张春玲
- 作品数：62 被引量：134H指数：5
- 供职机构：上海市农业科学院更多>>
- 发文基金：上海市科技兴农重点攻关项目国家高技术研究发展计划江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 伪狂犬病病毒gE基因主要抗原表位区的原核表达及其在疫苗接种和自然感染鉴别诊断中的应用被引量：9
- 2004年
- 根据伪狂犬病病毒 (PRV)Min A株gE基因序列 ,利用PCR方法扩增了PRVgE基因不含信号肽、胞内区和跨膜区的主要抗原表位区 ,并克隆到原核表达载体pGEX 6p 1中 ,获得的重组质粒命名为pGEX tgE。经SDS PAGE电泳分析证实克隆的部分gE基因获得了表达 ,融合表达产物大小约为 6 3kD ,并在终浓度为 0 6mmol L的IPTG诱导下 ,3 5h其表达量达到高峰。通过改变诱导条件 ,有效抑制了包涵体形成 ,提高了重组蛋白的溶解性。Westernblot分析证实表达的重组gE蛋白具有抗原反应活性。将表达产物利用亲和层析法纯化后作为ELISA抗原 ,通过对其特异性、敏感性及工作条件的优化试验 ,和对 4 8份PRV阴性血清样品的检测结果的统计学分析 ,建立了猪伪狂犬病tgE ELISA鉴别诊断方法。通过对 4 0 0份送检血清样品的检测结果分析 ,表明其与PRV全病毒ELISA试验的符合率高达 95 %以上 ,与基于抗gE蛋白单抗竞争性ELISA的符合率达 94 %。
- 倪健强张春玲童光志仇华吉王云峰田志军
- 关键词：PRV
- 猪细小病毒病弱毒疫苗免疫效力评价及临床免疫试验被引量：2
- 2015年
- 为制定猪细小病毒病弱毒疫苗效力检验的标准,用3批猪细小病毒病弱毒疫苗进行接种猪与接种豚鼠的平行试验;同时进行临床免疫试验。3批疫苗接种豚鼠和猪后定期进行PPVHI抗体检测;猪于免疫后攻毒,并进行病毒分离。免疫母猪在怀孕早期进行强毒攻击,40d扑杀进行病毒分离。用3批疫苗免疫后备母猪统计产仔成绩。结果显示,豚鼠接种后21d、猪接种后7d全部产生抗体反应。免疫攻毒的猪均未从血浆和内脏中分离到病毒,而从对照猪分离到病毒;怀孕母猪强毒攻击后扑杀,胎儿病毒分离均为阴性,而对照猪胎儿病毒分离为阳性;统计数据表明免疫猪的产仔成绩比未免疫猪高,平均每窝多产活仔1.85头,少产死胎木乃伊胎0.65头。结果表明,当免疫豚鼠PPV HI≥64时,免疫猪能抵抗PPV强毒攻击,两者呈正相关;免疫母猪的攻毒试验表明免疫母猪能抵抗PPV经胎盘感染;临床免疫试验证明疫苗具有良好的免疫原性和安全性。
- 张婉华朱永军曹伟明徐平张春玲何锡忠彭丽英
- 关键词：抗体反应病毒分离
- 三种不同灭活剂对猪细小病毒和猪圆环病毒的灭活效果研究被引量：1
- 2022年
- 使用不同浓度的甲醛、β-丙内酯(BPL)、二乙烯亚胺(BEI)对猪细小病毒(S-1株)、猪圆环病毒2型(JSM株)进行灭活处理,采用灭活检验试验[血凝(HA)试验和IFA试验]和无菌检验试验检测不同时间段采集的灭活样品,研究不同灭活剂对猪细小病毒和猪圆环病毒的灭活效果,筛选最佳灭活条件。结果表明:盲传3代后,在37℃条件下,0.2%的甲醛灭活48 h、36 h可彻底灭活S-1株和JSM株;在32℃条件下,BEI终浓度为0.1%时,对S-1株和JSM株的最佳灭活时间分别是84 h和60 h;在4℃条件下,BPL对S-1株和JSM株的灭活终浓度分别为0.03%、0.05%,灭活时间分别为72 h、48 h。HA试验结果显示:使用甲醛灭活后,猪细小病毒血凝效价由2^(11)下降至2~6—2~5;使用BPL与BEI灭活对PPV血凝活性无明显影响。灭活终止程序中,BEI需要添加总体积10%的硫代硫酸钠,BPL在37℃、2 h即可完全水解。本研究最佳灭活条件为:在4℃条件下,终浓度为0.05%的BPL灭活48 h。
- 张春玲赵本进曹昌健王瑞阳钱忠辉张俊平葛宇燕丁卫星
- 关键词：甲醛猪细小病毒猪圆环病毒2型灭活
- 猪流感监测、诊断技术研究
- 刘惠莉童光志潘洁赵艳敏张春玲邢继兰周艳君饶柏忠王英崔尚金杨秋峰仇华吉田志军
- 采用重组表达蛋白为抗原，建立监测猪流感病毒血清抗体的间接ELISA方法，用于猪流感病毒感染的血清学检测。针对猪流感病毒不同血清亚型，筛选到型保守序列，建立针对不同血清亚型保守区的扩增体系，组建多重RT-PCR体系，可同时...
