毛丽萍
- 作品数:37 被引量:76H指数:5
- 供职机构:南通大学更多>>
- 发文基金:江苏省南通市社会发展科技计划项目南通市科技局社会发展科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 早期B细胞因子3对HepG2细胞周期的影响
- 2009年
- 目的:克隆人早期B细胞因子3(EBF3)基因,构建真核表达载体pEGFP/EBF3,研究人EBF3对肝癌细胞株HepG2细胞周期的影响。方法:提取人胎盘组织总RNA,采用RT-PCR技术克隆人EBF3基因,并将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1,重组质粒双酶切鉴定,并进行序列测定。将重组质粒转染HepG2细胞,Western blot确证EBF3-EGFP融合蛋白的表达及亚细胞定位,流式细胞术分析转染细胞周期。结果:成功获得全长人EBF3基因,经双酶切和序列测定鉴定,真核表达质粒pEGFP/EBF3构建正确,将pEGFP/EBF3导入HepG2细胞24小时后,在倒置荧光显微镜下可观察到EBF3-EGFP融合蛋白主要表达于核内。Western blot证实转染pEGFP/EBF3后24小时和48小时细胞质和细胞核中均检出相对分子质量(Mr)为87 000的EBF3-EGFP融合蛋白。转染pEGFP/EBF3后48小时和72小时,S期细胞比例均明显高于pEGFP-N1转染细胞组,表明EBF3基因的导入可诱导细胞从G1期向G2期发展,从而促进细胞增殖。结论:成功构建了真核表达质粒pEGFP/EBF3,pEGFP/EBF3转染组S期细胞比例高于pEGFP-N1转染组,提示EBF3对人肝癌细胞株HepG2细胞有促进增殖作用。
- 王跃国王惠民鞠少卿汪晓莺毛丽萍
- 关键词:HEPG2细胞细胞周期
- 连接酶检测反应法检测乙型肝炎病毒核苷(酸)类似物耐药突变的可行性被引量:2
- 2012年
- 目的探讨依据寡核苷酸等位基因特异性聚合酶链反应(PCR)扩增及连接酶检测反应(LDR)方法检测乙型肝炎病毒(HBV)4种核苷(酸)类似物耐药突变的可行性。方法以基因库公布的981条HBV基因序列为基础,针对拉米夫啶、替比夫啶、阿德福韦和恩替卡韦8个耐药位点上的氨基酸替换形式,设计15对特异性引物,采用多重PCR扩增HBV P基因区野生型和突变型目的片段,然后进行多重LDR,最后在ABI3130测序仪上电泳,根据内参标记、LDR产物的长度进行结果判读。应用此方法对12例慢性HBV感染患者血清进行检测,同时采用荧光PCR、焦磷酸测序技术对其验证,判断其特异性和准确性。结果 LDR法能有效区分包括rtL180M、YMDD、YIDD、YVDD、rtA181V/T、rtN236T、rtT184G、rtS202I、rtM250V野生株和部分突变株;4例HBV DNA>106copy/mL患者检测出野生株和突变株,结果与焦磷酸测序一致;LDR法与荧光PCR法检测结果一致率达83.3%(10/12)。结论血清HBV DNA>106 copy/mL时结合多重PCR的复合LDR可通过一次扩增检测产物中的多个单突变或野生型位点,有助于核苷(酸)类似物耐药的诊断和治疗。
- 孙艺艳吴月平毛丽萍陆建荣陈琳陆仁飞
- 关键词:乙型肝炎病毒突变
- 血清前白蛋白检测及对肝病诊断的评价被引量:1
- 1997年
- 毛丽萍
- 关键词:血清前白蛋白肝病
- 碱性铁氰化钾消除胆红素对Jaffe动力学法测肌酐的负干扰被引量:7
- 1999年
- 为消除胆红素对Jaffe动力学法测肌脉的鱼干扰。临用前将0.04mol/L苦味酸与0.3mol/L氢氧化钠等量混合,再加入铁氰化钾,使其终浓度为100μmol/L,然后再打Jaffe动力学法测肌酐。对36价总胆红素浓度在0~483μmol/L的标本进行检测,可以有效地消除胆红素对肌酐测定的干扰。且结果准确可靠,对黄疸标本的平均回收率为94.5%,重复性好,批内变异系数(CV)为2.35%~3.37%,批间CV为2.41%~3.72%。该法操作简便,标本不需予处理,能有效地消除胆红素对Jaffe动力学测肌酐的负干扰。
- 毛丽萍鞠少卿王跃国
- 关键词:胆红素铁氰化钾肌酐
- 外周血单个核细胞TRAIL mRNA和血清sTRAIL水平与HBV感染肝损伤的相关性被引量:9
- 2007年
- 目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMCs)肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA及血清可溶性TRAIL(sTRAIL)水平与HBV感染肝损伤的关系.方法:采用TaqMan实时荧光定量RT-PCR(FQ- RT-PCR)检测58例慢性肝炎患者外周血PBMCs中TRAIL mRNA水平,采用夹心酶联免疫吸附法分析其血清sTRAIL水平,同时与血清HBV DNA滴度和肝功能相关指标,进行相关性分析.结果:除轻度慢性乙肝外,其他各型慢性乙型肝炎患者血清sTRAIL水平均显著低于健康对照组(t=2.91,P<0.05),各型慢性乙肝之间无显著性差异,与白蛋白(ALB)呈显著正相关(r =0.426,P<0.05),与TBIL、ALT及HBV DNA滴度无相关性.各型慢性乙肝患者PBMCs中TRAIL mRNA水平显著高于健康对照组(t= 28.31.P<0.001),与肝功能指标及血清HBV DNA滴度无相关性.结论:血清sTRAIL水平降低与肝损伤相关,提示单个核细胞膜结合型TRAIL增高与肝损害及乙肝病程迁延不愈有关.
