张婉华
- 作品数：68 被引量：179H指数：9
- 供职机构：上海市农业科学院更多>>
- 发文基金：上海市科技兴农重点攻关项目上海市农科院青年科技发展基金国家攀登计划更多>>
- 相关领域：农业科学环境科学与工程生物学医药卫生更多>>
- 猪繁殖呼吸综合征病毒S3毒株的分离及其免疫特性研究被引量：10
- 2002年
- 从某猪场仔猪体内分离到一株 PPRSV毒株 ,该毒株能在 Marc-1 4 5细胞上增殖产生致细胞病变 ,该病变能被 PPRSV美洲型阳性血清所抑制 ,不被乙脑病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒阳性血清所抑制 ,经美洲型 PPRSV荧光抗体染色呈阳性反应 ,电镜观察到直径 55～ 60 nm的病毒粒子 ,接种阴性仔猪未见临床症状异常 ,但抗体检测阳性。命名该分离毒为 PPRSV-S3毒株。在 S3弱毒株分离鉴定的基础上 ,进一步在猪体上对其致病性和免疫力进行研究。S3毒株接种仔猪后 ,仔猪不表现任何症状 ,也不向外排毒。4～ 5周龄的仔猪接种 S3株后可产生坚强的免疫力 ,免疫后 4～ 6个月能抵抗强毒攻击。后备母猪配种前 2～ 3周免疫接种 S3株 ,怀孕 90～95d攻强毒 ,未发生流产、死胎、木乃伊胎、产弱仔等繁殖障碍现象。结果表明 ,S3是一株自然分离的弱毒株 ,且具有良好的安全性和免疫力。
- 祁贤张婉华叶向阳朱永军陆鑫芳
- 关键词：繁殖呼吸综合征病毒免疫特性
- 猪细小病毒病弱毒疫苗免疫效力评价及临床免疫试验被引量：2
- 2015年
- 为制定猪细小病毒病弱毒疫苗效力检验的标准,用3批猪细小病毒病弱毒疫苗进行接种猪与接种豚鼠的平行试验;同时进行临床免疫试验。3批疫苗接种豚鼠和猪后定期进行PPVHI抗体检测;猪于免疫后攻毒,并进行病毒分离。免疫母猪在怀孕早期进行强毒攻击,40d扑杀进行病毒分离。用3批疫苗免疫后备母猪统计产仔成绩。结果显示,豚鼠接种后21d、猪接种后7d全部产生抗体反应。免疫攻毒的猪均未从血浆和内脏中分离到病毒,而从对照猪分离到病毒;怀孕母猪强毒攻击后扑杀,胎儿病毒分离均为阴性,而对照猪胎儿病毒分离为阳性;统计数据表明免疫猪的产仔成绩比未免疫猪高,平均每窝多产活仔1.85头,少产死胎木乃伊胎0.65头。结果表明,当免疫豚鼠PPV HI≥64时,免疫猪能抵抗PPV强毒攻击,两者呈正相关;免疫母猪的攻毒试验表明免疫母猪能抵抗PPV经胎盘感染;临床免疫试验证明疫苗具有良好的免疫原性和安全性。
- 张婉华朱永军曹伟明徐平张春玲何锡忠彭丽英
- 关键词：抗体反应病毒分离
- 猪繁殖与呼吸综合征流行病学简述被引量：3
- 2003年
- 张婉华朱永军陆鑫芳
- 关键词：繁殖与呼吸综合征流行病学
- 出口家禽新城疫病毒PCR和ELISA联合检测方法的建立
- 2008年
- 针对出口家禽新城疫泄殖腔棉拭样品病毒检测的需要，建立了IK2R和ELISA联合检测方法。结果表明：检测时间较常规缩短7～14d；通过被检样品鸡胚传代，提高了阳性检测率；特异性强，只与不同类型新城疫病毒反应，不与其他常见禽类病毒反应；所检的3216个样本，符合率98．8％；用多重RT-IK2R和脑内接种试验两种方法鉴定的114份样品，符合率99．1％；与G朗Bank中部分新城疫病毒F基因比较，同源性81％～100％。
- 蒋凤英李春华王英周宗清张春玲邹勇何锡忠张婉华刘晨
- 关键词：多重RT-PCRELISA
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒S-1株ORF5和ORF7基因的克隆及变异分析被引量：5
- 2008年
- PRRSV S-1株经Marc-145复苏后,通过RT-PCR扩增了ORF5和ORF7基因。利用酶切位点将2个基因分别连接到原核表达载体PET-32C中,筛选阳性克隆送测序,序列分析表明:PRRSV S-1株ORF5基因变异性较高,与VR-2332毒株和CH-1 a毒株的同源性分别是:核苷酸同源性为91%和89%,氨基酸同源性是87%和85%;ORF7基因相对保守,核苷酸的同源性分别是97%和94%,氨基酸的同源性分别是95%和93%。
