余琳
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 丝状真菌Pythium sp.GY1938菌株蛋白图谱染色方法的比较及优化被引量：2
- 2011年
- 目的探索制备灭蚊丝状真菌Pythiumsp.GY1938菌株菌丝体可溶性蛋白图谱的最佳染色方案。方法采用不同的破壁方法制备Pythiumsp.GY1938菌丝体可溶性蛋白,并通过SDS-PAGE进行蛋白质电泳分离,进一步采用考马斯亮蓝R-250染色法、Vorum银染法、EMBL银染法、Blum银染法4种染色方案分别进行凝胶染色,对不同染色方案的染色效果进行分析和比较。结果对于Pythiumsp.GY1938菌丝体可溶性蛋白样品中的中、高分子质量蛋白(≥44ku),考马斯亮蓝R-250的染色效果较好,且简单、快捷;对于低分子质量(<44ku)的可溶性蛋白,Vorum银染法染色效果较好;Blum银染法和EMBL银染法的染色效果均不理想。结论考马斯亮蓝R-250染色法和Vorum银染法均可应用于Pythiumsp.GY1938菌丝体可溶性蛋白图谱的制备,前者适合对中、高分子质量蛋白染色,后者适合对低分子质量蛋白染色。
- 杨平钟剑雷帆余琳杨思思李敏惠
- 关键词：考马斯亮蓝染色银染
- 一种适于简并PCR的Pythium sp.GY1938基因组DNA制备方法被引量：6
- 2012年
- 目的探索适用于Pythiumsp.GY1938菌株简并PCR的基因组DNA模板制备方案。方法采用微波法、石英沙法、氯化苄法、CTAB法、尿素法提取DNA,并通过特异PCR和简并PCR评价各种方案的优弊。结果 5种方法制备的DNA含量差异无统计学意义(F=2.355,P>0.05);DNA制备效率相近;特异性PCR结果一致,但氯化苄法制备的DNA经简并PCR扩增出的条带较多,目的条带更清晰。结论 5种方法均适于特异性PCR所需DNA模板的制备,但氯化苄法更适于Pythiumsp.GY1938菌株简并PCR模板DNA的制备。
- 杨平黄杰余琳邓未傅龙章李敏惠
- 关键词：真菌基因组简并
- 适于Pythium sp.GY1938菌株蛋白质组学研究的总蛋白快速制备方法
- 2012年
- 为建立一种以灭蚊真菌Pythium sp.GY1938菌丝体为原材料的快速制备总蛋白的方法,分别采用7种方法对菌丝体进行破壁处理,于镜下观察比较破壁的效果,再通过SDS-PAGE蛋白质电泳和考马斯亮蓝染色分析,比较各种方法对细胞破壁后释放蛋白质效果的差异。结果显示,以石英沙作为助磨剂的液氮研磨法制备总蛋白效果最佳,蛋白显带最多,也最清晰;该方法还兼具快速、简便、经济等优点,是该真菌菌丝体蛋白制备的首选方法,为其后续蛋白质组学研究奠定基础。
- 余琳黄杰傅龙章宋丽萍李敏惠杨平
- 关键词：总蛋白
