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人胃癌裸鼠原位移植瘤模型的建立及其活体荧光成像检测被引量：5: 2016年; 目的:建立可动态实时监测的人胃癌裸鼠原位移植瘤模型。方法:将稳定表达荧光素酶的人胃癌细胞SGC-7901^(fLuc+)注入裸鼠后肢根部皮下形成皮下移植瘤。待皮下移植瘤瘤块长至直径0.5 cm时,剥取肿瘤组织,应用叠合法将瘤块原位移植于裸鼠胃小弯处,形成原位移植瘤模型。利用小动物活体荧光成像系统,每4日监测移植瘤的进展情况。荷瘤3周后,解剖荧光成像阳性小鼠,利用H-E染色、光镜下观察移植瘤的形态。结果:应用小动物活体荧光成像系统,可在荷瘤裸鼠胃部检测到逐渐增强的荧光信号。荷瘤裸鼠胃部存在肿瘤包块贴附于胃壁,包块直径为0.5~1.0 cm,包块周围与相邻组织器官边界清晰,未见粘连,检查腹腔未见转移,未见腹水形成。应用叠合法构建人胃癌裸鼠原位移植瘤模型成功率为95%(19/20)。对荷瘤胃组织H-E染色后,可见异常肿瘤细胞,肿瘤包膜完整,符合胃癌组织学特征。结论:成功建立了操作简便、成瘤率高的可动态监测的人胃癌裸鼠原位移植瘤模型,为研究胃癌发生机制、研发抗癌药物提供了理想的实验工具。; 曹钟元赵振凯相庚倪清蓉才延辉席宇菁赵晶阎博; 关键词：SGC-7901细胞株

融合IL2的慢病毒实现对T细胞的高效基因转导: 2022年; 目的制备融合IL2的慢病毒以提高对人原代T淋巴细胞的转导效率。方法将白细胞介素-2(IL2)基因定向克隆至水疱性口炎病毒G蛋白(VSV-G)编码基因5′端,构建新型慢病毒包装辅助质粒pMD2.IL2-G。使用不同剂量pMD2.IL2-G进行慢病毒包装,应用免疫印迹和ELISA比较病毒滴度,流式细胞术检测病毒对T细胞的转导效率。结果单独使用pMD2.IL2-G显著降低病毒得率。与传统慢病毒相比,pMD2.IL2-G与原始辅助质粒pMD2.G以1∶4混合制备的慢病毒,能够显著提高EGFP基因导入T细胞的效率(89.2%vs.40.2%),且病毒得率相当。结论融合IL2的慢病毒能够对T细胞进行高效的基因转导,为基因修饰T细胞的临床应用提供有力支持。; 王依依杜晓胡志嵩刘欣禹欧阳清赵晶杨安钢阎博; 关键词：T细胞包膜蛋白过继免疫疗法

人源抗HER2单链抗体／鱼精蛋白截短体融合蛋白的表达、纯化及鉴定: 2012年; 在人类乳腺癌组织中人类表皮生长因子受体2（HER2）和受体趋化因子4（CXCR4）的表达成正相关，由于HER2与CXCR4／CXCL-12轴在乳腺癌骨转移中的重要作用，使其成为可供选择的肿瘤治疗靶点。本研究将HER2单链抗体（ScFv）与鱼精蛋白截短体（tP）融合，以期获得同时具有抗原与核酸结合活性的ScFv-tP融合蛋白，核酸与该融合蛋白结合后，有望实现小分子干扰RNA（siRNA）的靶向递送，对HER2与CXCR4／CXCL-12轴进行RNA干扰（RNAi），为新型抗肿瘤药物应用于临床提供资料。; 姜扩陈锐阎博蔡承魁贠喆王芳杨安钢裘秀春; 关键词：融合蛋白鱼精蛋白单链抗体人类表皮生长因子受体 CXCR4 RNA干扰

医学生物化学与分子生物学实验教学方式的改进被引量：2: 2013年; 医学生物化学与分子生物学实验课是衔接理论知识与实际临床应用、科学研究的纽带。传统灌输式的实验课教学形式导致学生吃现成饭、不动脑筋。针对这一弊端,摸索改进了一套新教学方法,通过引导学生自主设计实验方案,允许学生犯错误、找错误、改错误,大大激发了学生的学习兴趣,明显改善了实验课教学效果。; 阎博赵晶; 关键词：医学生物化学分子生物学实验教学教学方式

应用分子伴侣探索e23sFv/His融合蛋白的可溶性表达被引量：2: 2015年; 目的探讨利用分子伴侣实现e23sFv/His融合蛋白可溶性表达的可行性。方法将分子伴侣质粒pGro7、pKJE7与e23sFv原核表达载体共转化BL21(DE3)感受态细胞。16℃诱导融合蛋白可溶性表达,比较可溶性表达产物相对于常规包涵体不溶形式表达产物在产量和抗原结合活性方面的差异。结果可溶性表达的e23sFv/His产量较小,纯化得率低,其抗原结合活性没有明显优于包涵体表达纯化产物。结论应用pGro7、pKJE7有助于e23sFv/His融合蛋白的可溶性表达,但其表达和纯化得率较低。; 常镜欧阳清杜晓杨安钢赵晶阎博; 关键词：可溶性表达分子伴侣

生物化学教学中的想象力被引量：2: 2017年; 目的探讨发挥想象力调动形象思维在生物化学教学中的应用。方法尝试将丰富的想象力运用于课堂教学,以物质代谢章节教学为例,从三个层次改善教学效果。结果想象力的发挥调动了形象思维,既能够使生化概念的理解更为生动形象,也可以使复杂的代谢过程归纳起来更为简便直观,还可以加深对整个物质代谢网络内在规律的逻辑整合。结论充分发挥想象力可以使生化知识变得生动有趣,大大激发了学生的学习兴趣,提高了教学质量。; 阎博赵晶; 关键词：生物化学课堂教学想象力教学方法

用于筛选shRNA的新型双萤光素酶报告基因载体的构建及应用被引量：2: 2017年; 目的:构建一个新型双萤光素酶报告基因载体用于准确高效地筛选有效抑制靶基因表达的shRNA。方法:采用PCR、定向克隆、基因重组等分子生物学方法,将双萤光素酶报告基因系统中需要的报告基因载体、shRNA真核表达载体和内参载体三个功能,整合于一个新型的双萤光素酶报告基因载体pFLuc-C-TK-RLuc-shRNA之中。应用该载体对靶向人PD1基因以及Furin基因的shRNA进行干涉效果比较。结果:应用p FLuc-C-TK-RLuc-shRNA载体进行单质粒转染方法与传统的三质粒转染方法均提示shRNA#1对靶基因PD1的抑制效果最优;但是使用新型双萤光素酶报告基因载体检测结果的标准差数值显著低于传统方法。以pFLuc-C-TK-RLuc-shRNA单质粒转染方法得到的各组样品结果的均一性显著提高,能够准确地反映出shRNA#3较shRNA#2具有更强的Furin基因抑制作用;而传统方法未能有效判断二者的差异。结论:新型双萤光素酶报告基因载体简化了操作步骤,降低了传统三质粒共转染方法所引起的检测结果大幅波动,进一步增强了双萤光素酶报告基因系统的信噪比,提高了筛选抑制靶基因表达shRNA的准确性。; 胡志嵩刘欣禹杜晓欧阳清李昂杨安钢赵晶阎博

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阎博