周玥
- 作品数：44 被引量：166H指数：8
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠造血干细胞体外衰老模型的构建及其相关生物学被引量：4
- 2010年
- 目的建立造血干细胞(HSCs)体外衰老模型,探讨其衰老的相关生物学调控机制,为寻找延缓HSC衰老方法奠定基础。方法用免疫磁性分选法分离、纯化小鼠Sca-1+HSCs,用流式细胞术鉴定分选细胞纯度,免疫荧光检测分选细胞Sca-1+表达。用三丁基过氧化氢(t-BHP)100μmol/L诱导Sca-1+HSCs 6h,建立HSCs衰老体外模型。采用造血祖细胞集落培养,细胞周期分析和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色观察衰老HSCs的生物学特点。DNA印迹法(Southern blotting)与TRAP-PCR SYBR Green染色法检测HSCs端粒长度和端粒酶活性。RT-PCR法检测衰老相关基因p16Ink4a、p19Arf、p53、p21Cip1/Waf1 mRNA的表达水平。结果免疫磁性分选法分离、纯化的Sca-1+HSCs纯度可达(87.33±1.25)%。100μmol/L的t-BHP作用Sca-1+HSCs 6h,其体外培养形成造血祖细胞集落能力,自我更新及多向分化潜能显著低于对照组,处于G1期细胞比例增加,SA-β-gal染色阳性细胞数增加。衰老Sca-1+HSCs的端粒缩短,端粒酶活性下降,p16Ink4a、p19Arf、p53、p21Cip1/Waf1mRNA的表达水平明显增高。结论用t-BHP能建立Sca-1+HSCs体外细胞衰老模型,提示p16Ink4a-Rb通路和p19Arf-Mdm2-p53-p21Cip1/Waf1通路在t-BHP诱导Sca-1+HSCs衰老过程中发挥重要作用。
- 周玥杨斌姚欣王亚平
- 关键词：造血干细胞体外模型端粒端粒酶反转录-聚合酶链反应小鼠
- 造血干细胞衰老模型的建立及其评价被引量：1
- 2009年
- 造血干细胞衰老模型的建立是研究造血干细胞衰老机理与延缓其衰老的重要途径,目前可通过体内和体外两种途径实现。体内衰老模型可通过供体造血干细胞在受体内连续性移植建立,体外衰老模型可通过白消安、三丁基过氧化氢等致衰老药物和电离辐射等方法建立。造血干细胞衰老模型建立后,可通过其自我更新和多向分化能力检测、细胞周期分析、β-半乳糖苷酶染色等方法检测和评价造血干细胞的衰老变化,并应用Southern bloting,Western bloting,RT-PCR等方法检测造血干细胞衰老相关基因和蛋白变化。本文就造血干细胞衰老模型的建立以及评价方法综述如下。
- 杨斌周玥王亚平
- 关键词：造血干细胞细胞周期分析衰老相关基因衰老机理
- 人参皂苷Rg1促进人牙周膜干细胞增殖与成骨分化被引量：10
- 2013年
- 目的观察人参皂苷Rg1对体外培养的人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)增殖和成骨分化的影响。方法选取第3代PDLSCs,采用MTT法和细胞周期检测不同浓度(0.25、0.5、1、2、4μmol/L)人参皂苷Rg1对PDLSCs增殖的影响;采用碱性磷酸酶(ALP)活性、实时荧光定量RT-PCR和放免法检测人参皂苷Rg1对PDLSCs成骨分化的影响;采用ELISA方法检测人参皂苷Rg1对PDLSCs碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)表达的影响。结果与对照组比较,浓度为0.5、1、2μmol/L的人参皂苷Rg1能明显提高PDLSCs的增殖能力(P<0.05),其中浓度为1μmol/L的促增殖作用最强,S+G2/M期细胞百分率明显高于对照组(P<0.05);浓度为1μmol/L的人参皂苷Rg1组ALP活性、骨钙素(osteocalcin,OCN)和bFGF的表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论人参皂苷Rg1对体外培养的PDLSCs有促进增殖和成骨分化的作用。
