- 抑肽酶间接竞争ELISA微量检测方法的建立被引量:3
- 2010年
- 将抑肽酶标准品和BSA交联后免疫新西兰大耳兔,辛酸-硫酸铵法从抗血清中纯化IgG抗体。用纯化的抗体和辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗羊抗兔IgG建立间接竞争ELISA法,用于抑肽酶基因工程菌的大规模快速筛选。该测定方法线性范围为20~500 ng/mL,灵敏度为2.554 ng/mL。建立的间接竞争ELISA法灵敏度高、特异性好,可用于抑肽酶基因工程菌构建过程中的大规模筛选。
- 解凤立徐彦宾黄翠翠何华吴梧桐谭树华
- 关键词:抑肽酶间接竞争ELISA多克隆抗体
- 重组水蛭素Ⅲ的表达纯化新工艺及产品质量控制研究
- 黄翠翠
- 关键词:分离纯化
- 大肠杆菌分泌表达重组水蛭素Ⅲ的新方法研究被引量:1
- 2011年
- 目的:在已有的分泌表达载体pTASH基础之上构建一种更为高效的新型大肠杆菌分泌表达载体,并检验其分泌表达水平是否提高。方法:提取原始质粒pTASH作为模板,用PCR扩增重组水蛭素基因表达盒片段以后,再插入到原表达载体pTASH的BamHⅠ位点上,从而产生含有两个串联的水蛭素基因表达盒单元的质粒p(TASH)2,转入大肠杆菌进行摇瓶表达。结果:双表达盒菌种p(TASH)2进行摇瓶水平的培养,其上清液抗凝血酶活性可达3 500 ATU.ml-1。结论:与单表达盒质粒pTASH的表达水平(2 000 ATU.ml-1)相比,双表达盒质粒p(TASH)2的摇瓶表达水平显著提高。
- 黄翠翠吕静吴梧桐谭树华王鑫
- 关键词:大肠杆菌分泌表达
- 大肠杆菌高效分泌表达新系统及其应用
- 本发明公开了一种新型大肠杆菌高效分泌表达载体及其制备方法与应用。该表达载体是一种环状质粒DNA载体,包含原核复制起始原点、筛选标记基因和两个串联的外源基因表达盒单元。所述的两个串联的外源目的(靶)基因表达盒单元均分别含有...
- 谭树华吴梧桐黄翠翠吕静
- 文献传递