R蛋白。MC1R基因的成功克隆为其进一步研究提供了必要条件。
- 李铁征李泽鸿李月红邱业峰张培因王树君朱平
- 关键词：RT-PCR方法DNA序列测定细胞表面受体R蛋白特异片段
- 抗癌胚抗原单链抗体-PE40免疫毒素基因的克隆与表达
- 2004年
- 目的扩增抗癌胚抗原单链抗体(CEA-ScFv),与绿脓杆菌外毒素(PE40)进行重组及原核表达,旨在进一步研究重组蛋白CEA-ScFv-PFA0的靶向抗肿瘤作用。方法分别扩增抗癌胚抗原单链抗体的重链区、轻链区,用overlap PCR按照VH-VL的顺序连接,克隆至pMD18T载体中。再将VH-VL基因片段与含有.PE40的表达载体pET28a连接,转化B121(DE3),IPTG诱导表达。结果经DNA测序,其结果与设计完全相符。SDS-PAGE分析,在相对分子质量66000处可见明显表达带,表达量可占菌体蛋白总量的13％以上。免疫印迹表明重组蛋白具有PF40的抗原特异性。结论抗癌胚抗原单链抗体-PE40免疫毒素的成功克隆与表达,为进一步研究其生物活性奠定基础。
- 邱业峰孟锐奇李树民李铁征朱平
- 关键词：绿脓杆菌外毒素免疫毒素基因克隆
