赵炜
- 作品数:14 被引量:51H指数:5
- 供职机构:广州军区广州总医院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- mRNA差异显示技术筛选何首乌中二苯乙烯苷合成相关基因被引量:1
- 2014年
- 【目的】筛选和克隆何首乌中二苯乙烯苷代谢相关酶基因。【方法】采用mRNA差异显示技术,对何首乌中二苯乙烯苷含量差异悬殊的不同组织(根、茎、叶)进行差异表达基因的筛选,将得到的差异基因连接pMD19-T载体进行测序后,通过数据库比对预测其基因功能。【结果】发现差异片段51条,选取其中9条进行半定量PCR验证,获得3条阳性差异片段。其中1条阳性片段为何首乌茎和叶特异表达,与甘氨酸脱氢酶高度同源,另外2条阳性片段为何首乌块根特异表达,分别与烯酰辅酶A水合酶、氨基肽酶N高度同源。【结论】通过mRNA差异显示技术得到的3个同源序列可为进一步研究何首乌中二苯乙烯苷生物合成途径提供帮助。
- 黎洁文赵炜赵树进
- 关键词:何首乌二苯乙烯苷MRNA差异显示基因表达差异
- mRNA差异显示技术筛选何首乌中二苯乙烯苷合成相关基因
- 目的:筛选和克隆何首乌中二苯乙烯苷代谢相关酶基因。方法:采用mRNA 差异显示技术,对何首乌中二苯乙烯苷含量差异悬殊的不同组织(根、茎、叶)进行差异表达基因的筛选,得到的差异基因连接pMD19-T 载体测序后,通过数据库...
- 黎洁文赵炜赵树进
- 关键词:何首乌二苯乙烯苷MRNA差异显示基因表达差异
- 何首乌二苯乙烯苷含量差异性研究被引量:7
- 2014年
- 目的:为筛选二苯乙烯苷含量差异显著的何首乌样本,为通过mRNA水平筛选与二苯乙烯苷合成相关酶基因,研究二苯乙烯苷合成途径打下基础。方法:HPLC,流动相为乙腈∶水(25∶75);柱温:27℃;流速:1.0mL.min-1;进样量:10μL;紫外检测波长:320nm;进样时间:10min。结果:线性回归方程:y=41.233x+1.6644,R2=1。结论:对水浴和室温冷浸两种萃取方法的比较发现水浴40min和冷浸12h效果无明显差异;冷浸12h和冷浸30h无显著差异;不同产地何首乌块根二苯乙烯苷含量差异显著(6.4%~0.0011%),同一产地何首乌含量差异亦存在明显差异(6.4%~1.5%);同株何首乌不同组织二苯乙烯苷含量存在较大差异,依次是:根〉茎〉叶;新叶〉老叶;老藤〉新藤。
- 赵炜朱宽鹏生书晶姚焱赵树进
- 关键词:何首乌二苯乙烯苷HPLC
- 何首乌中二苯乙烯苷生物合成相关基因的筛选与分析
- 何首乌(Fallopia multiflora)属于蓼科多年生缠绕草本植物,其块根(何首乌)和藤茎(夜交藤)均可入药。何首乌提取物中含有多种对人类健康有益的活性成分,如黄酮类、蒽醌类等。其中最重要的是以二苯乙烯苷(2,3...
- 赵炜
- 关键词:何首乌二苯乙烯苷抑制消减杂交转录组测序生物合成差异表达基因
- 何首乌中Ⅲ型聚酮合酶基因FmPKS2的原核表达及鉴定
- 2013年
- 目的:对传统中药何首乌中Ⅲ型聚酮合酶基因FmPKS2进行原核表达并鉴定重组蛋白酶活性,为研究该酶基因在何首乌有效成分代谢合成及其调控中的功能奠定基础。方法:根据何首乌FmPKS2(GenBank登录号:GQ984139)基因序列,通过PCR扩增其全长的编码区,克隆至原核表达载体PET-28a,构建重组质粒PET-FmPKS2,将其转化原核表达菌株E.coli BL21(DE3),并用IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白可溶性,通过Ni-NTA亲和树脂纯化可溶性蛋白后以丙二酰-COA和香豆酰-COA为底物进行催化反应,TLC鉴定反应产物。结果:经过诱导,重组菌表达分子量为42KD左右的融合蛋白,其中可溶性重组蛋白最优表达条件为IPTG浓度0.5 mmol/L,诱导时间6h,温度25℃。纯化后的可溶性重组蛋白催化丙二酰-COA和香豆酰-COA得到的产物经TLC鉴定为二苯乙烯类化合物白藜芦醇。结论:成功实现FmPKS2的原核表达且融合蛋白以可溶形式存在,催化反应证明FmPKS2融合蛋白具有二苯乙烯合酶的活性。
