唐德芳
- 作品数：5 被引量：29H指数：3
- 供职机构：四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：中国科学院“百人计划”四川省青年科技基金中国科学院知识创新工程重要方向项目更多>>
- 相关领域：生物学自然科学总论轻工技术与工程化学工程更多>>
- 扩展细胞色素P4502A6对大位阻底物的适应性被引量：2
- 2009年
- 细胞色素P450酶(P450)的分子改造及其催化的生物转化是当前的两个研究热点.本研究以扩展P4502A6的底物适应性为目标,通过尝试对P4502A6酶进行N-端修饰提高表达量、筛选随机突变库以及点突变改变活性位点重要氨基酸残基等手段,在两个随机突变体中未筛选到功能突变体,但通过点突变重要氨基酸残基获得了新的突变体P4502A6(N297Q/I300A).该突变体具有比野生型和已报道的其它突变体更广泛的底物适应性,能够催化氧化大位阻底物6-苄氧基吲哚(6-OBzl-indole)生成蓝绿色物质.该物质经质谱测定为靛蓝类二聚体化合物.实验表明,其中两个氨基酸残基的变化都是关键突变,此结果与最新的P4502A6突变体晶体结构研究相符.计算机模拟显示,I300A突变导致活性口袋在铁卟啉环的垂直和水平方向都增大,使其能接纳在两个方向都有位阻的底物;而297位的天冬酰胺是一个功能保守的残基,N297Q的变化可能与氢键等弱作用有关.
- 唐德芳张志刚裴小琼袁帅胡承吴中柳
- 关键词：细胞色素P450CYP2A6点突变生物转化
- 黑曲霉β-葡萄糖苷酶的筛选、克隆及表达被引量：16
- 2009年
- 从曲霉属10株试验菌中筛选得到一株产β-葡萄糖苷酶活性较高的黑曲霉FTA-008.该菌株在适宜的培养条件下,β-葡萄糖苷酶的最高活性达2.89U/mL,适宜产酶周期为3d.通过设计特异引物,以该菌株的总RNA为模板,采用RT-PCR技术获得大小为2511bp的cDNA片段,该序列与GenBank中AJ132386的β-葡萄糖苷酶序列相比,氨基酸序列同源性达96.8%.经毕赤酵母表达,β-葡萄糖苷酶比活力达7.85U/mg.
- 唐德芳裴小琼李晓璐胡承陈军吴中柳
- 关键词：黑曲霉Β-葡萄糖苷酶克隆RT-PCR毕赤酵母
- 黑曲霉β-葡萄糖苷酶的筛选，克隆及表达
- 本研究从曲霉属10种试验菌株中筛选得到一株产β-葡萄糖苷酶活性较高的黑曲霉FTA-008。该菌株在适宜的培养条件下，β-葡萄糖苷酶的最高活性达2.90U/ml，适宜产酶周期为3天。通过设计特异引物，以该菌株的总RNA为模...
- 唐德芳裴小琼李晓璐胡承陈军吴中柳
- 关键词：黑曲霉Β-葡萄糖苷酶RT-PCR蛋白表达毕赤酵母
- 文献传递
- 枯草芽孢杆菌LL18-4产类细菌素的分离纯化及特性研究被引量：3
- 2009年
- 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)LL18-4菌株分泌物中的类细菌素通过硫酸铵盐析法粗提后,经过Sephadex G-75、DEAE-Sephadex A 50和Sephacryl S-200HR分步柱层析,SDS-PAGE电泳检测到单一蛋白质条带,分子量约为60 kD.该类细菌素在酸性条件下及80%饱和度的硫酸铵溶液中具有较高的稳定性,可4℃放置3个月仍保持80%以上活性;对有机溶剂有一定的耐受性;Mg^(2+)能提高其抑菌活性.指数增长前期添加柑桔绿霉(Peniicilbumdiigitatum)病原真菌的培养液可以提高该类细菌素的分泌量.
- 孙苗苗赵昆武志芳唐德芳胡承Miao-MiaoZhi-FangDe-Fang
- 关键词：枯草芽孢杆菌类细菌素分离纯化SUBTILISSEPHADEXSDS-PAGE电泳
- 响应面法优化细菌纤维素发酵合成工艺被引量：8
- 2010年
- 目的对细菌纤维素高产菌株葡糖醋杆菌G-29进行发酵优化,以提高其细菌纤维素合成能力。方法采用基于非完全平衡块原理的Plackett-Burman(PB)试验设计法,筛选出了3个主要影响因子:混合碳源(葡萄糖∶蔗糖=1∶2),MgSO4,乙醇,然后采用Box-Behnten中心,组合试验设计和响应面分析方法(RSM)确定其最佳浓度分别为混合碳原52.3g/L,MgSO40.159 8 g/L,乙醇32.5 ml/L。用扫描电镜观察了细菌纤维素的形态结构,并通过X射线衍射分析其在干态下和湿态下的最佳结构。结果在优化培养基条件下,菌株G-29发酵生产细菌纤维素的产量为11.83 g/L,是优化前产量(6.20 g/L)的1.9倍。结论PB试验和RSM相结合的试验方法,用于优化G-29发酵培养基,不仅科学合理而且准确有效。
- 袁帅胡承曹海鹏唐德芳孙苗苗
- 关键词：细菌纤维素