- 张春玲张婉华臧克伟王英蒋凤英邹勇李春华何锡忠
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因ORF7基因
- 不同代次的猪细小病毒(PPV S-1株)NS1基因的克隆与序列分析
- 2009年
- 根据GenBank中猪细小病毒PPV NADL-2株NS1基因序列设计了一对引物,以PPV S-1分离株不同传代代次的DNA为模板,进行PCR扩增,将扩增产物分别克隆到pGEM-T载体中进行测序。结果表明:扩增片段长约2.2 kb,包含完整的NS1基因,共编码662个氨基酸。应用DNAStar软件进行序列分析,结果显示:所有代次的NS1核苷酸同源性在99.4%以上,氨基酸同源性在98.5%以上;PPV S-1分离株在传代致弱的过程中,NS1基因出现了一些变异,有4处较为一致的突变,即1 052位C→T、1 636位G→A、1 717位A→G、1732位T→G,对应的氨基酸变化分别为Thr^(351)→Met^(351)、Val^(546)→Met^(546)、Asn^(573)→Asp^(573)、Ser^(578)→Ala^(578),这可能是PPV S-1在ST细胞上传代致弱的分子基础之一。
- 谢巧李春华张婉华王英蒋凤英张春玲
- 关键词：猪细小病毒NS1基因
- 伪狂犬病病毒沪株gE基因序列测定与比较分析
- 2005年
- 建立了伪狂犬病病毒的PCR检测方法,并将沪株伪狂犬病病毒的gE基因扩增片段进行测序和比较分析。根据伪狂犬病病毒gE和gB基因序列设计两对引物,以伪狂犬病病毒SH株DNA和单纯疱疹病毒I型为模板,产物连接到pMD18-T Vector。重组质粒测序后与闽A株序列比较,同源性为98%,与Genebank中已登录的伪狂犬病病毒gE基因序列进行blast比较,同源性在97%以上。gE基因序列比较保守,在疫苗应用及分子诊断方面均有较大的价值。
- 邵伟娟胡建华谢建云高诚张婉华
- 关键词：伪狂犬病病毒PCR方法基因克隆
- 猪伪狂犬病-猪细小病毒病二联苗的安全性与免疫力试验被引量：8
- 2007年
- PRV-gE--PPV弱毒疫苗接种后备母猪和怀孕母猪,临床上未见不良反应,并且怀孕母猪在预产期内顺利产下健康仔猪,表明PRV-gE--PPV弱毒疫苗具有良好的安全性。PRV-gE--PPV弱毒疫苗免疫后备母猪,2周后,PPV抗体100%(8/8)转为阳性,PRV抗体85.7%(7/8)转为阳性,能产生良好的抗体反应。在免疫接种后2个月、4.5个月进行强毒攻击,免疫猪未见不良反应,对照猪未见或出现轻微的不良反应。从免疫猪的鼻、肛分泌物和血浆中未分离到PPV,而从对照猪的鼻、肛分泌物和血浆中分离到PPV和PRV。表明PRV-gE--PPV弱毒疫苗能抵抗PPV、PRV的攻击,具有良好的免疫保护力。
- 张婉华叶向阳朱永军张春玲陆鑫芳
- 关键词：安全性免疫力
- 猪细小病毒病及其诊断与防制被引量：2
- 2007年
- 猪细小病毒病是引起母猪繁殖障碍的重要病因之一,是由猪细小病毒（Porcine parvovirus,PPV）感染引起的母猪子宫内胚胎、胎儿感染、死亡及木乃伊化,而母猪本身无明显临床症状为主要特征,可造成很大的经济损失。
- 叶向阳张婉华
- 关键词：猪细小病毒病母猪繁殖障碍防制临床症状经济损失木乃伊
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S-1株GP5蛋白和N蛋白的原核表达被引量：2
- 2007年
- 将构建好的表达质粒pET-E和pET-N转化到大肠杆菌BL-21中,通过诱导剂IPTG的诱导,在原核表达系统中得到了高效表达,重组蛋白的分子量分别为39 KDa和31 KDa左右。通过Western-blot蛋白免疫印记法检测蛋白活性,发现两种原核表达重组蛋白均能与PRRSV阳性血清发生反应,具有生物学活性,这就为下一步目的蛋白的纯化、蛋白高级结构的研究以及以GP5和N蛋白为抗原ELISA诊断方法的建立奠定基础。
- 张春玲臧克伟张婉华王英蒋凤英邹勇李春华何锡忠
- 关键词：PRRSVGP5蛋白N蛋白原核表达
