李铁征
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
- 供职机构：解放军军需大学更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学化学工程更多>>
- EGF-PE35KDEL重组毒素的基因构建及表达被引量：1
- 2003年
- 目的 构建表达有特异细胞毒性融合蛋白的工程质粒。方法 利用PCR扩增出PE3 5KDEL基因片段 ,经酶切后插入EGF PET2 8A载体 ,并转化至BL2 1(DE3 )中。采用Westernblot对重组毒素进行鉴定。结果EGF PE3 5KDEL重组毒素占菌体总蛋白的 2 0 % ,分子量约为 410 0 0。结论 EGF PE3
- 李树民李丽萍岳玉环李铁征邱业峰朱平
- 关键词：基因构建绿脓杆菌外毒素重组毒素
- 沙门氏菌的研究进展
- 本文就沙门氏菌致病机制以及细菌的主要保护性抗原与免疫机理和一些毒力相关基因的特点进行了评述,以期为研究抗感染治疗和疫苗的研制提供一定的理论基础.
- 李树民李铁征冯书章
- 关键词：沙门氏菌粘附因子保护性抗原免疫
- 文献传递
- 人恶性黑色素瘤A375细胞黑素刺激素受体(MC1R)的检测
- 2005年
- 目的检测人恶性黑色素瘤A375细胞膜上MC1R蛋白及其cDNA,为研究黑色素瘤细胞表面受体及靶向配体奠定基础。方法利用放射配体分析法检测人恶性黑色素瘤A375细胞膜上的MC1R蛋白;用RTPCR方法扩增人恶性黑色素瘤A375细胞MC1R的cDNA,并克隆至pMD18T质粒,进行酶切分析鉴定及扩增片段DNA序列测定。结果放射配体分析结果表明,125IαMSH可与人恶性黑色素瘤A375细胞膜特异结合。RTPCR结果显示,扩增产物的大小与MC1R的cDNA相符。测序结果证实扩增片段为MC1R基因的特异片段。结论证实人恶性黑色素瘤A375细胞膜上表达MC1R蛋白。MC1R基因的成功克隆为其进一步研究提供了必要条件。
- 李铁征李泽鸿李月红邱业峰张培因王树君朱平
- 关键词：RT-PCR方法DNA序列测定细胞表面受体R蛋白特异片段
- 整联蛋白研究进展被引量：5
- 2004年
- 对细胞膜信号转导过程中起重要作用的整联蛋白的结构和功能、整联蛋白与肿瘤生长和转移的关系。
- 李铁征李俊植
- 关键词：整联蛋白肿瘤细胞膜信号转导
- 抗癌胚抗原单链抗体-PE40免疫毒素基因的克隆与表达
- 2004年
- 目的扩增抗癌胚抗原单链抗体(CEA-ScFv),与绿脓杆菌外毒素(PE40)进行重组及原核表达,旨在进一步研究重组蛋白CEA-ScFv-PFA0的靶向抗肿瘤作用。方法分别扩增抗癌胚抗原单链抗体的重链区、轻链区,用overlap PCR按照VH-VL的顺序连接,克隆至pMD18T载体中。再将VH-VL基因片段与含有.PE40的表达载体pET28a连接,转化B121(DE3),IPTG诱导表达。结果经DNA测序,其结果与设计完全相符。SDS-PAGE分析,在相对分子质量66000处可见明显表达带,表达量可占菌体蛋白总量的13％以上。免疫印迹表明重组蛋白具有PF40的抗原特异性。结论抗癌胚抗原单链抗体-PE40免疫毒素的成功克隆与表达,为进一步研究其生物活性奠定基础。
- 邱业峰孟锐奇李树民李铁征朱平
- 关键词：绿脓杆菌外毒素免疫毒素基因克隆
- 人MC1R基因在杆状病毒-昆虫细胞表达系统中的表达被引量：2
- 2005年
- 目的利用杆状病毒表达系统进行人恶性黑色素瘤A375细胞MC1R基因在Sf9昆虫细胞中的表达。方法以pMD18-T-MC1R为模板,利用PCR方法扩增人MC1R基因,将MC1R基因连接到pfastBac1质粒上,与穿梭载体DH10Bac转座,获得Bacmid-MC1R质粒后,通过脂质体介导,转染Sf9细胞,使其表达重组杆状病毒,经SDS-PAGE检测表达产物,放射受体分析法检测目的蛋白MC1R活性。结果Bacmid-MC1R质粒转染Sf9细胞后的SDS-PAGE图谱,在相对分子质量为35000处有一条新生蛋白带。放射受体分析结果显示表达的蛋白与标记配体特异亲和,具有生物学活性。结论MC1R基因成功在真核细胞中得到表达。
- 李铁征李小兵齐翀祝令伟朱平
- 关键词：克隆杆状病毒昆虫细胞杆状病毒表达系统SF9细胞
- 人白细胞介素2-Linker-PE38重组毒素的构建被引量：2
- 2002年
- 目的 构建人白介素 2 linker PE38融合基因 ,为进一步表达具有特异性杀伤作用的融合蛋白奠定基础。方法 用PCR方法扩增绿脓杆菌外毒素 (PEA)衍生物PE38基因及柔性连接肽linker片段 ,并与人白介素 2 (Interleukin2 ,IL2 )基因连接插入质粒pET2 8a中。结果 构建的表达载体经核苷酸测序分析无突变发生。结论 成功地构建了表达质粒pIL2 linker Pe38。
- 赵凯军岳玉环张国利朱平高凤桐李树民李丽萍吴广谋李铁征
- 关键词：人白细胞介素2重组毒素肿瘤免疫导向治疗
