徐建业
- 作品数:11 被引量:50H指数:3
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- 用重叠延伸聚合酶链反应制备鸭乙型肝炎病毒基因点突变
- 1996年
- 目的制备含鸭乙型肝炎病毒(DHBV)前核心区终止密码突变的基因片段,以对此基因突变作有关生物学研究。方法用重叠延伸聚合酶链反应(OE-PCR)制备含此人工定向点突变的基因片段;用不对称聚合酶链反应(asy-PCR)制备单链DNA模板作测序。结果凝胶电泳显示OE-PCR产物与克隆DHBVDNA酶切片段位置一致,测序证实该点突变存在。结论用OE-PCR作人工定向基因突变,不需要克隆制备单链模板及筛选阳性克隆,2天内即可出结果,较传统方法简便、快速、有效。
- 徐建业Dush.,GM
- 关键词:聚合酶链反应基因突变
- 加温诱导肿瘤细胞凋亡与逆转多药耐药性的实验研究被引量:32
- 2000年
- 目的 探讨加温逆转肿瘤细胞株KBV200 多药耐药性及与诱导细胞凋亡的关系。方法用四唑蓝快速比色法(MTT法) 检测细胞存活率;用形态学( 光镜、电镜观察) ;生化学(DNA 末端转移标记法,TUNEL法) 及流式细胞术分析细胞凋亡状况。结果 加温42 ℃,1 h 可明显降低KBV200 细胞存活率,提高长春新碱细胞毒性作用;单加VCR 细胞存活率为(90 .70 ±8.78) % ,加VCR 加温为(57 .40±21 .55)% ,P< 0 .002。加温与细胞分化剂CDA- Ⅱ合用,有明显协同逆转作用。CDA- Ⅱ与VCR合用细胞存活率为(59 .24 ±30.80)% ,加温与CDA- Ⅱ及VCR 合用为(15 .32 ±2 .68)% ,P< 0.05。42 ℃或43 ℃处理1,24 h 后即可观察到明显细胞凋亡。43 ℃1 h 处理诱导作用更强。结论 加温可明显逆转肿瘤细胞多药耐药及诱导细胞凋亡。加温对肿瘤细胞凋亡的诱导,在加温逆转肿瘤细胞耐药性中可能起着重要作用。
- 徐建业周琦卢萍汤伟董莲芳
- 关键词:高温抗药性肿瘤细胞凋亡热疗法
- 聚丙烯酰胺凝胶DNA水平电泳检测多药耐药基因多态性被引量:1
- 2008年
- 目的探讨聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)DNA水平电泳条件,分析多药耐药基因单核苷酸多态性(MDR1SNPs)。方法以DNA标准为标本探讨PAGE DNA水平电泳条件;PCR-限制性片段长度多态性作为健康人MDR1SNPs C3435T分析,PAGE DNA水平电泳作PCR产物酶切结果分析。结果10 mL PAGE含40%过硫酸铵70μL,四甲基乙二胺20μL,隔绝空气在琼脂糖水平电泳槽制胶。交联度为29:1,凝胶浓度为7.5%时,效果最好。45例健康人MDR1C3435T中,20例为C/C型、T/C型17例、T/T型8例。结论PAGE DNA水平电泳简便易行,分离效果好,可用于MDR1SNPs分析,适合基层推广。
- 徐建业周琦马丽芳吴立翔
- 关键词:MDR单核苷酸电泳
- 固体脂质纳米姜黄素联合顺铂对卵巢癌SKOV3的增殖及Bax/Bcl-2蛋白表达的实验研究被引量:3
- 2011年
- 目的:研究固体脂质纳米姜黄素(Curcumin-loaded solid lipid nanoparticles,SLN-Cur)与顺铂(Cisplatin,DDP)联用对人卵巢癌SKOV3细胞株生长的影响及促凋亡作用。方法:姜黄素(Curcumin,Cur)制备成SLN-Cur新型给药系统,分别检测DDP、Cur、SLN-Cur、DDP+Cur、DDP+SLN-Cur对人卵巢癌SKOV3细胞株凋亡形态学变化及超微结构变化,细胞凋亡率及凋亡相关基因蛋白的表达。结果:SLN-Cur可抑制SKOV3细胞生长,抑制率与药物浓度及作用时间成依赖关系,24 h IC50=40.14μmol/L,DDP与SLN-Cur联合诱导细胞凋亡作用增强,具有显著协同作用;Bcl-2表达减弱,Bax表达增强。结论:SLN-Cur合用DDP对SKOV3细胞株具有较好的抑制增殖及促凋亡作用,通过下调Bcl-2表达及上调Bax表达而诱导细胞凋亡。
- 邓舒婷甘霖周琦徐建业李少林
- 关键词:固体脂质纳米粒姜黄素顺铂
- 血清甲胎蛋白正常含量者测定岩藻糖化指数对肝细胞癌诊断价值的探讨被引量:7
- 1989年
- 近年来不少学者报道测定甲胎蛋白(AFP)异质体可鉴别肝细胞癌(下称肝癌)与其他良性肝病,并有助于肝癌的早期诊断。AFP异质体的测定系利用其与植物凝集素的亲和能力,分为结合型与非结合型。据最近报道对人FP异质体分子结构研究,已证实其与扁豆凝集素(LCA)的亲和力是由于AFP碳水化合物链上存在岩藻糖残基。
- 李伟道徐建业张静兰史玲陈忠良周福康杨廷碧刘兴明张仲国
- 关键词:肝癌甲胎蛋白
- 姜黄素固体脂质纳米粒单用或与顺铂联用对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用研究被引量:3
- 2011年