- 王萍周玥王亚平屈晨
- 关键词：人参皂苷RG1牙周膜干细胞增殖成骨
- Sca-1^+造血干/祖细胞重建致死剂量辐射小鼠造血功能的作用被引量：10
- 2010年
- 背景:近年来,造血干细胞移植在国内外已广泛开展,移植的造血干细胞能否有效重建造血成为造血干细胞移植领域的研究热点问题之一。目的:观察Sca-1+造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cell,Sca-1+HSC/HPC)对造血衰竭小鼠造血功能重建的作用。方法:雌性C57BL/6受体鼠给予致死剂量60Coγ射线照射后分2组,对照组:输注无菌PBS;移植组:移植免疫磁性分选法分离纯化的同系雄性C57BL/6小鼠Sca-1+HSC/HPC;检测受体鼠生存时间;外周血白细胞、红细胞比容、血小板的变化;脾湿质量及脾集落数;PCR检测Y染色体(Sry基因)表达确定受体小鼠重建造血的细胞来源。结果与结论:移植组受体鼠30d存活率、白细胞、红细胞比容、血小板、脾湿质量及脾集落数均明显高于对照组(P<0.05);Y染色体PCR分析,证实雌性受体小鼠重建造血的细胞来源于雄性供体。提示Sca-1+HSC/HPC移植后能重建造血衰竭小鼠造血功能。
- 周玥杨斌姚欣王亚平
- 关键词：造血功能重建造血小鼠
- 造血干细胞体内衰老模型的建立及相关生物学研究
- 杨斌周玥姜蓉姚欣王亚平
- Motic显微数码互动系统在留学生组胚教学中的应用被引量：4
- 2015年
- 为探讨Motic显微数码互动平台在留学生组织学与胚胎学教学中的应用效果,利用Motic显微数码互动对留学生进行理论、实验同步教学,通过理论、实验考核及问卷调查的形式对教学效果进行评价。与传统教学组相比,Motic显微数码互动平台下留学生组织学与胚胎学教学实验、理论同步教学法能显著提高教学质量。
- 杨勇琴何颖红王慧杰赵文珍周玥
- 关键词：组织学与胚胎学教学方法留学生教育
- 超声微泡联合双特异性抗体对骨髓间充质干细胞干预心肌纤维化的实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）在超声辐照微泡（MB）和双特异抗体（BiAb）的辅助下干预心肌纤维化的效果及可能机制。方法在MB的辅助下，将雄性小鼠MsCs与BiAb输入异丙肾性心肌纤维化雌性小鼠（MSCs＋BiAb＋MB组）。BiAb由能识别间充质干细胞的anti—CD29和能特异性结合损伤心肌的抗肌凝蛋白轻链抗体（AMLcA）制备。另设未治疗组、单纯MSCs组、单纯BiAb组、单纯MB组、MSCs＋BiAb组和正常对照组。5周后处死小鼠，实时荧光定量PCR检测心肌Y染色体鉴别基因（SRY）的表达。天狼猩红染色对比心脏胶原纤维含量。免疫组织化学染色法观察心脏热休克蛋白-70（HSP-70）表达。结果MSCs归巢数最多的是MSCs＋BiAb＋MB组，其次为MSCs＋BiAb组，MSCs组归巢数最少。与未治疗组相比，MSCs＋BiAb＋MB组、MSCs＋BiAb组和单纯MCSs组的心肌胶原纤维含量下降（P〈0．05），HSP-70表达下调（P〈0．05）。其中，与单纯MSCs组相比，MSCs＋BiAb＋MB组的心肌胶原沉积量更低（P〈0．05）。单纯MB组、单纯BlAb组与未治疗组的胶原沉积量、HSP-70表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MB可促进骨髓间充质于细胞的归巢，联合BiAb，可进一步增加干细胞的归巢率和修复效果。MSCs归巢后能干预心肌纤维化，其机制可能与HSP-70的介导有关。
- 邓玮陈庆伟王志刚李兴升刘灏周玥李桂琼柯大智莫显刚
- 关键词：间质干细胞抗体双特异性心肌纤维化
- 人参皂苷Rg1延缓造血干细胞衰老过程中端粒长度和端粒酶活性的变化被引量：14
- 2011年
