宋华连
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 37例致心律失常性右心室心肌病患者PKP2基因检测被引量：3
- 2013年
- 目的调查单中心致心律失常性右心室心肌病（ARVC）患者PKP2突变发生率。方法对50例考虑诊断为ARVC的患者采用2010年新诊断标准进行重新评估。采用聚合酶链式反应（PCR）扩增PKP2基因各外显子片段并测序，结果与200例正常对照组进行比对分析。结果37例被确诊ARVC，9例为临界诊断，另4例为疑似诊断。确诊患者中有10例（27％）携带7个新突变和3个已报道突变，包括7个无义突变和3个错义突变，临界诊断及疑似诊断患者均未检测出PKP2基因突变。携带PKP2突变的患者与未携带突变的患者临床特征差异无统计学意义。结论本组ARVC患者PKP2基因突变发生率与欧美国家相似，但突变谱存在差异。
- 王本琪周秀娟杨兵王静王薇丰尚鹏李丹丹宋华连陈红武陈明龙曹克将
- 关键词：致心律失常性右心室心肌病基因突变
- 致心律失常性右心室心肌病患者桥粒斑蛋白基因突变和单核苷酸多态性检测被引量：2
- 2013年
- 目的 调查致心律失常性右心室心肌病（ARVC）患者桥粒斑蛋白（DSP）基因突变和单核苷酸多态性（SNPs）发生率.方法 对初步诊断为ARVC的50例患者采用2010年新诊断标准予以重新评估.应用聚合酶链式反应（PCR）扩增DSP基因全部外显子片段并测序,病例组测序结果与198例正常对照组进行比对分析.结果 37例符合ARVC确诊病例,9例为临界诊断病例,另有4例为疑似诊断病例.确诊病例中有5例（14％）携带5种DSP基因突变,既往均未见报道,包括4种错义突变和1种无义突变,临界诊断与疑似诊断病例均未检出DSP基因突变.同时检出4个非同义SNPs位点,其等位基因频率在对照组和病例组间差异无统计学意义.结论 本组ARVC患者DSP基因突变检出率为14％,且均为新发现突变.DSP基因外显子区域的4个SNPs位点可能与ARVC的发病无相关性.
- 王薇周秀娟杨兵陈红武顾凯李丹丹宋华连居维竹郦明芳张凤祥陈明龙曹克将
- 关键词：致心律失常性右心室心肌病基因突变单核苷酸多态性
- 桥粒芯糖蛋白基因沉默对HL-1细胞的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨桥粒芯糖蛋白（DSG2）基因沉默对HL-1细胞超微结构、细胞凋亡以及纤维化、脂肪化相关基因表达的影响。方法设计并合成针对DSG2基因编码区的干扰序列，构建真核细胞表达质粒并转染HL-1细胞。荧光定量PCR（RT—PCR）和蛋白免疫印迹（Westernblot）技术检测DSG2在mRNA和蛋白水平表达变化，筛选出沉默效率最佳的细胞株。观察其超微结构、细胞凋亡和纤维化与脂肪化相关基因mRNA水平表达的改变。结果成功构建了4种ShDSG2重组质粒，转染HL-1细胞并获得稳定转染细胞株，筛选出对DSG2基因mRNA水平（71．67％对0，P〈0．01）和蛋白水平表达（51．72％对0，P〈0．01）的抑制效率最显著的ShDSG2—273组。电镜扫描显示后者细胞空泡样变性、线粒体肿胀和嵴消失，流式细胞仪检查提示细胞凋亡显苫增加，RT-PCR示纤维化相关基因（Collal、Colla2、C013a1）与脂肪化相关基因（Adiponectin、PPAR-γ和C／EBP-α）的mRNA表达显著升高。结论成功建立能有效抑制DSG2表达的HL-1细胞株，表现出符合致心律失常型右心室心肌病（ARVC）患者病理和分子生物学特点的表型特征，提示其可作为深入研究ARVC致病机制的工具细胞。
- 丰尚鹏杨兵陈明龙周秀娟王静王本琪王薇李丹丹宋华连周本军陈红武张凤祥居维竹郦明芳曹克将
- 关键词：桥粒芯糖蛋白RNA干扰细胞凋亡
- 桥粒芯胶蛋白-2基因沉默对P19细胞向心肌细胞诱导分化的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨在P19细胞诱导分化成心肌细胞过程中,桥粒芯胶蛋白-2(DSC2)基因沉默对其的影响。方法设计并合成针对DSC2基因编码区的干扰序列,构建真核细胞表达质粒并转染P19细胞。荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测DSC2在mRNA和蛋白水平表达变化,筛选出沉默效率最佳的细胞株。二甲基亚矾诱导分化为心肌细胞,观察其超微结构和细胞凋亡等改变,以及对纤维化与脂肪化相关基因mRNA水平表达的影响。结果成功构建了5种ShDSC2重组质粒,转染P19细胞并获得稳定转染细胞株,筛选出对DSC2基因mRNA水平(69.47%vs 0,P<0.01)和蛋白水平表达(65.62%vs 0,P<0.01)的抑制效率最显著的ShDSC2-613组,并成功诱导分化为心肌样细胞后,电镜扫描显示后者细胞出现脂滴、空泡样变性、线粒体肿胀及嵴消失,流式细胞仪检测提示细胞凋亡显著增加,RT-PCR示纤维化相关基因(Collal、Colla2、Col3a1)与脂肪化相关基因(Adiponectin、PPAR-γ、C/EBP-α)的mRNA表达均显著升高。结论建立能有效抑制DSC2表达的P19细胞株并分化为心肌样细胞,表现出与致心律失常型右室心肌病(ARVC)患者病理和分子生物学特点相似的表型特征,提示其可作为深入研究ARVC致病机制的前体细胞。
- 李丹丹杨兵周秀娟宋华连王薇陈红武顾凯居维竹郦明芳张凤祥陈明龙曹克将
- 关键词：P19细胞致心律失常型右室心肌病
