裴小琼
- 作品数:46 被引量:35H指数:2
- 供职机构:中国科学院成都生物研究所更多>>
- 发文基金:中国科学院“百人计划”四川省青年科技基金中国科学院知识创新工程重要方向项目更多>>
- 相关领域:生物学理学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 一种制备(S)-N-叔丁氧羰基-3-羟基哌啶的方法
- 本发明涉及一种羰基还原酶生物催化N-叔丁氧羰基-3-哌啶酮制备(S)-N-叔丁氧羰基-3-羟基哌啶的方法。本发明方法反应条件温和,转化效率高,立体选择性高,产物ee值99.5%以上。底物的浓度可提高到250g/L,时空产...
- 吴中柳许光鹏刘艳裴小琼
- 文献传递
- 一种R-选择性苯乙烯单加氧酶的功能
- 本发明公开了一种来源于Streptomyces exfoliatus sp.A1013Y的新型苯乙烯单加氧酶SeStyA及其在催化不对称环氧化中的应用。该酶与传统的苯乙烯单加氧酶相比,对苯乙烯类底物具有相反的选择性,生成...
- 吴中柳肖虎刘艳裴小琼
- 耐热性提高的羰基还原酶突变体
- 本发明属于基因工程和酶工程技术领域,具体是以理性设计的方案,利用consensus方法以及FirePort在线网站识别了4个与羰基还原酶ChKRED03热稳定性相关的位点,并将有益突变位点进行整合,获得热稳定性大幅度提高...
- 吴中柳李同彪李孜一刘艳裴小琼
- 文献传递
- 黑曲霉β-葡萄糖苷酶的筛选、克隆及表达被引量:16
- 2009年
- 从曲霉属10株试验菌中筛选得到一株产β-葡萄糖苷酶活性较高的黑曲霉FTA-008.该菌株在适宜的培养条件下,β-葡萄糖苷酶的最高活性达2.89U/mL,适宜产酶周期为3d.通过设计特异引物,以该菌株的总RNA为模板,采用RT-PCR技术获得大小为2511bp的cDNA片段,该序列与GenBank中AJ132386的β-葡萄糖苷酶序列相比,氨基酸序列同源性达96.8%.经毕赤酵母表达,β-葡萄糖苷酶比活力达7.85U/mg.
- 唐德芳裴小琼李晓璐胡承陈军吴中柳
- 关键词:黑曲霉Β-葡萄糖苷酶克隆RT-PCR毕赤酵母
- 生物催化不对称还原制备(R)-1-[3,5-二(三氟甲基)苯基]乙醇研究进展
- 2020年
- (R)-1-[3,5-二(三氟甲基)苯基]乙醇是合成药物阿瑞匹坦的关键中间体.以羰基还原酶生物催化前手性酮3,5-二(三氟甲基)苯乙酮的方法制备该中间体具有立体选择性优异、反应条件温和、对环境友好等优点,近年来受到广泛关注,目前已报道的高立体选择性酶源(产物ee>99%)有10余种.其中原始菌株生物催化体系能够转化底物的浓度普遍低于200 mmol/L,而利用重组Escherichia coli全细胞或者粗酶液则可催化1 mol/L以上的底物.通过添加离子液体、深共熔溶剂等辅溶剂,羰基还原酶与葡萄糖脱氢酶融合表达以及酶固定化技术等方法优化反应体系可以有效提高底物转化效率.有些羰基还原酶,如LXCAR、KR01、Ch KRED20等,能够催化异丙醇脱氢实现辅酶自循环,其催化体系具有明显优势.未来利用蛋白质工程技术对野生型的潜力酶进行人工进化,可以进一步提高利于工业应用的酶学性能,同时稳定的生产工艺、规模放大、后处理等方面也需要深入开展研究.(图2表3参52)
- 刘艳裴小琼崔璨丁照云吴中柳
- 关键词:羰基还原酶手性醇定向进化
- 嗜热脂肪土芽孢杆菌木聚糖酶基因的合成及其在大肠杆菌中的表达(英文)被引量:1
- 2009年
- 来自嗜热脂肪土芽孢杆菌的木聚糖内切酶XT6在工业上有着重要的应用,已经成功应用于工业规模的生产试验.本文作者在合成XT6基因全序列的同时对其密码子进行了优化,且构建重组质粒在大肠杆菌中高表达.通过优化表达条件,功能正常的XT6基因在大肠杆菌中成功过量表达,蛋白表达量占细胞中总蛋白的65%.重组表达的木聚糖内切酶XT6特性和天然酶相似,以桦木木聚糖为底物测定细胞提取物中木聚糖酶活性,最大活性高达3030U/mL.本文首次报道了来自嗜热脂肪土芽孢杆菌中木聚糖酶基因全序列的合成和在大肠杆菌中成功过量表达.
- 张志刚裴小琼吴中柳
- 关键词:木聚糖酶密码子优化
- 黑曲霉阿魏酸酯酶A的克隆、表达及快速酶活检测体系的建立被引量:16
- 2009年
- 阿魏酸酯酶是参与半纤维素降解的重要酶类.为了提高阿魏酸酯酶的活性和其它性能,本文作者采用RT-PCR技术从黑曲霉CIB423.1中克隆了编码阿魏酸酯酶A的cDNA,构建了外泌表达的质粒,并将其转化到毕赤酵母GS115进行表达.通过检测培养液上清中的酶活,表明阿魏酸酯酶已成功在这一体系表达.同时,本文还建立了快速、稳定的酶活检测体系,为后续对阿魏酸酯酶酶突变体活性进行高通量筛选奠定了基础.
- 张帅兵裴小琼吴中柳
- 关键词:黑曲霉高通量筛选毕赤酵母
- 氧化微杆菌及其制备手性双三氟甲基苯乙醇的方法
- 本发明属于生物催化技术领域,涉及一种氧化微杆菌以及利用该菌制备光学纯(R)-1-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]ethanol的方法。本发明氧化微杆菌Microbacteriumoxyda...
- 吴中柳刘艳张超汤传根田小亮裴小琼
- 文献传递
- 具有不同数量几丁质结合域的杂交几丁质酶的构建及特性分析
- 昆虫病原真菌是自然界控制昆虫种群数量的重要因素之一,具有直接穿透昆虫体壁而使其致病的独特机制。在穿透昆虫体壁的过程中,真菌会分泌一系列的水解酶,如几丁质酶和蛋白酶,降解寄主体壁,帮助菌丝穿透。结构分析表明,大多数几丁质酶...
- 裴小琼
- 关键词:几丁质酶球孢白僵菌昆虫病原真菌酶学特性毒力基因
- 文献传递
- 一种新型细胞色素P450氧化酶的功能
- 本发明涉及一种新型细胞色素P450酶CYP108N7的催化功能,属于应用微生物及酶工程领域。该酶属于CYP108家族,可利用其对不同底物进行环氧化、羟基化、杂原子氧化、C‑H键断裂等生物催化反应,特别是对芳香族硫醚化合物...
- 吴中柳郭超刘艳裴小琼