- 肠出血性大肠埃希菌O157:H7 TCCP蛋白与宿主细胞IRTKS蛋白的相互作用被引量:1
- 2011年
- 目的通过体外结合实验验证EHEC O157:H7内膜素受体偶联细胞骨架蛋白重复片段与人肠上皮细胞IRTKS蛋白SH3结构域之间的相互作用,并制备二者蛋白复合体,为利用晶体学方法研究其相互作用奠定基础。方法将IRTKS蛋白的SH3结构域cDNA序列克隆至pET30a表达质粒,转化BL21(DE3),诱导表达纯化SH3(IRTKS)蛋白;制备TCCP重复片段TC-CP(3R)蛋白;将SH3(IRTKS)与TCCP(3R)按照不同比例混合后,非变性丙烯酰胺凝胶电泳鉴定两者相互结合后产物;利用分子筛层析收集标准蛋白、TCCP(3R)、SH3(IRTKS)和TCCP(3R)-SH3(IRTKS)复合体的出峰体积,回归计算复合物的分子量,分析蛋白相互结合的比例。结果成功克隆表达了SH3(IRTKS)重组质粒;并制备了高纯度的SH3(IRTKS)和TCCP(3R)蛋白;非变性丙烯酰胺凝胶电泳结果证实TCCP(3R)与SH3(IRTKS)发生相互作用形成了蛋白质复合体;复合体的分子量约为33 000,二者相互结合的比例约为1:1。结论本研究为TCCP重复片段与SH3(IRTKS)相互作用提供了直接证据,同时复合体的制备,为利用晶体学研究两者的相互作用奠定了基础。
- 蒋明明顾江王海光鲁东水张卫军罗萍童文德邹全明毛旭虎
- 关键词:EHECO157:H7蛋白质复合体
- 一种用于鉴定类鼻疽伯克霍尔德菌的PCR试剂盒
- 本发明提供一种用于鉴定类鼻疽伯克霍尔德菌的PCR试剂盒,其包含SEQ ID NO:1-2所示的核苷酸和PCR反应试剂。所述PCR试剂盒的PCR反应条件为:94℃预变性4分钟,94℃变性40秒,54.5℃退火20秒,72℃...
- 顾江方瑶王海光于波蒋明明程琰唐斌李娜毛旭虎
- 一种用于鉴定类鼻疽伯克霍尔德菌的PCR试剂盒
- 本发明提供一种用于鉴定类鼻疽伯克霍尔德菌的PCR试剂盒,其包含SEQ ID NO:1-2所示的核苷酸和PCR反应试剂。所述PCR试剂盒的PCR反应条件为:94℃预变性4分钟,94℃变性40秒,54.5℃退火20秒,72℃...
- 顾江方瑶王海光于波蒋明明程琰唐斌李娜毛旭虎
- 文献传递
- 立克次体基因分型研究进展被引量:7
- 2011年
- 立克次体(Rickettsia)是一类复杂的细胞内寄生菌,大多为人兽共患病病原体,其引起的立克次体病在世界范围内呈散发性和季节性流行。此外,立克次体作为潜在的生物恐怖病原体,也日益受到重视。为防控立克次体疾病,并对立克次体流行株进行溯源,国内外学者对菌株进行了分型鉴定。
- 蒋明明毛旭虎张守印
- 关键词:斑疹伤寒斑点热群基因分型