孙思扬
- 作品数：7 被引量：13H指数：3
- 供职机构：江西出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：江西省科技计划项目国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪蓝耳病及猪细环病毒病检疫关键技术的研究与应用
- 杨春华祝建新孙思扬胡慧罗秋红夏彪魏战勇
- 以猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪细环病毒为研究对象，开展了采样技术和检测技术的研究。建立了1种新型的猪繁殖与呼吸综合征采样技术：只需将口腔拭子采集器放在猪栏内，10分钟后收集猪口腔拭子样品，操作简便快捷、不需保...
- 关键词：
- 关键词：猪蓝耳病
- 输血传播病毒PCR-DHPLC检测技术的建立及初步应用
- 2017年
- 目的应用聚合酶链式反应(PCR)结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测输血传播病毒。方法根据输血传播病毒的核酸序列特点设计特异性引物进行PCR,将扩增产物进行DHPLC检测分析,以验证方法的灵敏度、特异性、重复性,同时进行临床检测的初步应用。结果以乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒进行特异性试验,无交叉反应,具有较好的特异性;重复性良好;灵敏度可达1.0×10~1拷贝/反应。分别应用实时荧光PCR法、普通PCR法及本文所建立的PCR-DHPLC法同时检测32份血清样本,发现有17份样本实时荧光PCR阳性,17份样本PCR-DHPLC阳性,15份普通PCR阳性。结论本文建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、重复性好等优点,可用于输血传播病毒感染的分子流行病学调查。
- 杨春华廖芸罗秋红孙思扬夏彪祝建新
- 关键词：输血传播病毒实时荧光PCR
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒PCR-DHPLC检测新技术的建立及应用被引量：3
- 2012年
- 应用PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),根据PRRSV GP5基因的序列特点设计特异性引物,PCR扩增产物经DHPLC技术进行快速检测。以猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪流感病毒、猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,无交叉反应,具有较好的特异性和重复性;对阳性标准品的检测结果表明,所建立的PCR-DHPLC法灵敏度可达1.0×101拷贝/μL。对16份疑似病料分别应用本试验所建立的PCR-DHPLC法与SYBR GreenⅠ实时荧光PCR法、PCR-凝胶电泳法、病毒培养法进行检测,发现有15份荧光定量PCR阳性,15份PCR-DHPLC阳性,12份PCR-凝胶电泳阳性。结果表明,建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于临床PRRSV感染的早期诊断以及分子流行病学调查。
- 杨春华祝建新钟毅孙思扬沈艳陈庆富王川庆
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因变性高效液相色谱实时荧光PCR
- 猪细环病毒数字PCR定量检测方法的建立被引量：4
- 2017年
- [目的]实现猪细环病毒(TTSuV)的准确定量检测。[方法 ]根据TTSuV的序列特点,设计特异性引物、探针,建立数字PCR检测技术。对数字PCR反应体系中的引物和探针浓度进行优化,分析方法的灵敏度、特异性,并初步应用于进行临床检测。[结果 ]最终确定TTSuV1a和TTSuV1b数字PCR反应体系中最佳引物浓度均为250 nmol/L,最佳探针浓度均为300 nmol/L,TTSuV1a型和TTSuV1b型灵敏度均可达到单个拷贝数;以猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,结果无交叉反应;批内和批间试验表明,该方法的重复性良好;本实验室留存的92份血清样本的检测结果与其背景信息一致。[结论 ]本研究建立的TTSuV数字PCR法具有特异性强、灵敏度高、检测限低等优点,可用于TTSuV的定量检测。
- 杨春华孙洁罗秋红祝建新孙思扬周延钟毅夏彪
- 关键词：实时荧光PCR
- 生猪繁殖与呼吸综合征和猪流感检疫采样关键技术的研究与示范
- 杨春华孙思扬马欣欣胡婷李琼陈斌徐武俊陈庆富祝建新
- 按照项目研究目标，并充分体现简单、实用、符合动物福利的采样要求，立足于与实际结合、指导生产的原则，项目最终形成以下研究成果:第一、建立简单、易行、不需保定、不引起猪只应激反应的生猪呼吸道传染病检疫采样关键技术;第二、申报...
- 关键词：
- 关键词：呼吸道传染病采样方法
- 猪细环病毒实时荧光PCR检测技术的建立及应用被引量：2
- 2017年
- 为了实现猪细环病毒(TTSuV)快速检测,给TTSuV的调查、监测和防控提供可行性、操作性强的技术支持。本试验根据TTSuV的序列特点设计特异性引物、探针,应用实时荧光PCR技术检测TTSuV1a型和TTSuV1a1b型。以猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,无交叉反应。该检测方法具有较好的特异性和重复性,TTSuV1a灵敏度可达9.2拷贝/μL,TTSuV1b灵敏度可达5.6×101拷贝/μL;批内变异系数均小于1%,批间变异系数均小于3%。将该方法与PCR法、PCR-DHPLC进行比较,结果证实该方法具有较好的准确性。对92份血清样本进行检测,发现有58份TTSuV1a阳性、62份TTSuV1b阳性、51份TTSuV1a和TTSuV1b共感染阳性。本研究建立的TTSuV实时荧光PCR法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于TTSuV感染的分子流行病学调查。
- 杨春华孙思扬孙洁李仕祥祝建新周延
- 关键词：实时荧光PCR
- 猪细环病毒PCR-DHPLC检测技术的建立及应用被引量：4
- 2012年
- 为了应用PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测猪细环病毒1型和2型,根据猪细环病毒的序列特点设计特异性引物,PCR扩增产物经DHPLC技术进行快速检测。选择猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,无交叉反应。该检测方法具有较好的特异性和重复性;用质粒标准品进行TTSuV1和TTSuV2的PCR-DHPLC检测,灵敏度可达1.0×101拷贝·μL-1。对80份血清样本分别应用实时荧光PCR法、PCR-凝胶电泳法及本文所建立的PCR-DHPLC法与进行检测,发现TTSuV1有63份PCR-DHPLC阳性,63份实时荧光PCR阳性,54份PCR-凝胶电泳阳性;TTSuV2有69份PCR-DHPLC阳性,69份实时荧光PCR阳性,56份PCR-凝胶电泳阳性。本试验建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于TTSuV感染的分子流行病学调查。
- 杨春华周延孙思扬钟毅王川庆
- 关键词：变性高效液相色谱实时荧光PCRPCR