- 目的:研究姜黄素固体脂质纳米粒(Cur-SLN)单用或与顺铂(DDP)联用对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用。方法:单用试验,分组为空白对照组、Cur组、Cur-SLN组(均以Cur计,终浓度为10、20、40、60、80μmo·lL-1);联用试验,分组为空白对照组、DDP组、DDP+Cur组及DDP+Cur-SLN组,各组DDP终浓度为1、2、3、4、5μmo·lL-1,Cur终浓度均为10μmo·lL-1,检测上述各组分别对SKOV3细胞作用24、48、72h后细胞的生长抑制率。另设立空白对照组、DDP组、Cur组、Cur-SLN组、DDP+Cur组及DDP+Cur-SLN组(DDP终浓度均为2.5μmo·lL-1,Cur终浓度均为10μmo·lL-1),检测各组对SKOV3细胞作用24h后细胞凋亡率及细胞周期调控因子Cyclin E、CDK2的表达。结果:相同浓度下,与Cur组比较,Cur-SLN组作用不同时间后细胞生长抑制率均明显升高(P<0.05);与DDP组比较,DDP+Cur组和DDP+Cur-SLN组细胞生长抑制率均明显升高(P<0.05),且DDP+Cur-SLN组明显高于DDP+Cur组(P<0.05);与空白对照组比较,5个药物组细胞阻滞主要发生在G2期,细胞凋亡率和Cyclin E、CDK2表达均明显升高(P<0.05或P<0.01),且DDP+Cur-SLN组明显高于其他组(P<0.05)。结论:Cur-SLN对人卵巢癌SKOV3细胞有明显的生长抑制及促凋亡作用,且与DDP联用有协同效果。
- 邓舒婷甘霖周琦徐建业李少林
- 关键词:姜黄素固体脂质纳米粒卵巢癌SKOV3细胞顺铂单用
- mdr1C3435T基因多态性与卵巢癌遗传易感性关系研究被引量:1
- 2009年
- 目的:探讨mdr1基因多态性与卵巢癌遗传易感性的关系。方法:采用病例对照,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析135例经病理确诊的卵巢癌病人(病例组)和146例同一地区的健康汉族女性(对照组)的mdr1C3435T基因型进行对照研究。结果:卵巢癌病例组C/C型(30.37%)明显低于对照组(47.95%),而病例组T/C型(44.44%)和T/T型(25.19%)均明显高于对照组T/C(38.35%)和T/T(13.7%),病例组和对照组各基因表型之间差异有显著统计学意义(χ2=10.930,P=0.004)。卵巢癌mdr1C3435T基因纯合缺失率(25.19%)高于对照组(13.7%),差异有统计学意义(χ2=5.961,P=0.015),与对照组相比,T/T型患卵巢癌的危险度提高了2.121倍。mdr1C3435T的基因纯合缺失型和非纯合缺失型在病例组与对照组间年龄比较差异均有明显统计学意义(P<0.05),其中在50岁以上年龄段,病例组与对照组mdr1C3435T的基因纯合缺失率差异有统计学意义(χ2=4.984,P=0.026),病例组(20.41%)高于对照组(5.1%),T/T型患卵巢癌的危险度增加2.533倍。结论:mdr1C3435T基因突变可增加卵巢癌发病风险,mdr1C3435T基因多态性与卵巢癌遗传易感性密切相关。50岁以上女性,T/T型增加卵巢癌的发病风险。
- 马丽芳周琦徐建业李少林
- 关键词:卵巢癌疾病遗传易感性
- 表皮生长因子受体酪氨酸激酶区基因突变研究进展被引量:2
- 2006年
- 该文着重介绍表皮生长因子受体酪氨酸激酶区基因突变的特点、这种突变对非小细胞性肺癌患者接受表皮生长因子受体抑制剂治疗的临床意义,以及在其他肿瘤发生的状况,阐述了对表皮生长因子受体酪氨酸激酶区进行基因突变筛选的新进展。
- 徐建业李伟道
- 关键词:突变蛋白质酪氨酸激酶
- 甲胎蛋白异质体对甲胎蛋白不同含量肝癌的诊断意义
- 1989年
- 本文首次报道对血清AFP<20ng·ml^(-1)肝癌及肝病患者作甲胎蛋白异质体测定。原发性肝癌组74例,扁豆凝集素(LCA)非结合型AFP(AFP-N-L)_x^-±SD:42.19±28.99%,其中AFP<20ng·ml^(-1)19例为23.67±35.12%,AFP<20ng·ml^(-1) 55例48.58±23.73%,前者明显低于后者(p<0.001)。良性肝病组49例98.14±13.81%,其中AFP<20ng·ml^(-1)25例95.98±14.45%,AEP>20ng·ml^(-1) 24例92.3±13.16%,二者无差异。肝癌组明显低于肝病组(P<0.001)。简略讨论了AFP异质体测定的临床意义。
- 徐建业李伟道张静兰史玲张仲国周福康杨廷碧陈忠良艾金惠
- 关键词:肝癌甲胎蛋白异质体AFP
- DNA水平电泳检测重庆地区汉族人MDR1C3435T基因多态性
- 2009年
- 目的应用DNA水平聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测重庆地区汉族人MDR1C3435T基因的多态性。方法PCR扩增重庆地区正常汉族人外周血MDR1C3435T基因,以MboⅠ进行限制性酶切,用DNA水平PAGE作图谱分析。结果200名重庆地区汉族人MDR1C3435T基因中,表型T/T的频率为0.15,T/C为0.49,C/C为0.36。MDR1C3435T基因T频率为0.395,基因C为0.605。结论重庆地区汉族人MDR1C3435T基因的分布与我国其他地区人群基本接近,地区差异不明显。DNA水平PAGE为一种简单可靠的基因多态性分析方法,值得在基层单位推广。
- 马丽芳周琦徐建业李少林
- 关键词:基因多态性