吕静
- 作品数:4 被引量:1H指数:1
- 供职机构:中国药科大学更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一种基于壳聚糖载多肽纳米凝胶系统及其制备方法、应用
- 本发明本发明涉及纳米领域,提供了一种基于壳聚糖载多肽纳米凝胶系统及其制备方法、应用。所述壳聚糖纳米凝胶系统包括多肽、壳聚糖、羧甲基壳聚糖和三聚磷酸钠等。其中,多肽抗原荷载于所述壳聚糖纳米凝胶中,并且多肽和壳聚糖的用量质量...
- 蒋曙光郑伟玮吕静
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的可溶性表达及纯化条件的优化
- 2013年
- 以人胎盘cDNA为模板,通过PCR技术特异性扩增出约500bp的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的可溶性片段(Soluble TNF-related apoptosis-inducing ligand,sTRAIL)基因。经双酶切后插入到原核表达载体pTASH的Eco RⅠ和HindⅢ之间,转化大肠杆菌JM109菌株。宿主菌主要以可溶形式表达sTRAIL,可溶形式sTRAIL蛋白达到60%。采用两种方法纯化sTRAIL,比较两者对目的蛋白的影响。SDS-PAGE结果显示,破碎上清经过SP-Sepharose FF和RP-HPLC两步纯化后,纯化的蛋白为19kD单一条带,纯度达98%以上;而经过SP-Sepharose FF和Q-Sepharose FF两步纯化的蛋白,纯度只达到93%。Western blot鉴定表明纯化产物为sTRAIL。用HepG2细胞测定sTRAIL的生物学活性,发现重组蛋白在体外能明显诱导肿瘤细胞凋亡。
- 赵芳刘叶吕静代广知谭树华
- 关键词:STRAIL可溶性表达纯化MTT
- 大肠杆菌高效分泌表达新系统及其应用
- 本发明公开了一种新型大肠杆菌高效分泌表达载体及其制备方法与应用。该表达载体是一种环状质粒DNA载体,包含原核复制起始原点、筛选标记基因和两个串联的外源基因表达盒单元。所述的两个串联的外源目的(靶)基因表达盒单元均分别含有...
- 谭树华吴梧桐黄翠翠吕静
- 文献传递
- 大肠杆菌分泌表达重组水蛭素Ⅲ的新方法研究被引量:1
- 2011年
- 目的:在已有的分泌表达载体pTASH基础之上构建一种更为高效的新型大肠杆菌分泌表达载体,并检验其分泌表达水平是否提高。方法:提取原始质粒pTASH作为模板,用PCR扩增重组水蛭素基因表达盒片段以后,再插入到原表达载体pTASH的BamHⅠ位点上,从而产生含有两个串联的水蛭素基因表达盒单元的质粒p(TASH)2,转入大肠杆菌进行摇瓶表达。结果:双表达盒菌种p(TASH)2进行摇瓶水平的培养,其上清液抗凝血酶活性可达3 500 ATU.ml-1。结论:与单表达盒质粒pTASH的表达水平(2 000 ATU.ml-1)相比,双表达盒质粒p(TASH)2的摇瓶表达水平显著提高。
- 黄翠翠吕静吴梧桐谭树华王鑫
- 关键词:大肠杆菌分泌表达