田国斌
- 作品数:41 被引量:591H指数:13
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学哲学宗教更多>>
- 表达禽流感病毒核蛋白基因重组禽痘病毒的构建及其免疫保护性研究被引量:14
- 2003年
- 从含有禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1)核蛋白 (NP)基因的质粒pUCNP中切下NP基因片段 ,将其亚克隆到pSY5 38质粒 ,再将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ基因也平端克隆到pSY5 38质粒 ,然后切下同时含有NP及LacZ基因的片段 ,再亚克隆到禽痘病毒载体pSY6 81,从而构建出表达核蛋白基因的重组禽痘病毒转移载体pSY(NP +LacZ)。应用脂质体介导的方法将转移载体转染已感染禽痘病毒S FPV 0 17的鸡胚成纤维细胞 ,在X gal存在的条件下 ,利用蓝白斑筛选、数轮蚀斑纯化以及PCR、Western blot鉴定 ,结果证明 ,获得了能高效表达AIVNP蛋白的重组禽痘病毒rFPV NP。SPF鸡体内的免疫保护试验结果表明 ,它能够诱导机体产生较高水平的NP特异性抗体 ,并对H5N1和H7N1这 2种亚型高致病力禽流感病毒的攻击提供一定的保护。
- 乔传玲于康震姜永萍张建林邓国华孟庆文田国斌唐秀英
- 关键词:禽流感病毒核蛋白基因禽痘病毒基因构建免疫保护性
- 表达H5亚型禽流感病毒HA基因的DNA疫苗免疫保护效力研究被引量:19
- 2004年
- 表达高致病力禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1) [GD/1/96(H5N1)]HA基因的DNA疫苗质粒pCIHA5具有良好的免疫保护性,为了将其开发并应用于实际,对其免疫保护效力进行了进一步的研究。结果表明,用10、40、70、100和150g pCIHA5和油苗1次免疫后,其免疫保护率分别为12.5%(1/8)、58.3%(7/12)、72.7%(8/11)、50.0%(6/12)、66.7%(8/12)和100%(12/12),其中70和100g剂量组的病毒分离结果为1/8和2/6;用剂量为5、20、35和50g pCIHA5分别免疫2次,免疫保护率分别为45.5%(5/11)、58.3%(7/12)、58.3%(7/12)和91.7%(11/12),5g的病毒分离结果为1/5,其余组未分离出病毒;pCIHA5免疫后AGP抗体均未检出,油苗免疫后其HI抗体虽高,但AGP抗体也呈阳性。结果显示,加强免疫应为DNA疫苗质粒pCIHA5的安全免疫方式,DNA疫苗质粒pCIHA5虽具有较为稳定的免疫原性和免疫保护性,但有必要进一步提高其在肌肉组织中的有效表达水平和抗体反应水平。
- 姜永萍于康震邓国华田国斌乔传玲陈化兰
- 关键词:H5亚型禽流感病毒HA基因免疫保护效力
- 间接ELISA、HI及AGP检测鸡血清中抗AIV抗体的敏感性比较被引量:13
- 1998年
- 用鸭源A型流感病毒H9N?滴鼻、点眼辅以腹腔注射,人工感染3周龄SPF来航鸡,分别用AGP、HI试验及间接ELISA定期测定其抗AIV血清效价。结果,HI试验及间接ELISA于攻毒后第7~79天显示阳性;AGP试验从第13~79天呈阳性。根据首次检出血清中抗AIV抗体的时间,间接ELISA比AGP、HI更灵敏、快速。
- 林祥梅赵增连田国斌陈万芳陈溥言于康震
- 关键词:HIAGP
- 中国禽流感流行株的分离鉴定被引量:179
- 1998年
- 分别从广东、四川、新疆等地禽流感(AI)血检阳性、发病率高、产蛋率下降的鸡群中采集186份病料,先后分离到6株A型流感病毒。这些分离株可在鸡胚中传代,可凝集鸡红细胞,血凝价达160~1280倍。不被新城疫、减蛋综合症、败血支原体阳性血清所抑制。用这些分离毒株制成琼脂扩散(AGP)抗原与禽流感标准阳性血清可出现白色沉淀线。分别将分离毒株与AI标准分型血清H1~H14、N1~N9进行HI、NI试验,结果川和川农株均为H4N6,西昌1和2株及Sh株均为H9N2,新疆石河子(石)株为H14N5。分离株分别做脑内接种致病指数(ICPI)、静脉接种致病指数(IVPI)测定,结果所有分离株ICPI介于024~148之间,IVPI介于015~056之间.通过电镜观察,可见直径为80~120nm球状或杆状典型的禽流感病毒.经联机检索,从新疆石河子AI阳性鸡场产蛋下降的鸡群中分离出的H14N5株为国内外首次从鸡中分离出的H14亚型禽流感病毒。将某单位送检的禽流感鹅体分离株(G1株和G2株)做了血清型和毒力测定,试验结果认定,G1和G2株均为A型禽流感病毒H5N1亚型,G1、G2株对鸡均达到高致病力毒株标准。
