宋鸿雁
- 作品数:41 被引量:127H指数:6
- 供职机构:南京农业大学更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏检验检疫局科研项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 斯氏艾美耳球虫热休克蛋白70基因的克隆及表达分析被引量:4
- 2017年
- 为了获得斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)的热休克蛋白70(HSP70)的全基因序列,并诱导表达重组HSP70蛋白,试验根据免疫蛋白组学研究的质谱结果获得的部分氨基酸序列和已发布近源物种HSP70蛋白序列设计引物,通过c DNA末端快速扩增法(RACE)获得E.stiedai HSP70的全基因序列,将其连入原核表达载体p ET-28a(+),转化Competent Rosetta2(DE3)p Lys S,通过IPTG诱导表达重组HSP70蛋白,并进行Western-blot分析。结果表明:HSP70序列全长为2 727 bp,最大ORF为2 010 bp。HSP70在诱导后37℃培养4 h条件下有表达,但全部为不溶性表达;在诱导后20℃过夜培养条件下无表达。说明试验成功获得E.stiedai HSP70的全基因序列以及重组HSP70蛋白。
- 景瑾张帅仇保丰董蓉莲蒋荧梅朱顺星田颖超刘春吴刘成宋鸿雁邵义祥
- 关键词:斯氏艾美耳球虫克隆原核表达重组蛋白
- 鸡球虫DNA疫苗研究进展
- 鸡球虫病是严重危害养禽业的一种寄生虫病。一直以来,鸡球虫病主要依靠药物来进行防制。但是,随着球虫抗药性问题的日益严重、抗球虫新药开发困难及人们对食品安全的关注,药物在球虫病控制中的作用越来越受到限制,因而人们期望用更好的...
- 李学钊宋鸿雁车清明李祥瑞
- 关键词:DNA疫苗鸡球虫病寄生虫病免疫佐剂免疫剂量
- 普通级与SPF级新西兰兔肝脏、十二指肠病理、超微结构及肝功能的比较研究
- 2014年
- 为了研究普通级与SPF级新西兰兔肝脏及肠道病理、超微结构和肝功能的变化差异,从而为正确选择、应用实验兔开展相关科学试验提供参考依据,试验分别选择6只普通级与SPF级新西兰白兔,采集粪便经饱和盐水漂浮法检查是否感染兔球虫;采血测定肝功能生化指标;解剖兔取部分肝脏和十二指肠,制作切片后进行H.E.染色,观察病理变化和超微结构。结果表明:在病理及超微结构比较上,普通级兔肝脏、十二指肠均出现明显的变化,主要表现在普通级兔肝脏、十二指肠表面与实质出现大小、数量不一的球虫结节,结节病灶有大量兔球虫卵囊,侵入周围组织、细胞,进而影响肝脏、十二指肠正常的病理结构与超微结构。与SPF级兔相比,普通级兔肝功能相关的5项指标中有3项出现显著差异,2项出现极显著差异。说明普通级兔肝脏正常的机理功能受到影响,提示有条件时应选用微生物控制等级更高的SPF级兔开展相关科学实验。
- 王胜洁吴刘成宋鸿雁刘春邵义祥
- 关键词:新西兰兔肝脏十二指肠超微结构肝功能
- 不同胚期B6-Co小鼠眼睑组织中血清反应因子的表达变化
- 2015年
- 背景 C57BL/6角膜混浊表型的突变系(B6-Co)小鼠具有出生眼睑闭合不全(EOB)表型,是研究眼睑发育机制的良好动物模型.探讨血清反应因子(SRF)与B6-Co小鼠EOB表型形成的关系可为人类先天性眼睑发育缺陷产生机制的研究提供理论依据.目的 检测SRF在B6-Co小鼠胚胎眼睑发育关键时期的表达.方法 采用肌内注射戊巴比妥钠安乐死术,分别剖取B6-Co母鼠以及表型正常B6母鼠体内胚胎期(E)16.5 d、E17.5 d和E18.5 d小鼠各9只,分离眼睑组织,分别采用实时定量PCR法和Western blot法检测小鼠眼睑组织中SRF mRNA及其蛋白的相对表达水平.取各胎龄的B6-Co小鼠和B6小鼠制作组织冰冻切片,利用免疫荧光技术检测并比较2种小鼠SRF在眼睑组织中的定位和表达强度.结果 B6-Co小鼠E16.5 d和E17.5 d眼睑组织中SRF mRNA的相对表达水平分别为0.41±0.06和0.24±0.17,明显低于B6小鼠的1.03±0.17和1.01±0.09,差异均有统计学意义(P=0.025、0.017);B6-Co小鼠E16.5 d和E17.5 d眼睑组织中SRF蛋白的表达水平分别为0.08±0.01和0.08±0.01,明显低于B6小鼠的0.12±0.03和0.13 ±0.02,差异均有统计学意义(P=0.036、0.024);而2种小鼠间E18.5 d时眼睑组织中SRF mRNA及其蛋白的表达量差异均无统计学意义(P=0.387、0.774).免疫荧光染色显示,SRF蛋白多表达于B6-Co小鼠和B6小鼠眼睑组织的角质层细胞,但B6-Co小鼠眼睑角质形成细胞中SRF蛋白表达的荧光强度明显弱于B6小鼠.结论 SRF在B6-Co小鼠眼睑组织中的表达量明显下调,SRF可能参与眼睑发育缺陷的发生过程.
