仇保丰
- 作品数：29 被引量：110H指数：6
- 供职机构：南通出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：江苏检验检疫局科研项目国家科技支撑计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 应用16S rDNA克隆文库法分析B6-Co小鼠角膜炎细菌组成被引量：1
- 2014年
- 目的鉴定B6-Co突变系小鼠角膜的病原菌组成,并与人类细菌性角膜炎病原菌组成进行比较分析。方法选取10 d龄B6小鼠和B6-Co小鼠各6只为实验动物,提取小鼠角膜组织刮取物细菌基因组DNA,通过PCR扩增构建16S rDNA克隆文库,采用随机测序法分析B6-Co小鼠角膜细菌组成,B6小鼠作为对照。结果 B6-Co角膜混浊小鼠中共鉴定出20种细菌,隶属于15个属,包括葡萄球菌属、假单胞菌属、链球菌属、微球菌属、棒状杆菌属等。葡萄球菌属和假单胞菌属为优势群,葡萄球菌属丰度为19.7%~53.1%,假单胞菌属的丰度为17.4%~32.8%。其中葡萄球菌属主要是表皮葡萄球菌,丰度为13.8%~20.9%;缓慢葡萄球菌,丰度为14.0%~30.9%;金黄色葡萄球菌,丰度为7.4%~20.3%。此外,棒状杆菌和微球菌也比较常见。10 d龄B6小鼠未检测出细菌。结论 B6-Co突变系小鼠角膜细菌组成与人类角膜炎病原菌相似,是研究人类角膜炎诊断方法、发病机理及临床用药的很好的动物模型。
- 宋鸿雁仇保丰刘春朱顺星缪进王生存吴刘成王旭邵义祥
- 关键词：细菌性角膜炎
- 关于打造江苏口岸进境活动物隔离检疫基地的设想
- 2012年
- 近年来,江苏口岸隔离检疫进境活动物的数量出现了急剧增长的态势,本文从打造江苏口岸进境活动物基地的必要性、有利条件和下一步工作的方向几个方面来论述:抓住"十二五"和2014年"青奥会"在南京举行这个机遇,积极打造江苏进境活动物隔离检疫基地的设想,为牢筑"国门生物安全保障体系",圆满完成江苏检验检疫局提出的"打造‘五区’铸强局"等战略目标创造条件。
- 仇保丰高逢结刘文斌顾炳泉李建
- 国产和进口冷冻原肠中奇异变形杆菌的监测与分析被引量：1
- 2016年
- 目的研究国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况。方法本研究对2014-2016年采集的40份冷冻原肠样品进行检测,其中包括16份国产猪原肠和24份进口羊原肠。经过奇异变形杆菌的分离、表型特征鉴定和16SrDNA鉴定,同时收集GenBank中不同地域和宿主动物的奇异变形杆菌,以及其他重要食源性致病菌的16SrDNA序列,结合本研究测定序列共同进行比对分析。结果 40份样品中有10份样品为PM检测阳性,总的PM检测阳性率为25.00%,其中,国产冷冻猪原肠的PM检测阳性率为31.25%,澳大利亚和新西兰进口冷冻羊原肠的PM检测阳性率分别为27.27%和15.38%,另外,发现不同原肠PM分离株之间的16SrDNA同源性差异较大,且同源性的高低和PM菌株的分离地域及宿主动物均未呈现明显的关联性。结论国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况比较严重,相关管理和研究应进一步加强。
- 仇保丰宋鸿雁董蓉莲蒋荧梅高雪梅刘文斌胡顺林
- 关键词：奇异变形杆菌
- 柔嫩艾美耳球虫江苏株SAG10基因的克隆及分析
- 2017年
- 根据Gen Bank中已发表的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)SAG10基因序列,利用计算机软件设计1对引物,从E.tenella江苏株的第2代裂殖子中成功克隆出SAG10基因。将该基因与Gen Bank中国内外不同E.tenella分离株的SAG10基因进行比对,发现E.tenella江苏株与北京株的SAG10基因同源性最高,高达99%,其后依次为杨凌株、豪顿株。4种不同分离株SAG10基因的ORF之间有11个碱基不同,其中3个为无义突变,8个为有义突变。分析4种分离株SAG10基因推导蛋白质的亲水性、抗原指数、表面可及性发现,国内外不同E.tenella分离株SAG10蛋白的抗原性总体比较接近且很强,但国内不同分离株之间的抗原性更加接近,并优于国外的豪顿株,这可能是由于氨基酸突变引起蛋白质的空间构象和亲水性等发生变化而引起。将上述SAG10基因序列与复顶门原虫的其他相关SAGs基因序列进行遗传进化分析,发现Eimeria属球虫SAGs基因之间相对比较保守,且与犬新孢子虫(Neospora caninum)、N.hughesi、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)的SAG基因之间同源性较低,与已有观点一致;但神经肉孢子虫(Sarcocystis neurona)的2条SAG1基因序列却与E.tenella的SAG1基因序列表现出更高的同源性,这与其他研究结论不符。
- 仇保丰景瑾董蓉莲宋鸿雁刘春朱顺星邵义祥刘文斌李建
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫克隆
- 冷冻原肠浸泡解冻池水细菌多样性分析被引量：2
- 2017年
