- 负性共刺激分子B7-H4表达模式及功能研究
- B7-H4是2003年由多位科学家发现的B7家族的一个成员，属协同刺激分子的一类，在限制、终止和削弱T细胞的免疫应答中提供了重要的负性共刺激信号。在淋巴组织和非淋巴组织中能检测到B7-H4mRNA的广泛表达，但其蛋白却在...
- 李金美
- 关键词：肿瘤细胞
- 文献传递
- 负性共刺激分子B7-H4赋予肾癌细胞对化疗药物的耐药性研究被引量：1
- 2013年
- 通过RT-PCR方法克隆出人野生型负性共刺激分子B7-H4基因,将目的片段双酶切(EcoRⅠ和BamHⅠ)后,与pIRES2-EGFP真核表达载体连接,构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-B7-H4-WT并进行鉴定;然后用定点突变法构建B7-H4核定位序列突变体基因,再构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-B7-H4-NLS-MT;脂质体转染法将重组载体导入786-O细胞,CCK8法研究转基因细胞株的增殖率及对化疗药物5-氟尿嘧啶、阿霉素和顺铂的耐药性。结果显示:B7-H4野生型转基因细胞株相较于空白质粒组,可有效促进786-O细胞增殖,并赋予786-O细胞对3种化疗药物的耐药性。与空白质粒组相比,对5-氟尿嘧啶的耐药倍数为2.06,对阿霉素的耐药倍数为1.81,对顺铂的耐药倍数为1.72。机制研究显示B7-H4野生型可赋予肿瘤细胞抗凋亡作用,1.25μg/mL 5-氟尿嘧啶引起B7-H4 WT/786-O的细胞的凋亡率是20.2%,而Mock/786-O和B7-H4 NLS/MT/786-O细胞的凋亡率分别是41.1%和35.1%。说明B7-H4可能通过调控细胞凋亡赋予肿瘤细胞多药耐药性。当B7-H4核定位序列被突变后,这些功能都消失,说明B7-H4促肿瘤细胞增殖、赋予其多药耐药性的功能与其核定位序列密切相关。
- 李金美宋慧练启慧陈敏吉章良谢炜
- 关键词：B7-H4肾癌细胞5-氟尿嘧啶耐药性