- 毛丽萍王惠民张子玉吴月平章幼奕鞠少卿王陆军陈育凤
- 关键词:荧光定量PCR外周血单个核细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
- PCR-微流芯片法检测HBV基因型及其临床应用
- 2006年
- 徐建中吴月平黄松平章幼奕毛丽萍陆建荣赵云凌勇武
- 关键词:HBV基因型基因型检测微流芯片乙型肝炎患者
- 血浆Dickkopf同源物1检测对肝细胞癌的诊断价值被引量:1
- 2016年
- 目的:探讨检测血浆 Dickkopf同源物1(DKK1)对肝细胞癌(HCC)的诊断价值。方法选取2014年11月~2015年12月南通市第三人民医院已确诊的 HCC患者48例,肝硬化(LC)20例,慢性乙型肝炎(CHB)20例,选择排除其他慢性疾病的健康体检者(HC)20例,采用 ELISA方法定量检测血浆中DKK1浓度,同时采用美国雅培 i2000微粒子化学发光免疫分析仪检测其 AFP。同时比较分析其 ROC曲线及相关性。结果 HCC组DKK1水平均显著高于 LC组、CHB组和 HC组(Z=-4.132~-5.828,P均<0.001)。DKK1对 HCC诊断价值的 ROC曲线下面积为0.889,95%置信区间为0.831~0.947,DKK1诊断 HCC最佳 cutoff值为565 ng/L,其诊断灵敏度为93.8%,特异度为70%,AFP的 ROC曲线下面积为0.759,95%置信区间为0.667~0.850。DKK1的 AUC显著>AFP(Z=2.28,P=0.022)。DKK1和 AFP两指标间无相关性(r=0.148,P=0.316),其中有21例 AFP<20μg/L而其DKK1>565 ng/L的诊断临界值。结论检测血浆中DKK1可以作为 AFP诊断 HCC的有效补充,尤其是DKK1对 AFP阴性 HCC患者的早期诊断价值值得关注。
- 毛丽萍何义民韩刚王跃国
- 关键词:肝细胞癌DICKKOPF同源物甲胎蛋白
- 转录因子EBF3在肝癌组织中的表达及意义
- 2008年
- 目的探讨肝癌及癌旁非癌肝组织中早期B细胞因子3(EBF3)的mRNA及蛋白质表达差异及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR技术检测18例配对肝癌及癌旁非癌肝组织EBF3 mRNA水平,免疫印迹(WB)检测5例配对标本EBF3蛋白表达。结果18例肝癌和配对癌旁肝组织中EBF3 mRNA与β2M mRNA的对数比值分别为0.52±0.17和0.28±0.23,差异有统计学意义(t=3.56,P=0.0011)。5例肝癌组织EBF3 WB带平均灰度值为(26.35±14.06),与癌旁非癌肝组织(7.86±8.47)相比差异显著(t=2.52,P=0.036)。结论肝癌组织中EBF3 mRNA及其蛋白质表达均上调,提示EBF3可能与肝癌的发生发展相关。
- 毛丽萍金小云王跃国王惠民
- 关键词:肝肿瘤实时荧光定量PCR免疫印迹
- 多烯磷脂酰胆碱治疗慢性乙型肝炎89例效果观察被引量:6
- 2007年
- 目的:观察多烯磷脂酰胆碱治疗慢性乙型肝炎的疗效及安全性。方法:观察多烯磷脂酰胆碱治疗慢性乙型肝炎89例治疗前、治疗1个月、治疗2个月、停药2周患者的症状、体征及常规生化指标的变化。结果:多烯磷脂酰胆碱治疗1个月后,谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、白蛋白/球蛋白、γ谷氨酰胺转移酶的水平均明显改善(P<0.05),治疗2个月时上述指标均进一步改善(P<0.05),停药后2周时仍较治疗2个月时有显著改善(P<0.05)。结论:多烯磷脂酰胆碱能有效抑制肝组织炎症,减少肝细胞的破坏,延缓肝纤维化发展,提高患者生活质量。
- 明芳王志荣毛丽萍
- 关键词:慢性乙型肝炎多烯磷脂酰胆碱
- 我院2006—2012年铜绿假单胞菌的耐药分析被引量:2
- 2013年
- 目的了解我院铜绿假单胞菌(PA)的耐药情况,给临床治疗提供依据。方法统计我院2006—2012年铜绿假单胞菌的耐药情况,进行回顾性比对分析。结果铜绿假单胞菌对抗生素的耐药菌株越来越多,对一些抗生素耐药率在提高。结论临床必须根据药敏结果,联合用药,合理疗程,才能控制多重耐药及泛耐药铜绿假单胞菌在临床蔓延。
- 何义明赵建华毛丽萍
- 关键词:铜绿假单胞菌耐药联合用药