- 宋鸿雁李瑶卢泽艳吴刘成邵义祥
- 关键词:角质形成细胞表型
- 预防鸡堆型艾美耳球虫的免疫调节型DNA疫苗
- 本发明涉及一种鸡堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)免疫调节型DNA疫苗,属于生物兽药技术领域。利用分子生物学技术将堆型艾美耳球虫第一代裂殖体抗原乳酸脱氢酶的基因(lactate dehydrogena...
- 李祥瑞徐立新宋小凯严若峰宋鸿雁
- 文献传递
- 预防鸡巨型艾美耳球虫的免疫调节型DNA疫苗
- 本发明涉及一种鸡巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)DNA疫苗,属于生物兽药技术领域。利用分子生物学技术克隆出了鸡巨型艾美耳球虫子孢子阶段抗原EmTFP250的一个基因片段Em8,该片段具有较高的抗原指数和集中...
- 李祥瑞宋小凯严若峰徐立新雷晨昱宋鸿雁
- 文献传递
- 国产和进口冷冻原肠中奇异变形杆菌的监测与分析被引量:1
- 2016年
- 目的研究国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况。方法本研究对2014-2016年采集的40份冷冻原肠样品进行检测,其中包括16份国产猪原肠和24份进口羊原肠。经过奇异变形杆菌的分离、表型特征鉴定和16SrDNA鉴定,同时收集GenBank中不同地域和宿主动物的奇异变形杆菌,以及其他重要食源性致病菌的16SrDNA序列,结合本研究测定序列共同进行比对分析。结果 40份样品中有10份样品为PM检测阳性,总的PM检测阳性率为25.00%,其中,国产冷冻猪原肠的PM检测阳性率为31.25%,澳大利亚和新西兰进口冷冻羊原肠的PM检测阳性率分别为27.27%和15.38%,另外,发现不同原肠PM分离株之间的16SrDNA同源性差异较大,且同源性的高低和PM菌株的分离地域及宿主动物均未呈现明显的关联性。结论国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况比较严重,相关管理和研究应进一步加强。
- 仇保丰宋鸿雁董蓉莲蒋荧梅高雪梅刘文斌胡顺林
- 关键词:奇异变形杆菌
- 堆型艾美耳球虫乳酸脱氢酶基因的克隆与表达
- 克隆了堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)乳酸脱氢酶(LDH)基因(EaLDH),并在大肠杆菌中成功表达出重组蛋白。根据GenBank中收录的EaLDH核苷酸序列设计特异性引物,以其第一代裂殖体总RNA...
- 宋鸿雁严若峰徐立新宋小凯李祥瑞
- 文献传递
- 柔嫩艾美耳球虫江苏株SAG10基因的克隆及分析
- 2017年
- 根据Gen Bank中已发表的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)SAG10基因序列,利用计算机软件设计1对引物,从E.tenella江苏株的第2代裂殖子中成功克隆出SAG10基因。将该基因与Gen Bank中国内外不同E.tenella分离株的SAG10基因进行比对,发现E.tenella江苏株与北京株的SAG10基因同源性最高,高达99%,其后依次为杨凌株、豪顿株。4种不同分离株SAG10基因的ORF之间有11个碱基不同,其中3个为无义突变,8个为有义突变。分析4种分离株SAG10基因推导蛋白质的亲水性、抗原指数、表面可及性发现,国内外不同E.tenella分离株SAG10蛋白的抗原性总体比较接近且很强,但国内不同分离株之间的抗原性更加接近,并优于国外的豪顿株,这可能是由于氨基酸突变引起蛋白质的空间构象和亲水性等发生变化而引起。将上述SAG10基因序列与复顶门原虫的其他相关SAGs基因序列进行遗传进化分析,发现Eimeria属球虫SAGs基因之间相对比较保守,且与犬新孢子虫(Neospora caninum)、N.hughesi、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)的SAG基因之间同源性较低,与已有观点一致;但神经肉孢子虫(Sarcocystis neurona)的2条SAG1基因序列却与E.tenella的SAG1基因序列表现出更高的同源性,这与其他研究结论不符。
- 仇保丰景瑾董蓉莲宋鸿雁刘春朱顺星邵义祥刘文斌李建
- 关键词:柔嫩艾美耳球虫克隆
- 免疫调节剂研究现状及其作用机理被引量:14
- 2014年
- 本文从免疫调节剂的概念出发,综述了生物性免疫调节剂、天然源免疫调节剂、细胞因子免疫调节剂、细菌性免疫调节剂、化学性免疫调节剂、营养性免疫调节剂及其它免疫调节剂,并就各类免疫调节剂的作用机理与临床应用做了详尽论述。
- 李学钊洪炀王治仓李祥瑞宋鸿雁
- 关键词:免疫调节剂免疫功能低下