邓国华
- 作品数：224 被引量：709H指数：14
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- H5亚型禽流感病毒HA蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2015年
- 为制备Clade 2.3.2分支H5亚型禽流感病毒HA蛋白的单克隆抗体,以灭活的超速离心浓缩纯化的H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Guangdong/S1322/2010(DK/GD/S1322/2010)免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠。取免疫后小鼠脾细胞,使其与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,通过血凝抑制(HI)和ELISA方法筛选,共获得2株能够稳定分泌HA蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株A4和D11。2株单克隆抗体的重链均为IgG1,轻链均为κ链。经HI检测,A4和D11的细胞培养上清和腹水的抗体效价分别为23、22和211、211。HI和中和试验结果显示,这2株单克隆抗体与Clade 2.3.2.B分支和Clade 2.3.2.C分支的病毒反应性良好,而与Clade 2.3.4和Clade 7分支的病毒均不反应。间接免疫荧光试验结果表明,这2株单克隆抗体能够识别MDCK细胞内感染的H5亚型禽流感病毒DK/GD/S1322/2010。结果表明,本研究制备的2株单克隆抗体为H5亚型禽流感病毒的检测和诊断奠定了物质基础。
- 卢昆鹏崔鹏飞张芳王晶肖红波邓国华陈化兰
- 关键词：禽流感病毒单克隆抗体血凝素
- 杆状病毒表达SARS冠状病毒核蛋白抗原性的研究被引量：3
- 2005年
- 目的 对杆状病毒表达SARS冠状病毒NP抗原性进行分析与比较。方法 利用SDS PAGE、Western Blot和ELISA证明重组核蛋白(rSN)在昆虫细胞获得高效表达,具有特异免疫反应原性。结果 表达rSN的昆虫细胞裂解、稀释后直接包被ELISA板,来检测SARS CoV康复病人血清特异抗体,敏感性稍高于Vero细胞培养的全病毒(OD分别为2 .8和0 .6 ) ,与健康人血清不发生特异反应(OD值为0 .0 1) ;表达rSN昆虫细胞用于间接免疫荧光,快速检测血清特异抗体反应,同样表现了良好的敏感性和特异性。结论 昆虫细胞表达rSN有望替代SARS CoV全病毒,作为安全、敏感和特异的诊断抗原,应用于ELISA和IFA血清学检测。
- 胡森王喜军王清华吴东来邓国华王笑梅步志高
- 关键词：SARS冠状病毒核蛋白重组杆状病毒IFA
- 两株H4N3禽流感病毒全基因组序列分析及对小鼠的致病性研究被引量：4
- 2012年
- 2009年在我国南方活禽交易市场进行流行病学调查时,从鸭体内分离到2株H4N3亚型禽流感病毒(AIV),DK/FJ/S1419/09(H4N3)(FJ/419/2009)和DK/HUN/S1010/09(H4N3)(HuN/010/2009)。为了解这2株H4N3亚型AIV的生物学特性,本研究对其进行全基因组分析及对小鼠致病性研究。结果显示:其HA基因来源于近两年流行的H4亚型病毒株,NA基因来源于其它亚型病毒株。内部基因来源较复杂,与FJ/419/2009内部基因同源性最高的病毒株均来自国内H5、H6等亚型分离株,但与HuN/010/2009同源的内部基因则差异较大,与PA、M和NS同源性最高的病毒株分别为A/wild/duck/Korea/UP122/2007(H1N1),A/muscovy/duck/Thailand/CU-LM1983/2009(H4N6)and A/avian/Japan 8KI0068/2008(H3N6)。用106EID50病毒剂量感染6周龄BALB/c小鼠,结果显示试验组小鼠感染后第3 d采脏器样品,仅在鼻甲和肺部能检测到病毒存在。以上数据表明,尽管这2株H4N3特殊亚型组合病毒来源复杂,但对小鼠的致病性较低。
- 张文亮张曦朱占松谭丹崔鹏飞施建忠邓国华陈化兰
- 关键词：禽流感病毒基因组分析
- 我国海关从越南旅客行李中截获禽蛋表面携带的H5N1亚型HPAIV特征
- 我国海关从越南旅客携带的45只鸡、鸭、鹅蛋壳冲洗物中应用实时RT-PCR方法检测禽流感阳性样品,经国家禽流感参考实验室(NAIRL)鸡胚接种检测分离到3株H5N1亚型禽流感病毒(AIV).序列分析发现3株病毒的8个基因片...
