邓未
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：成都医学院生物医学系更多>>
- 发文基金：四川省教育厅青年基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 五种破壁方法提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense总RNA效果的比较被引量：2
- 2011年
- 为了探索提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense菌株总RNA简便而有效的方法，我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁，再用市售RNAsimpletotal RNAkit试剂盒提取总RNA，最后通过对提取物进行琼脂糖凝胶电泳定性、紫外比色定量及PCR检测来评价各种破壁方法的优弊。结果显示液氮加石英沙研磨破壁法提取的真菌总RNA在5种方法中效率最高，OD260／OD280=2．093±0．264，RNA浓度为（0．134±0．021）μg／μL，RNA制备效率为（26．76±4．10）μg／g菌丝体，并且该方法操作简便，重复性最好，是制备P．guiyangense菌株总RNA的首选破壁方法。
- 杨平陈慧娟钟文英邓未黄杰李敏惠
- 关键词：破壁总RNA
- 一种适于简并PCR的Pythium sp.GY1938基因组DNA制备方法被引量：6
- 2012年
- 目的探索适用于Pythiumsp.GY1938菌株简并PCR的基因组DNA模板制备方案。方法采用微波法、石英沙法、氯化苄法、CTAB法、尿素法提取DNA,并通过特异PCR和简并PCR评价各种方案的优弊。结果 5种方法制备的DNA含量差异无统计学意义(F=2.355,P>0.05);DNA制备效率相近;特异性PCR结果一致,但氯化苄法制备的DNA经简并PCR扩增出的条带较多,目的条带更清晰。结论 5种方法均适于特异性PCR所需DNA模板的制备,但氯化苄法更适于Pythiumsp.GY1938菌株简并PCR模板DNA的制备。
- 杨平黄杰余琳邓未傅龙章李敏惠
- 关键词：真菌基因组简并
- 胱抑素C的IgG-和IgY-ELISA检测体系的建立与评价被引量：2
- 2012年
- 目的建立适用于检测人胱抑素C(Cystatin C)的IgG与IgY双抗体夹心ELISA检测体系。方法以人Cystatin C作为抗原免疫产蛋的罗曼鸡和新西兰兔,纯化抗Cystatin C的鸡抗体IgY和兔抗体IgG,并分别建立三种ELISA夹心检测体系,I:捕捉抗体IgG+检测抗体IgY+抗鸡IgY酶标抗体;Ⅱ:捕捉抗体IgG+检测抗体IgY+兔F(ab')2抗鸡酶标抗体;Ⅲ:捕捉抗体IgY+检测抗体IgG+抗兔IgG酶标抗体。通过比较Cystatin C的最低检测浓度和阴性对照的OD值评价三种夹心法的灵敏度和特异性。结果体系I的Cystatin C最低检测浓度为7.5ng/mL(阴性对照OD值为0.737),体系Ⅱ的Cystatin C最低检测浓度为13ng/mL(阴性对照OD值为0.313),体系Ⅲ的Cystatin C最低检测浓度为10ng/mL(阴性对照OD值为0.31)。结论成功建立了Cystatin C的双抗体夹心ELISA检测体系,体系I的灵敏度最高但其特异性差,体系Ⅱ和Ⅲ的检测灵敏度和特异性均较好,可以用于Cystatin C的检测。
- 蒋洪娇李敏惠邹强王琦吴永琴吴啟洪邓未刘雯雯杨艳玲代爽杨平
- 关键词：IGY抗体IGG抗体胱抑素C酶联免疫吸附试验
