王林
- 作品数：9 被引量：13H指数：2
- 供职机构：北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TNNI3K促进心肌细胞肥大、增强肌丝钙敏感度及nexilin基因调节心肌收缩性
- 目的：心肌特异表达的激酶TNNI3K的蛋白整体结构类似于整联素关联激酶(intergrin-linked kinase, ILK)。研究表明,ILK在心肌发育的调控过程中起至关重要的作用,提示TNNI3K作为一个激酶可能...
- 王林
- 关键词：心肌细胞心肌细胞肥大腺病毒感染心肌细胞肥大
- 文献传递
- 均匀设计法在实时定量PCR检测条件优化中的应用研究被引量：2
- 2010年
- 目的探索均匀设计在优化实时定量PCR检测条件中的应用,确立心钠素基因实时定量的最佳条件。方法以乳鼠心肌细胞cDNA为模板,退火温度和引物浓度为影响因素,应用均匀设计法探索影响心钠素基因实时荧光定量PCR的扩增条件;量化不同实验条件下的扩增效果,在最优的扩增条件下建立ANP基因定量扩增的相对标准曲线,并检测扩增效率。结果通过均匀设计法的试验设计,用8个试验点,完成了对温度和引物浓度2因素8水平的实验条件优化,建立了ANP基因实时定量PCR检测的最佳组合,为退火温度59.2℃、引物终浓度200μM。结论均匀设计是一种简便易行、快速经济的实时定量PCR检测条件的优化方法。
- 宋莉叶珏王林王慧孟宪敏
- 关键词：均匀设计PCR心钠素
- SUMO修饰蛋白的规模鉴定及体内蛋白质SUMO化验证技术的建立
- 蛋白质翻译后修饰(Post-Translational Modifications,PTMs)作为一种重要的可逆的翻译后水平调节机制,在机体受到外界刺激时对蛋白质功能起着精细的调节作用,有助于机体针对刺激产生快速有效的反...
- 王林
- 关键词：SUMO蛋白质组单克隆抗体
- 文献传递
- 塞利洛尔治疗高血压病的疗效观察被引量：7
- 1997年
- 本研究采用随机，双盲，平行对照的方法，用长效β１受体阻滞剂塞利洛尔（ｃｅｌｉｐｒｏｌｏｌ）对高血压病进行了为期６周的治疗观察，并与另一β１受体阻滞剂比索洛尔（ｂｉｓｏｐｒｏｌｏｌ）进行对比，同时还进行了自身对照的治疗观察，共有４３２例病人完成此项观察研究，其中对照组２０１例，开放组１９９例，动态血压监测３２例。塞利洛尔的剂量为１００～３００ｍｇ，比索洛尔为５～１０ｍｇ。对照组２０１例患者的观察结果显示：塞利洛尔组总有效率为７８．２％，服药６周后平均收缩压（ＳＢＰ）及舒张压（ＤＢＰ）分别下降１４．２ｍｍＨｇ及１２．６ｍｍＨｇ。比索洛尔组总有效率为８５．０％，ＳＢＰ及ＤＢＰ的下降幅度为１８．２ｍｍＨｇ及１５．９ｍｍＨｇ。两组总有效率无显著差别，不良反应均较少。２４小时动态血压监测显示：用塞利洛尔后总血压负荷明显减少，各时点血压均值明显下降，用两种方法计算的谷／峰比值均大于５０％。研究证实塞利洛尔为一安全有效的抗高血压药物。
- 明广华黄建凤王旭王旭王旭吴治湘王旭王林王林王林陶萍
- 关键词：塞利洛尔高血压药物疗法疗效
- 胆酸通过其膜受体TGR5调控肝癌的发生发展
- 背景及目的 TGR5是胆酸特异性G蛋白耦联受体,广泛表达于人的多种组织中,主要通过c AMP信号通路调节多种生理功能。目前研究表明正常肝细胞内TGR5表达量极低,而肝癌细胞中表达增高;但正常胆管上皮细胞中的TGR5表达量...
- 王林张楠李闯杨华瑜毛一雷
- 关键词：胆酸肝癌
- 文献传递
- MicroRNA与心脏疾病被引量：1
- 2010年
- 微RNA(m icroRNA,m iRNA)是小分子非编码调控RNA,含有大约22个核苷酸,可和靶基因mRNA的3′非编码区相互配对结合,在转录后水平负调控靶基因的表达.微RNA调控细胞的生长、代谢、分化和凋亡,进而参与生物体的生长发育.研究表明,微RNA参与人类多种生理和病理过程的调控.最近几年,对微RNA表达调控机制及其调控相关疾病的研究取得了诸多显著性的进展,心脏疾病相关微RNA更加成为研究的热点.此外,一系列基于微RNA治疗心脏疾病的策略方法,例如用反义寡核苷酸抑制微RNA和微RNA补偿的方法,也取得了突破的成果.总之,微RNA的研究及应用将为心脏疾病的诊断和治疗提供新的途径.