- 目的:探讨端粒长度和端粒酶活性在人参皂苷Rg1延缓造血干细胞(HSC)衰老中的作用。方法:免疫磁性分选法分离纯化小鼠Sca-1+HSC后分5组:对照组,衰老模型组,Rg1组,Rg1治疗衰老组,Rg1延缓衰老组。衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色、流式细胞术细胞周期测定和造血祖细胞混合集落(CFU-Mix)培养分析Rg1调控Sca-1+HSC衰老的生物学作用;Southern blotting与TRAP-PCR SYBR Green法检测端粒长度和端粒酶活性。结果:与衰老模型组相比,Rg1治疗组和Rg1延缓衰老组Sca-1+HSC的SA-β-Gal染色阳性细胞百分比降低,G1期细胞比例下降,生成CFU-Mix数相对增加,端粒长度缩短明显减少,端粒酶活性增强;Rg1延缓衰老组各检测指标变化均较Rg1治疗组明显。结论:Rg1可能通过激活端粒酶活性和减少端粒长度缩短发挥延缓和治疗Sca-1+HSC衰老的作用。
- 周玥姜蓉杨斌姚欣王萍刘典锋王亚平
- 关键词：人参皂苷RG1造血干细胞衰老端粒端粒酶
- 人参皂苷Rg1协同rhBMP-2对人牙髓干细胞成牙分化作用研究被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨不同浓度人参皂苷Rg1、重组骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)及两者联合应用对体外培养的人牙髓干细胞(DPSCs)成牙分化的影响。方法:酶消化法获得DPSCs,采用碱性磷酸酶(ALP)活性检测和实时荧光定量RT-PCR测定牙本质涎磷蛋白1(DSPP)和牙本质基质蛋白1(DMPl)mRNA的表达以检测不同浓度人参皂苷Rg1(0.1,0.5,2.5,5,10,20μmol/L)及rhBMP-2(25,50,100,200ng/ml)单独及联合应用对DP-SCs成牙分化的影响。结果:人参皂苷Rg1(2.5,5和10μmol/L)组的ALP活性明显高于同期对照组(P<0.001),5μmol/L组ALP活性明显高于其它浓度组(P<0.001);浓度为50,100,200ng/ml的rhBMP-2其ALP活性明显高于同期对照组(P<0.001),100ng/ml rhBMP-2组ALP活性最强。联合应用人参皂苷Rg1(5μmol/L)和rhBMP-2(100ng/ml)DSPP和DMP1 mRNA的表达明显高于单独应用组(P<0.001)。结论:人参皂苷Rg1可促进体外培养的DPSCs成牙本质分化,人参皂苷:Rg1协同rhBMP-2能明显增强DPSCs成牙本质分化。
- 王萍周玥王亚平
- 关键词：人参皂苷RG1骨形态发生蛋白2牙髓干细胞分化
- 当归多糖照射前后给药对放射损伤小鼠造血功能恢复的比较研究被引量：21
- 2010年
- 目的:研究和比较当归多糖(Adhesion molecule,APS)2种不同给药方式对放射损伤小鼠造血功能的修复作用。方法:外周血WBC、RBC、PLT及BMNC计数;流式细胞术检测APS对放射损伤小鼠Sca-1+BMNC粘附分子CD44和CD49d表达、BMNC细胞周期的影响;MTT法测定APS对放射损伤小鼠骨髓细胞增殖活性的影响。结果:与正常组比较,各NS组外周血WBC、RBC、PLT及BMNC计数明显减少,Sca-1+BMNCCD44、CD49d表达、骨髓细胞增殖活性明显下降,BMNCG0/G1期细胞比例显著增加。各APS预处理组能在更早期促进外周血各系和BMNC数目恢复、更早促进Sca-1+BMNC表面CD44和CD49d的表达下降使放射损伤小鼠造血功能较同时间点、同等剂量APS治疗组恢复快。各APS预处理组骨髓细胞增殖活性、BMNCG0/G1期细胞比例较同时间点、同等剂量APS治疗组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:APS对放射损伤小鼠造血功能具有修复作用,初步观察APS预处理组优于APS治疗组。
- 张雁吴宏关雪晶周玥
- 关键词：当归多糖粘附分子SCA-1CD49D