- 唐秀英田国斌赵传删周金法于康震
- 关键词:禽流感病毒分离亚型鉴定
- 共表达禽流感病毒HA和NA基因的重组禽痘病毒在SPF鸡的免疫效力试验被引量:13
- 2004年
- 将禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)毒株的HA和NA2个基因同源重组到禽痘病毒基因组中,获得了能同时高效表达这2种蛋白的重组禽痘病毒(rFPV-HA-NA)。将rFPV-HA-NA经翅膀刺种途径接种8周龄SPF鸡,免疫后4周分别用10LD50的高致病力禽流感病毒(HPAIV)A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)和A/FPV/Rostock/34(H7N1)毒株进行攻击。结果重组禽痘病毒免疫鸡群诱导产生了高水平的抗体,能够完全抵抗H5N1和H7N1亚型病毒的致死性攻击;并可有效阻止病毒在泄殖腔的排出。而禽痘病毒免疫组和非免疫对照组在攻毒后全部发病并死亡。
- 乔传玲姜永萍于康震田国斌陈化兰
- 关键词:禽流感病毒共表达重组禽痘病毒SPF鸡免疫效力
- 禽流感病毒新疆分离株1/96(H14N5)非结构蛋白基因克隆及序列分析被引量:2
- 2004年
- 研究应用无特定病原体 (SPF)鸡胚增殖禽流感病毒分离株 A/ Chicken/ Xinjiang/ 1 / 96(H1 4 N5) ,提取病毒基因组及病毒感染鸡胚绒毛尿囊膜细胞信使 RNA,运用 RT-PCR技术扩增病毒分离株的 NS1和 NS2基因 c DNA,克隆后进行序列测定。序列测定后分析结果表明 。
- 邓国华于康震王秀荣姜永萍田国斌乔传玲陈化兰
- 关键词:禽流感病毒非结构蛋白基因克隆
- 禽流感油乳剂灭活疫苗的研究被引量:2
- 1999年
- 唐秀英田国斌于康震冯菊艳
- 关键词:禽流感油乳剂灭活疫苗
- 禽流感灭活疫苗的标准化研究被引量:27
- 2002年
- 本文对我国禽流感灭活疫苗研制的现状、国际上标准化禽流感灭活疫苗的研究、禽流感疫苗标准化的必要性、研究和生产标准化禽流感疫苗硬件设施的需求、标准化禽流感疫苗用种毒和免疫佐剂的选择、标准化流感灭活疫苗中血凝素含量的测定、以及标准化禽流感疫苗生产中的关键技术问题等分别进行了论述,同时阐明了作者观点。
- 田国斌于康震唐秀英冯菊艳
- 关键词:禽流感灭活疫苗
- 禽流感油乳剂灭活疫苗的研究被引量:68
- 1999年
- 将6种不同亚型的禽流感病毒(AIVH2N9、H3N8、H5N1、H5N2、H7N1、H9N2)分别接种鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗。疫苗接种4和8周龄SPF鸡,注苗后均无不良反应。每种亚型疫苗免疫后14天和21天攻毒保护率均达90%-100%。分别用H5N1和H9N2亚型灭活疫苗免疫8周龄SPF鸡、25和28周龄健康商品蛋鸡,免疫后7天产生免疫力,14天保护率达100%,21天后抗体达高峰,仔鸡接苗后最高血凝抑制(HI)几何平均滴度(GMT)为7.3-8.0log2,蛋鸡为8.0-10.5log2。免疫后180天,抗体效价不低于6.5log2。免疫后180天分别以AIV攻击,H5亚型疫苗组,用强毒攻击无一发病和死亡,对照鸡全部发病死亡;H9亚型疫苗组,对照鸡在攻毒后72小时停产,免疫鸡无一发病且产蛋正常,对同源攻毒的保护率达100%。
- 唐秀英田国斌于康震冯菊艳
- 关键词:禽流感灭活疫苗免疫油乳剂
- 高致病性禽流感诊断技术
- 本标准规定了高致病性禽流感(HPAI)病毒分离与鉴定技术、血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验、琼脂凝胶免疫扩散(AGID)试验、酶联免疫吸附试验(间接ELISA)的技术要求。 本标准所规定的高致病性禽流感病毒分离与鉴...
- 唐秀英李海燕田国斌
- 关键词:家禽传染病感冒疾病流感
- 文献传递