- 关键词：
- 关键词：猪流感病毒
- 多重感染猪场副猪嗜血杆菌的分离与鉴定被引量：1
- 2010年
- 本文通过临床观察、病理解剖和PCR方法诊断某猪场暴发的疑似断奶后多系统消耗综合征(PMWS),同时分离到一株合并感染的病原菌。分离菌株经细菌培养特性、生化反应、16s RNA基因特异性片段PCR扩增产物的序列测定,鉴定为副猪嗜血杆菌。通过对玻板凝集试验抗体阴性猪的静脉攻毒试验,攻毒猪在11h死亡,表明分离菌属于强毒型嗜血杆菌。
- 周宗清邹勇王英张春玲蒋凤英
- 关键词：副猪嗜血杆菌
- 猪伪狂犬病～猪细小病毒病二联苗安全性试验
- 2007年
- PRV-gE^-～PPV弱毒疫苗接种后备母猪,临床上未见不良反应,从鼻肛分泌物中没有分离到病毒;接种怀孕母猪也没有不良临床反应,并在预产期内顺利产下健康仔猪。结果表明PRV-gE^-～PPV弱毒疫苗具有良好的安全性。
- 张婉华叶向阳朱永军张春玲陆鑫芳
- 关键词：伪狂犬病细小病毒病二联疫苗
- PPV_(S-1)A株保存期研究及免疫原性测定
- 2014年
- 为了确保疫苗质量,保证生产用种毒的稳定性,将猪细小病毒PPVS-1A株的干毒和湿毒分别在-20℃和-70℃保存,每12个月取样一次,分别进行病毒含量测定、红细胞凝集价测定、乳鼠安全试验和豚鼠抗体检测。结果病毒含量均大于107.25;红细胞凝集价为1∶1024;乳鼠接种未见不良反应;豚鼠抗体检测HI均不低于1∶32。确定猪细小病毒PPVS-1A株湿毒在-20℃的保存期为24个月,在-70℃的保存期为48个月;猪细小病毒PPVS-1A株冻干毒在-20℃的保存期为36个月,在-70℃的保存期为60个月。猪细小病毒PPVS-1A株毒保存期长,具有良好的安全性和免疫效力。
- 张婉华朱永军张春玲何锡忠彭丽英
- 关键词：保存期免疫原性
- 猪细小病毒病冻干疫苗的保存期试验
- 2015年
- 为研究制定猪细小病毒病冻干疫苗的保存期,将3批疫苗分别在4℃保存3、6、9和12个月,在-20℃保存6、12、18和24个月,并进行物理性状、无菌检验、安全检验和效力检验,结果证实疫苗在4℃至少可保存12个月,-20℃至少可保存24个月。
- 朱永军张春玲张婉华
- 关键词：保存期试验
- 猪流感病毒NS1蛋白关键磷酸化位点对其拮抗干扰素的影响
- 程靖华陶洁李本强张春玲刘惠莉
- 猪细小病毒病疫苗研究进展被引量：3
- 2014年
- 猪细小病毒是引起母猪繁殖障碍的主要病原之一,给养猪业造成的损失非常巨大,目前主要的预防措施是疫苗接种。在国外已有商品化的猪细小病毒病灭活疫苗和弱毒疫苗,国内现在只有商品化的灭活疫苗,弱毒疫苗尽管有很多研究报道,但迄今为止还没有商品化。猪细小病毒和其他病毒的联苗研究也有很多报道,但离商品化还有很多工作要做。
- 张婉华彭丽英张春玲李春华倪建平徐伟林何锡忠蒋凤英周宗清朱永军
- 关键词：猪细小病毒疫苗
