陶绍玉
- 作品数:9 被引量:24H指数:3
- 供职机构:东南大学附属中大医院更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 心脏转录因子GATA结合蛋白4真核表达质粒的构建被引量:5
- 2010年
- 背景:有研究表明心脏转录因子GATA结合蛋白4(GATA4)与先天性心脏病的发生有密切的关系,但其机制不明,而目前尚未查及GATA4真核表达质粒构建类的报道。目的:构建人类心脏特殊转录因子GATA4的真核表达质粒。方法:对重组质粒pUC57-GATA4进行酶切获得GATA4基因编码区序列,将真核表达载体pCMV-Myc和GATA4基因在双酶切后用T4连接酶连接,构建重组质粒pCMV-Myc-GATA4,转化至大肠杆菌,提取质粒后经聚合酶链反应、双酶切及测序鉴定。结果与结论:实验成功酶切重组质粒获得GATA4基因编码区约1.3kb的目的片段,聚合酶链反应和酶切鉴定以及基因测序结果显示,构建的重组真核表达质粒中含有正确的GATA4基因序列,证实成功构建了含有GATA4基因的真核表达重组质粒。
- 丁建东方翔陶绍玉任利群张晓黎姚玉宇马根山
- 关键词:转录因子GATA4重组质粒真核表达载体
- 转录因子GATA4与先天性心脏病的关系
- 先天性心脏病(以下称先心病)是一类严重危害婴幼儿健康的先天畸形。心脏发育过程中控制发育的基因突变是先心病的常见原因。大量研究表明GATA4作为与发育相关的基因的一种,在心脏发育过程中起重要的作用,该基因的突变或多态性将影...
- 陶绍玉
- 关键词:先天性心脏病基因突变心脏发育GATA4基因
- 文献传递
- 转录因子GATA4与先天性心脏病的关系
- 先天性心脏病(CHD)是一种最常见的出生缺陷,是严重危害婴幼儿健康的先天畸形,在新生儿非感染性死亡中占首位。心脏发育是胚胎发育中一个极其复杂的事件,它涉及不同时间、不同空间若干基因的先后表达以及这些基因间复杂而精确的相互...
- 陶绍玉
- 关键词:转录因子先天性心脏病心脏发育基因调控GATA4
- 文献传递
- 转录因子Nkx2.5和GATA4的相互作用被引量:9
- 2012年
- 背景:心脏发育过程是复杂多种因子相互作用的结果,对转录因子Nkx2.5和GATA4在心脏发育过程中相互作用的研究将有助进一步了解心脏发育过程。目的:分析心脏转录因子Nkx2.5和GATA4在细胞内的相互作用。方法:在构建Nkx2.5和GATA4真核表达质粒以及脑钠肽启动子荧光表达质粒的基础上,将真核表达质粒经共转染或单转染COS7细胞,利用免疫共沉淀技术验证Nkx2.5和GATA4在细胞内是否有相互作用,并通过荧光素酶分析技术分析Nkx2.5和GATA4对脑钠肽启动子序列可能存在的协同激活作用。结果与结论:通过免疫共沉淀实验发现GATA4能将Nkx2.5沉淀下来,相应的Nkx2.5也能将GATA4沉淀下来,说明在COS7细胞中,GATA4能和Nkx2.5相互作用。脑钠肽启动子荧光表达质粒并与Nkx2.5和GATA4共转染COS7细胞,比起单转染Nkx2.5或GATA4质粒,两者共转染更能激活脑钠肽启动子的表达。Nkx2.5和GATA4不仅各自在心脏发育过程中发挥重要作用,两者之间的相互协调作用对于心脏的正常发育过程同样非常重要。
- 丁建东方翔李开如姚玉宇陶绍玉王点马根山
- 关键词:转录因子NKX2.5GATA4脑钠肽先天性心脏病
- 转录因子Nkx2.5和GATA4相互作用的研究
- 丁建东方翔李开如姚玉宇陶绍玉王点马根山
- 转录因子Nkx2.5和GATA4相互作用的研究
- 丁建东方翔李开如姚玉宇陶绍玉王点马根山
- NKX2.5及GATA4基因在先天性心脏病中表达的研究
- 目的:通过分析先天性心脏病(Congenital Heart Disease,CHD)患者心肌组织中NKX2.5、GATA4基因的表达变化,从基因转录水平上初步探讨NKX2.5、GATA4基因与国人先天性心脏病发病之间的...
- 陶绍玉
- 关键词:先天性心脏病心肌组织基因转录水平
- 文献传递
- 转录因子Nkx2.5基因突变与先天性心脏病相关性的初步研究被引量:11
- 2009年
- 目的初步探讨转录因子Nkx2.5的基因突变与中国先天性心脏病发生之间的关系。方法采用聚合酶链反应结合DNA测序技术,对99例中国散发先天性心脏病患者及90名正常人的Nkx2.5基因的外显子1进行序列检测,分析Nkx2.5基因突变是否与先天性心脏病的发生有关。结果在Nkx2.5基因外显子1中,3例室间隔缺损、7例房间隔缺损、1例肺动脉瓣狭窄、1例动脉导管未闭患者和3名正常人第239位发生了A—G的突变等位基因频率在先天性心脏病患者与正常人之间差异有统计学意义(P=0.031)。结论Nkx2.5基因外显子1基因突变与中国先天性心脏病的发生之间存在一定的相关性。
- 丁建东李开如张晓黎姚玉宇任利群陶绍玉方翔马根山
- 关键词:NKX2.5基因基因突变
- 心脏转录因子Nkx2.5真核表达质粒的构建被引量:2
- 2010年
- 目的构建人类心脏特殊转录因子Nkx2.5的真核表达质粒,为进一步探讨Nkx2.5在心脏发育及先天性心脏病发病过程中的作用奠定基础。方法以质粒pCMV6-XL5-Nkx2.5为模板,并设计上下游引物扩增Nkx2.5编码区序列,将真核表达载体pCMV-HA和Nkx2.5的PCR产物分别在双酶切后用T4连接酶连接,构建重组质粒pCMV-HA-Nkx2.5,转化至大肠杆菌,提取质粒后经PCR、双酶切及测序鉴定。结果成功设计引物扩增出Nkx2.5基因编码区约1 000 bp的目的片段,PCR和酶切鉴定结果显示,构建的重组真核表达质粒中含有正确的Nkx2.5基因序列。结论成功构建了含有Nkx2.5的真核表达重组质粒,为后续研究奠定基础。
- 方翔丁建东李开如姚玉宇陶绍玉王点马根山
- 关键词:转录因子NKX2.5重组质粒真核表达载体