- 王林王慧孟宪敏
- 关键词：微RNA基因沉默心脏疾病
- 腺病毒过表达TNNI3K基因对成年大鼠心肌细胞肌丝钙敏感度的影响被引量：2
- 2011年
- 目的检测TNNI3K基因过表达对成年大鼠心肌细胞肌丝钙敏感度变化的影响,为进一步研究TNNI3K基因在心肌收缩功能、心肌肥厚、心衰及其它心脏疾病中的作用提供了可靠有效的研究模型。方法恒压Langedoff灌流装置逆向灌流法分离成年大鼠心肌细胞,之后对该心肌细胞进行逐级复钙。然后,将心肌细胞接种于改良的M199培养基中。分别感染Ad.GFP病毒和Ad.TNNI3K病毒,24小时后,以IonOptix单细胞可视化动缘系统检测心肌细胞肌丝钙敏感度。结果成功分离培养了成年大鼠心肌细胞,并在该细胞中成功过表达了TNNI3K基因。钙敏感度测定结果表明,TNNI3K基因能够增强心肌细胞肌丝钙敏感度。结论在本实验成功分离培养的成年大鼠心肌细胞中以腺病毒载体过表达TNNI3K基因,可增强心肌细胞肌丝的钙敏感度,该模型为进一步研究TNNI3K基因在心肌收缩功能中的作用及机制奠定了基础。
- 王林王慧叶珏宋莉孟宪敏
- 关键词：腺病毒感染
- 人心肌特异表达基因Nelin蛋白的血清水平测定及其意义被引量：1
- 2010年
- 目的探讨Nelin蛋白在心血管病患者和正常对照血清表达水平的差别及其意义。方法使用自制的一株Nelin单克隆抗体(MA-H409H5),建立ELISA法标准曲线。通过检测灵敏度(最小检出量)、精确度(批内、批间变异系数)、回收率等以优化实验反应条件,并以此方法测定了580例人血清Nelin蛋白浓度。结果直接ELISA法检测Nelin蛋白的最小检出量为7.8ng/ml,标准曲线在7.8～250.0ng/ml范围内线性良好(r>0.99)。精确度测定:平均批内变异系数为4.78%,平均批间变异系数为9.56%。测得回收率为(100±5)%。580例人血清中均可检测到Nelin蛋白的表达,其中正常对照组为(9.34±3.07)μg/ml,冠心病组为(8.57±2.76)μg/ml,该两组Nelin蛋白含量相比有显著性差异(P<0.05),而其他各心脏病组与正常组相比均无显著性差异。结论成功建立了人血清Nelin蛋白的ELISA测定法,该方法敏感、特异、可靠。正常对照组和各心血管病患者组均有Nelin蛋白表达,但冠心病组明显低于正常对照组,提示Nelin基因的表达水平可能与冠心病有一定的关系。
- 时娜宋莉刘冬青王林丁金凤孟宪敏
- 关键词：基因心血管病
- 大鼠nelin基因干扰质粒的构建及其体外抑制效果研究
- 2010年
- 目的构建大鼠nelin基因干扰质粒并对其进行体外抑制效果验证,为研究nelin在心脏发育、心肌肥厚、心衰及其它心脏疾病中的作用提供有效的研究工具。方法提取大鼠心肌组织RNA,逆转录为cDNA,设计合成含BamHI和EcoRI酶切位点的引物,以大鼠cDNA为模板PCR扩增获得nelin基因,定向克隆入pEGFP-N1-3FLAG载体,测序验证。以克隆得到的大鼠nelin基因为模板,设计合成候选干扰序列,亚克隆至pGCSIL-U6载体,获得干扰质粒。以nelin基因干扰质粒和重组表达质粒共转染HEK293T细胞,WesternBlot方法检测干扰效果。结果成功克隆了大鼠nelin基因并构建了nelin基因重组表达载体pEGFP-N1-3FLAG-rNelin。设计构建的4个干扰质粒(靶位点分别为+370-388位,+376-394位,+545-563位,+1206-1224,命名为pGCSIL-U6-nelin/siteⅠ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ)均可显著降低nelin基因的表达,尤以靶向(+370-388位)位点即pGCSIL-U6/nelin-siteI质粒的干扰效果最佳。结论本实验构建的大鼠nelin基因特异性干扰质粒能从蛋白水平上高效特异地抑制ne-lin基因表达,为进一步开展其功能研究奠定了基础。
- 王慧王林宋莉叶珏孟宪敏
- 关键词：RNA干扰SHRNA重组表达质粒体外抑制酶切位点