- 为了研究冷冻原肠浸泡解冻池水的细菌多样性,采集3份水样直接提取细菌基因组总DNA,再分别用PCR技术扩增出细菌16S rDNA并构建基因文库,经PCR鉴定后从3个文库中分别随机挑取50个阳性克隆进行DNA序列测定。分别对3个文库的测序结果进行分析发现,除去24.00%~32.00%为无法鉴定的未培养细菌和未分类细菌以外,其余细菌来自于芽胞杆菌纲、γ-变形菌纲、放线菌纲和黄杆菌纲,分别占各文库克隆总数的38.00%~42.00%、20.00%~26.00%、4.00%~8.00%和0~2.00%。除去44株无法鉴定的细菌,进一步对其他106株细菌进行分析发现,其中2株放线菌目细菌和5株肠杆菌科细菌无法进一步鉴定,其余99个菌株包含了来自19个属的至少30种细菌,且肠球菌属、变形杆菌属和芽胞杆菌属为其中的优势菌属。本研究显示冷冻原肠浸泡解冻池水中细菌多样性较高,其中部分细菌为致病菌和条件致病菌。
- 仇保丰宋鸿雁董蓉莲高雪梅蒋荧梅顾炳泉胡顺林
- 关键词：细菌多样性
- 华东地区清洁级大、小鼠中ECTV、MHV和SV的检测被引量：2
- 2016年
- 为了研究华东地区清洁级实验鼠中鼠痘病毒(ECTV)、小鼠肝炎病毒(MHV)和仙台病毒(SV)感染症的流行情况,从华东地区4个主要实验动物供应基地分别购入ICR和(或)C57BL/6小鼠各30只,SD或Wistar大鼠各15只。采用摘眼球法采集血样和分离血清后,用进口商品化ELISA试剂盒分别检测小鼠的ECTV、MHV和SV的血清抗体。大鼠因为一般不易感染MHV和SV,因此只检测ECTV血清抗体。调查结果显示,在华东地区4个主要实验动物供应基地中,有3个基地的清洁级实验大、小鼠的检测结果均为阴性,但在另1个基地的清洁级ICR小鼠中,MHV和SV的血清抗体阳性率分别为56.7%和100%,C57BL/6小鼠的MHV血清抗体阳性率为100%。研究结果表明,华东地区实验动物供应基地大部分商品化的实验大、小鼠中,上述3种疫病的检测质量合格,但在个别基地中MHV和SV依然存在,且感染情况比较严重,应该积极采取措施加强管理,净化鼠群,同时认真开展鼠病的监测工作,保证实验用鼠的质量,以免对实验用鼠的繁育和使用带来不利影响。
- 宋鸿雁董蓉莲仇保丰景瑾顾炳泉邵义祥刘春朱顺星吴刘成
- 关键词：小鼠流行病学调查
- 斯氏艾美耳球虫热休克蛋白70基因的克隆及表达分析被引量：4
- 2017年
- 为了获得斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)的热休克蛋白70(HSP70)的全基因序列,并诱导表达重组HSP70蛋白,试验根据免疫蛋白组学研究的质谱结果获得的部分氨基酸序列和已发布近源物种HSP70蛋白序列设计引物,通过c DNA末端快速扩增法(RACE)获得E.stiedai HSP70的全基因序列,将其连入原核表达载体p ET-28a(+),转化Competent Rosetta2(DE3)p Lys S,通过IPTG诱导表达重组HSP70蛋白,并进行Western-blot分析。结果表明:HSP70序列全长为2 727 bp,最大ORF为2 010 bp。HSP70在诱导后37℃培养4 h条件下有表达,但全部为不溶性表达;在诱导后20℃过夜培养条件下无表达。说明试验成功获得E.stiedai HSP70的全基因序列以及重组HSP70蛋白。
- 景瑾张帅仇保丰董蓉莲蒋荧梅朱顺星田颖超刘春吴刘成宋鸿雁邵义祥
- 关键词：斯氏艾美耳球虫克隆原核表达重组蛋白
- 华东地区家鸭中N1亚型禽流感病毒NA基因的遗传进化分析被引量：1
- 2009年
- 为了解华东地区家鸭内禽流感病毒的遗传进化情况,对2002-2006年分离自华东地区家鸭的3种主要N1亚型的禽流感病毒：2株H1N1、10株H3N1和14株H5N1,共26株病毒的NA基因进行了遗传进化分析。结果表明,华东地区家鸭中的N1亚型的禽流感病毒正处于不断进化状态中。14株H5N1禽流感病毒均在NA的茎部缺失20个氨基酸（49-68位）,而其他N1亚型的禽流感病毒的NA都未见发生此缺失。H3N1病毒可能与H1N1病毒发生了NA基因的重排,但是目前还没有直接证据表明华东地区家鸭中H5N1禽流感参与了基因重排。
- 仇保丰刘武杰唐应华彭大新刘秀梵
- 关键词：家鸭禽流感病毒NA基因遗传进化分析
- 应用16S rDNA克隆文库法分析B6-Co小鼠角膜炎细菌组成
- 目的：鉴定B6-Co突变系小鼠角膜的病原菌组成,与人类细菌性角膜炎病原菌组成比较分析.
方法：选取C57BL/6(B6)小鼠和C57BL/6-Corneal opacity(B6-Co)小鼠为实验动物,采用16...
- 宋鸿雁仇保丰刘春朱顺星缪进王生存吴刘成王旭邵义祥
- 关键词：细菌性角膜炎病原菌基因克隆
- 文献传递
- 进口南美白对虾种虾的检疫程序和注意事项
- 2016年
- 我国是南美白对虾养殖第一大国，但种虾高度依赖进口，进口种虾存在可能携带疫病的风险，一旦疫病随进口种虾传入我国将会对养殖业带来不可估量的损失，为此国家出入境检验检疫部门制定了一系列进口种虾检疫程序，如隔离场许可、检疫审批、报检和现场检疫、隔离检疫等，以将进口种虾疫病风险降到最低。本文主要介绍种虾进口的检疫程序和需要注意的问题，供广大进口种虾企业参考。
- 刘文斌仇保丰高雪梅
- 关键词：南美白对虾检疫程序种虾检验检疫部门检疫审批现场检疫