- 李雁冰施建忠齐巧玲邓国华李泽君王秀荣田国彬陈化兰林志雄
- 关键词：H5N1亚型RT-PCR方法禽流感病毒
- 文献传递网络资源链接
- 禽流感病毒NP cDNA反义逆转录病毒载体的构建及重组病毒的鉴定被引量：2
- 2000年
- 根据反义ＲＮＡ作用原理，以禽流感病毒（ＡＩＶ）Ｈ１４Ｎ５ ｃＤＮＡ全长及５’端２３５个ｂｐ为目的基因，反向插入反转录病毒载体 ｐＬＸＳＮ中，命名为 ｐＬＸＳＮ－ＮＰ及 ｐＬＸＳＮ－ＮＰ，用脂质体包裹重组质粒转染包装细胞 ＰＡ３１７，Ｇ４１８筛选抗性克性，扩增单个克隆后提取包装细胞上清的病毒ＲＮＡ（ｖＲＮＡ），以巢式ＰＣＲ方法检测，以及用包装细胞上清（重组病毒）感染滴定细胞系ＮＩＨ３Ｔ３，表明已筛选出产毒的的克隆细胞质，得到重组逆转录病毒，为反义ＲＮＡ抑制禽流感病毒复制的实验研究奠定了物质基础。
- 孟庆文邓国华曹素芳乔传玲于康震田国斌唐秀英
- 关键词：反义RNA禽流感病毒逆转录病毒载体巢式PCR
- H5N1亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：4
- 2011年
- 为制备抗H5N1禽流感病毒(AIV)的单克隆抗体(MAb),本研究以灭活的H5N1亚型A/Chicken/Guangdong/S2261/2009(H5N1GD261)株免疫4周龄～6周龄BALB/c雌鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经间接ELISA及HI筛选获得了3株能稳定分泌抗HA的MAb杂交瘤细胞,分别命名为1A4、2F5和3D3。MAb亚类鉴定表明,2F5为IgM类,其它为IgG2a亚类,轻链均为κ链。经血凝抑制检测,3株MAb均能与H5亚型的AIV结合,并具有较好的型广谱性。
- 崔佳莹李印于扬张文亮邓国华陈化兰
- 关键词：禽流感病毒血凝素单克隆抗体血凝抑制
- 环洞庭湖区活禽批发市场和水禽场H6亚型禽流感监测被引量：1
- 2015年
- 为了解环洞庭湖区活禽批发市场和水禽场H6亚型禽流感病毒的分布和流行情况,分别于2009—2011年对环洞庭湖地区活禽批发市场、2011—2013年对水禽场的H6亚型禽流感进行了系统监测。对在活禽批发市场上采集的拭子样品先由尿囊腔接种SPF鸡胚,然后用血凝试验(HA)测定所收集的尿囊液,对HA测定有滴度的再进行血凝抑制试验(HI),并与RT–PCT方法相结合鉴定病毒的亚型。检测结果显示:在环洞庭湖区的5个活禽批发市场上都分离到H6亚型禽流感,并且在鸡、鸭、鹅拭子中都分离到该病毒,总的分离率为6.49%;水禽场H6亚型禽流感病毒群体阳性率达3.6%,拭子的H6亚型病毒分离率为0.29%,活禽批发市场鸭拭子H6亚型禽流感病毒分离率为9.58%,表明市场环节水禽H6亚型禽流感的隐性带毒率比养殖环节高,在一定程度上说明禽流感在活禽批发市场存在水平传播的风险。
- 黄建龙王昌建邓国华范仲鑫何世成朱春霞唐小明刘道新
- 关键词：洞庭湖区
- 一株野鸟源H9N2亚型禽流感病毒的全基因组序列分析及致病性研究被引量：4
- 2015年
- 为进一步了解2014年分离自我国南方野鸟粪便中的一株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)Wide Bird/Hu N/SC1400/2014(H9N2)(WB/400/14)的生物学特性,本研究对其进行全基因组序列测定、进化分析及SPF鸡、SPF鸭和BALB/c小鼠的感染性试验。序列分析显示:该分离株的HA裂解位点基序为333PAASDR↓GL340,其中不存在多个连续的碱性氨基酸,符合低致病性禽流感病毒(LPAIV)氨基酸序列特征。该分离株不同基因片段来源较复杂,分别与H9、H6、H4、H1、H11、H10、H3等多种亚型的LPAIV同源性较高,呈现明显的多样性。感染性试验显示,WB/400/14不能够在SPF鸡和小鼠体内有效复制,但病毒感染SPF鸭后能够在部分脏器中检测到病毒的存在,并且感染鸭能通够过咽喉和泄殖腔同时向外排毒,而同居感染鸭仅通过泄殖腔向外排毒,表明分离株在SPF鸭群中具有良好的水平传播能力。本研究为AIV的监测和防控提供实验依据。
- 张芳王晶卢昆鹏肖丽彭志崔鹏飞关立峥邓国华陈化兰
- 关键词：野鸟禽流感病毒H9N2亚型感染性
- 一种检测禽流感病毒不同亚型cDNA的方法
- 本发明公开了一种新的检测禽流感病毒不同亚型cDNA的方法，步骤如下：分别制备覆盖禽流感病毒H5、H7、H9亚型及M基因的DNA片段，将所制备的DNA片段点到氨基包被的玻璃载体上制备成基因芯片备用；通过反转录将被检病毒样品...
- 王秀荣于康震陈华兰邓国华刘丽玲孔宪刚乔传玲姜永萍
- 文献传递
- H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5对高致病力禽流感病毒攻击的完全保护
- 对HA基因密码子及表达载体优化的H5亚型禽流感DNA疫苗pCAGGoptiHA5的免疫效果进行了研究。pCAGGoptiHA5分别以100μg和10μg剂量一次或加强免疫3周龄SPF鸡,单次免疫后4周以同样剂量和途径加强...
- 姜永萍张洪波李呈军步志高邓国华陈化兰
- 关键词：禽流感H5亚型DNA疫苗
- 文献传递