- 陆娣赵炜夏晚霞赵树进
- 关键词:原核表达融合蛋白活性鉴定
- 药用植物次生代谢工程研究概况被引量:6
- 2010年
- 植物次生代谢工程,是通过基因工程技术改变植物体内的合成和代谢途径,以满足人类对天然植物次生代谢产物不断提高的需求。随着对药用植物次生代谢合成途径日渐全面的认识,采取有效的代谢工程策略对植物次生代谢途径进行遗传改良,已经取得了诸多研究成果。但是,对代谢途径的总体调控以及次生代谢途径之间的协调等方面,仍然了解甚少,而利用系统生物学方法开展预见性代谢工程将会成为未来的研究趋势。
- 生书晶赵炜赵树进
- 关键词:药用植物次生代谢产物代谢工程代谢途径
- 何首乌不同部位二苯乙烯苷含量以及芪合酶FM-STS时空表达差异被引量:1
- 2012年
- 目的:探究何首乌不同部位主要有效成分二苯乙烯苷含量差异以及相对应部位何首乌芪合酶基因FM-STS表达差异。方法:通过液氮碾磨提取广东德庆同一株何首乌根茎叶中的RNA以及用50%稀乙醇过夜浸提芪合物二苯乙烯苷;使用乙腈和水为流动相(体积比为20∶80),利用高效液相色谱分析其二苯乙烯苷含量差异;采用实时荧光定量PCR分析芪合酶基因Fm-STS表达差异,以β-actin作为内参对照,2-△△CT公式计算各组别中FM-STS的含量。结果:根茎叶中芪合物二苯乙烯苷含量依次为14.62mg/g、1.78mg/g和0.47mg/g(干重),在mRNA水平上检测基因Fm-STS表达量为叶片中最高,根是叶的1/10倍,茎是叶的1/64倍。结论:芪合酶基因FM-STS主要在何首乌叶片中表达,二苯乙烯苷主要在叶片中合成,进而转移到根块中富集。
- 朱宽鹏生书晶赵炜陆娣夏晚霞赵树进
- 关键词:何首乌二苯乙烯苷芪合酶基因荧光定量PCR
- 多倍体何首乌产量和品质初步评价被引量:8
- 2012年
- 比较何首乌二倍体、三倍体及同源四倍体在块根产量和品质方面的差异,为筛选优质高产多倍体新品种奠定基础。结果表明:何首乌多倍体表现为块根重显著提高,营养优势明显优于二倍体;三倍体和同源四倍体单株块根有效成分二苯乙烯苷产量是二倍体的2.99倍和1.69倍。与四倍体相比,三倍体在块根产量及二苯乙烯苷产量方面更具优势,在药用植物何首乌优质高产育种中具有高的价值。
- 汪珍春张晓燕赵炜姚焱张平孙莉丽王小兰赵树进
- 关键词:何首乌三倍体同源四倍体
- 5-羟色胺与肠易激综合征发病相关性的荟萃分析被引量:16
- 2013年
- 目的:运用荟萃分析的方法,对病例研究结果进行荟萃分析,探讨5-羟色胺(5-HT)与IBS发病的相关性,为进一步研究该病的发病机制提供参考。方法:在中国知网、维普资源系统、PubMed搜索2000-2011年有关5-羟色胺与肠易激综合征的腹泻型(IBS-D)、便秘型(IBS-C)发病相关性研究的论文,采用Stata 12软件对病例研究结果进行荟萃分析。结果:检索到108篇中文文献,98篇英文文献,共有5篇文献符合纳入标准。5-HT含量的检测方法均为肠黏膜活检,对照组为健康人或者肠息肉摘除术后复查的病人,同时无腹痛腹泻便秘等不适。IBS-D组与对照组的5-HT含量进行比较,差异有统计学意义(P<0.05);IBS-C组与对照组的5-HT含量进行比较,差异有统计学意义(P<0.05);IBS-D组与IBS-C组的5-HT含量进行比较,差异无统计学意义。结论:5-HT在IBS-D和IBS-C的发病过程中均发挥作用,但在IBS-D与IBS-C患者之间5-HT含量无明显差异,考虑5-HT在IBS-D与IBS-C的发病机制中发挥的作用可能相同。
- 赵炜黄穗平
- 关键词:肠易激综合征5-羟色胺
- 何首乌研究现状被引量:4
- 2014年
- 何首乌为我国传统中医常用的滋补名药,国内外对其研究主要集中在对其特异性进行区分鉴定、进行组织培养、毛状根培养、化学成分拆分、药理作用研究、主要成分代谢路经研究等几个方面,从这些方面对何首乌研究现状进行综述。
- 赵炜赵树进
- 关键词:何首乌药理作用二苯乙烯苷