黄杰
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：成都医学院生物医学系更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗胱抑素C鸡卵黄IgY抗体的制备及鉴定
- 2013年
- 目的:制备高效价、高特异性的抗人胱抑素C鸡卵黄IgY抗体,并对其基本特性进行分析和鉴定。方法:以人胱抑素C为抗原免疫产蛋的罗曼鸡,采用水稀释-盐析法提取及纯化IgY抗体,采用蛋白质定量、SDS-PAGE、West ern印迹和ELISA法对IgY抗体进行分析和鉴定。结果:免疫后14 d即可从鸡冠血中检测出抗胱抑素C的特异性抗体,抗体效价在28 d达最高峰(1∶32 000),并可维持2个月以上;收集高效价时的免疫鸡蛋,制备鸡卵黄抗体IgY;还原性SDS-PAGE显示抗体IgY为相对分子质量分别为65×103和21×103的2条带,抗体纯度可达92%,得率为每个鸡蛋36.5 mg,抗体检出敏感度为15.63 ng/mL;Western印迹证明该抗体具有高度特异性。结论:制备了抗胱抑素C的高效价、高特异性IgY抗体。
- 傅龙章李敏惠潘克俭邹珂珂杨菌李艳超黄杰叶启迪马玲玲杨平
- 关键词：IGY抗体胱抑素C
- 五种破壁方法提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense总RNA效果的比较被引量：2
- 2011年
- 为了探索提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense菌株总RNA简便而有效的方法，我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁，再用市售RNAsimpletotal RNAkit试剂盒提取总RNA，最后通过对提取物进行琼脂糖凝胶电泳定性、紫外比色定量及PCR检测来评价各种破壁方法的优弊。结果显示液氮加石英沙研磨破壁法提取的真菌总RNA在5种方法中效率最高，OD260／OD280=2．093±0．264，RNA浓度为（0．134±0．021）μg／μL，RNA制备效率为（26．76±4．10）μg／g菌丝体，并且该方法操作简便，重复性最好，是制备P．guiyangense菌株总RNA的首选破壁方法。
- 杨平陈慧娟钟文英邓未黄杰李敏惠
- 关键词：破壁总RNA
- 适于Pythium sp.GY1938菌株蛋白质组学研究的总蛋白快速制备方法
- 2012年
- 为建立一种以灭蚊真菌Pythium sp.GY1938菌丝体为原材料的快速制备总蛋白的方法,分别采用7种方法对菌丝体进行破壁处理,于镜下观察比较破壁的效果,再通过SDS-PAGE蛋白质电泳和考马斯亮蓝染色分析,比较各种方法对细胞破壁后释放蛋白质效果的差异。结果显示,以石英沙作为助磨剂的液氮研磨法制备总蛋白效果最佳,蛋白显带最多,也最清晰;该方法还兼具快速、简便、经济等优点,是该真菌菌丝体蛋白制备的首选方法,为其后续蛋白质组学研究奠定基础。
- 余琳黄杰傅龙章宋丽萍李敏惠杨平
- 关键词：总蛋白
- 一种适于简并PCR的Pythium sp.GY1938基因组DNA制备方法被引量：6
- 2012年
- 目的探索适用于Pythiumsp.GY1938菌株简并PCR的基因组DNA模板制备方案。方法采用微波法、石英沙法、氯化苄法、CTAB法、尿素法提取DNA,并通过特异PCR和简并PCR评价各种方案的优弊。结果 5种方法制备的DNA含量差异无统计学意义(F=2.355,P>0.05);DNA制备效率相近;特异性PCR结果一致,但氯化苄法制备的DNA经简并PCR扩增出的条带较多,目的条带更清晰。结论 5种方法均适于特异性PCR所需DNA模板的制备,但氯化苄法更适于Pythiumsp.GY1938菌株简并PCR模板DNA的制备。
- 杨平黄杰余琳邓未傅龙章李敏惠
- 关键词：真菌基因组简并
