王艳凤
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：暨南大学微生物技术研究所更多>>
- 发文基金：广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 假密环菌Armillariella tabescens EJLY2098 β-甘露聚糖酶的克隆、表达及性质分析(英文)被引量：3
- 2009年
- 本研究利用RT-PCR和RACE技术从Armillariella tabescens EJLY2098(一种食用真菌)中克隆出了β-甘露聚糖酶的全长cDNA,构建到pPICZaA载体上,并在毕赤酵母GS115中表达了含His标签的β-甘露聚糖酶(re-atMAN47)。该酶的全长cDNA共1481bp,编码445个氨基酸,序列分析表明该序列除含有β-甘露聚糖酶结构域外,还含有CBD和GHF5的结构域,因此可被归为糖苷水解酶家族5的一个新成员。诱导培养72h时重组酶活可达到1.067U/mL,蛋白含量为440mg/L。重组酶的最适反应温度为60°C,在30°C～65°C比较稳定;酶促最适pH为5.5、4.5～7.0之间比较稳定。这是首次关于Armillariella. tabescens EJLY2098产β-甘露聚糖酶的报道,得到了一个有较好热稳定性、pH稳定性和生物安全性的糖苷水解酶,将在饲料、食品、药物生产等方面有广泛的应用。
- 王艳凤王衡馨黄小葵刘大岭姚冬生
- 关键词：酶学性质
- 毛霉Amylomyces.rouxii HN0512中内切葡聚糖酶的诱导、纯化及性质分析被引量：1
- 2011年
- Amylomyces.rouxii HN0512经羧甲基纤维素钠(CMC-Na)诱导,可产内切葡聚糖酶,通过正交试验优化诱导培养基,结果在培养基为1%羧甲基纤维素钠、2%麸皮汁、0.2%蛋白胨(以上均为质量分数)时可以诱导出较高活性的酶,用HiTrap QFF阴离子交换层析从培养液上清中纯化得到了具有内切葡聚糖酶活性的P3组分,活性组份的SDS-PAGE分析电泳呈现一条带,经AlphaEaseFCTM软件预测P3的分子质量为18.7 ku;酶反应的最适温度和pH分别为60℃和5.0,在pH 4.0-7.0范围内稳定性最好,在70℃还能保持50%以上的酶活力;金属离子Fe3+、Ba2+、Fe2+和表面活性剂尿素对酶起到了激活作用;反应动力学参数Km和Vmax分别为11.68 mg.mL-1、0.56μmol.L-1.min-1.本研究获得了一株产内切葡聚糖酶新菌种,并为进一步用基因工程方法克隆并构建重组内切葡聚糖酶基因工程菌奠定了重要的基础.
- 管明斌王艳凤谢春芳姚冬生
- 关键词：羧甲基纤维素钠内切葡聚糖酶纯化
- 毛霉Amylomyces.rouxii HN0512内切葡聚糖酶的分离纯化、性质分析以及基因克隆的初步研究
- 本文以从海南甘蔗渣中筛选的毛霉HN0512(Amylomyces.rouxii)为实验材料,经初步鉴定其具备产纤维素酶的能力,在此基础上优化培养基,得到活性较高的粗酶(4.07IU/mg)。采用硫酸铵分级沉淀、Hipre...
- 王艳凤
- 关键词：纯化
- 文献传递
