何哲耘
- 作品数：5 被引量：15H指数：2
- 供职机构：温州医科大学检验医学院、生命科学学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 线粒体tRNA Thr T15943C突变可能是影响耳聋相关12s rRNA A1555G突变表型表达的新突变位点被引量：7
- 2015年
- 目的通过对一个中国汉族耳聋塞系进行分析研究，探索与耳聋相关的新的继发突变位点。方法对一个中国汉族耳聋家系进行临床和分子遗传学特征分析，然后建立永生化淋巴母细胞系，从细胞倍增时间和活性氧等部分功能实验方面进行验证。结果家系内听力下降的母系成员在听力损失程度和听力曲线方面存在差异。该家系耳聋外显率较高，包括药物致聋的耳聋外显率为66．7％，而非药物致聋的外显率为44．4％。对先证者及母系成员进行线粒体DNA全序列分析，发现除了12s rRNA A1555G和tRNA Thr T15943C突变位点外，其余33个均为已报道的多态性位点。进一步的单体型进化树分析发现，该家系属于东亚线粒体单体型F。15943位点位于tRNA Thr茎结构上，该位点发生T-C碱基变化时会破坏tRNAn Thr 二级结构上十分保守的T-A碱基对。细胞功能实验表明，与相同F单体型的正常对照组和仅携带12s rRNA A1555G单突变家系相比，该双突变耳聋家系永生细胞系的细胞倍增时间均较其他两个对照组延长，活性氧水平则增高。结论线粒体tRNA Thr T15943C突变可能作为潜在的修饰因子与12s rRNA A1555G突变相互作用，从而增强耳聋外显率和表现度。
- 肖红利何哲耘高应龙阳娅玲郑静蔡朝阳郑斌娇唐霄雯管敏鑫
- 关键词：耳聋突变
- 可诱导肿瘤靶向性IFN-α2a重组腺病毒的构建及其表达被引量：1
- 2012年
- 腺病毒载体广泛应用于恶性肿瘤的靶向性基因治疗的研究,但这些肿瘤靶向载体缺乏可控性,其疗效和安全性受到很大的影响,因此开发新型可诱导的生物肿瘤靶向载体是当今抗肿瘤靶向药物研究的当务之急。该研究构建了可诱导肿瘤靶向性IFN-α2a重组腺病毒。重组腺病毒能够有效感染人肝癌细胞株HepG2等多种肿瘤细胞株,RT-PCR和Western blot结果表明肿瘤细胞能高效表达IFN-α2a,而其非肿瘤细胞株L02几乎没有表达。诱导试验表明重组腺病毒Ad MT-Ⅱ-hTERT/IFN-α2a能被ZnSO4诱导表达。可诱导肿瘤靶向性重组腺病毒Ad MT-Ⅱ-hTERT/IFN-α2a成功构建为下一步体内外抑癌实验研究打下了基础。
- 李祥璩津生康帅何哲耘杨纪峰高基民
- 关键词：肿瘤靶向性腺病毒HTERT启动子
- 11个携带线粒体tRNA^(Ser(UCN)) G7444A突变的中国汉族非综合征型耳聋家系分析评估被引量：9
- 2014年
- 目的:通过对11个携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变的中国汉族非综合征型耳聋家系进行临床和分子遗传学特征等分析评估,探讨线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变在母系遗传非综合征型耳聋发生发展中的作用。方法:PCR扩增2 650例中国汉族非综合征型耳聋样本的线粒体12S rRNA、线粒体tRNASer(UCN)基因以及GJB2基因。对11个携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变的中国汉族非综合征型耳聋家系进行听力学检测、耳聋相关热点基因突变检测以及家系资料等综合分析。结果:在2 650例中国汉族非综合征型耳聋患者中,14例携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变,突变率为0.53%。在这11个携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变的家系中,同时携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变和线粒体12S rRNA A1555G、12S rRNA C1494T或GJB2c.235delC的家系分别为3、1和2个。临床资料分析表明,这11个中国汉族非综合征型耳聋家系母系成员在听力损失严重程度、发病年龄以及耳聋外显率方面存在较大差异。同时携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变和线粒体12S rRNA A1555G、C1494T或GJB2 c.235delC突变家系的耳聋平均外显率分别为29.4%、42.9%和19.0%。前两者的外显率明显高于只携带线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变家系的耳聋平均外显率(为14.0%)。结论:线粒体tRNASer(UCN)G7444A突变可能与线粒体12S rRNA A1555G和C1494T原发突变存在协同作用,共同影响非综合征型耳聋的表型。
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- 关键词：非综合征型耳聋线粒体12SRRNA
- 非综合征型耳聋相关线粒体12SrRNAA839G基因突变的功能研究
- 2014年
- 目的探讨非综合征型听力损失患者线粒体12srRNA上A839G基因突变对细胞功能的影响。方法根据临床表现、线粒体DNA全序列测序结果，寻找并确定含有线粒体12sr RNAA839G基因突变的先证者，并对其家系成员进行拓展筛查。采集确诊家系的外周静脉血标本，并将血液中的淋巴细胞转化为永生化类淋巴母细胞系，经过一段时间的培养后进行细胞倍增实验、药敏实验、细胞氧消耗率实验、线粒体膜电位测试和细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）检测等一系列反映细胞功能的相关实验。结果线粒体DNA全序列扩增检测确定含有线粒体12srRNAA839G基因突变的先证者和其家庭成员，进一步的种系发生学分析发现839位点的保守性指数高达78．6％。在RPMI．半乳糖培养基中，含有A839G基因突变的细胞株倍增时间明显长于对照组，差异具有统计学意义（P=0．033）；氨基糖苷类抗生素对含有A839G基因突变细胞株的影响并不明显；含有A839G基因突变的细胞株与对照组相比，细胞氧消耗率均降低，差异具有统计学意义（P=0．033）；与对照组相比，含有A839G基因突变的细胞株其ROS水平均出现较大幅度的升高，差异具有统计学意义（P〈0．01）；A839G基因突变细胞株中线粒体膜电位降低细胞群的数量明显多于对照组。结论线粒体12s rRNA A839G基因突变会对细胞内线粒体呼吸链的功能产生影响，突变细胞株的生长速率明显降低。A839G基因突变可能与非综合征型听力损失相关，是一种新的致病性突变。
- 余啸何哲耘项海杰郑静南奔宇郑斌娇高金建黄赛瑜管敏鑫陈波蓓
- 关键词：听力障碍线粒体RNA核糖体突变
- 非综合征型耳聋相关线粒体12SrRNA A839G基因突变的功能研究
- 目的:探讨线粒体12s r RNA上A839G基因突变与非综合征型听力损失的相关性。方法:根据临床表现、线粒体DNA全序列测序结果,寻找并确定含有线粒体12s r RNA A839G基因突变的先证者,并对其家系成员进行拓...
- 余啸何哲耘项海杰郑静南奔宇郑斌娇高金建黄赛瑜管敏鑫陈波蓓
- 关键词：非综合征型耳聋突变
- 文献传递
