段明明
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 日本血吸虫Wnt1基因的鉴定及在不同发育阶段表达水平分析被引量：1
- 2014年
- 为研究Wnt信号通路对血吸虫发育的调节作用,本研究克隆鉴定了日本血吸虫的Wnt1基因(Sj Wnt1)。序列分析显示,Sj Wnt1蛋白具有Wnt信号蛋白家族的结构功能域,但比高等生物的Wnt1少一个保守的Cys。m RNA和蛋白的定量分析结果显示,Sj Wnt1表达于血吸虫的整个发育过程,而在虫卵和早期童虫中呈高表达水平,提示Sj Wnt1对卵胚发育和早期童虫的细胞分化具有调节作用。来源于非适宜宿主及单性感染的发育不良虫体中Sj Wnt1 m RNA水平比发育正常的虫体高,表明不良发育的虫体相应的Wnt信号阻滞。Sj Wnt1表达下调后则引起Wnt/β-catenin、Wnt/PCP及Wnt/Ca2+通路的相应下游基因的m RNA水平下降,推测Sj Wnt1可能通过这3种传递途径行使信号传递的功能。
- 塔娜邓玲玲冯新港段明明陆珂李浩苑纯秀林矫矫
- 关键词：血吸虫WNT1发育
- 日本血吸虫热休克蛋白70在昆虫细胞Sf9中的表达鉴定被引量：2
- 2013年
- 本研究旨在用杆状病毒/昆虫细胞表达系统表达日本血吸虫热休克70蛋白(SjHSP70),获得重组的rSjHSP70蛋白。利用PCR技术从日本血吸虫cDNA文库中克隆SjHSP70全长序列;亚克隆到pFastBacHTA中,构建重组杆状病毒转移载体pFastBacHTA-SjHSP70,导入DH10Bac感受态细胞,得到重组穿梭质粒reBacmid-SjHSP70,再转染到Sf9昆虫细胞制备重组病毒;将重组病毒感染细胞,用间接免疫荧光技术鉴定重组蛋白的表达;His柱亲和层析法纯化目的蛋白;Western blot技术对纯化蛋白进行抗原性鉴定。SjHSP70基因全长序列1962 bp,在Sf9昆虫细胞中获得高效表达;His柱亲和层析法纯化表达的蛋白可被日本血吸虫感染小鼠的阳性血清识别。用杆状病毒昆虫细胞表达系统成功表达了SjHSP70,为深入研究SjHSP70分子的免疫生物学功能提供了材料。
- 徐瑞敏李运燕段明明刘群苑纯秀杨健美冯新港
- 关键词：日本血吸虫热休克蛋白70杆状病毒免疫原性
- 重组杆状病毒及其表达的SjHMGB1重组蛋白和应用
- 本发明公开了一种重组杆状病毒，该重组杆状病毒包含：编码SEQ ID NO.1所示SjHMGB1蛋白氨基酸序列的核苷酸序列。本发明的重组杆状病毒，在昆虫细胞中能成功表达出SjHMGB1重组蛋白，该重组表达的SjHMGB1蛋...
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- 文献传递
- 日本血吸虫SjCHGC06822蛋白诱导BALB/c小鼠免疫保护效果观察
- 2015年
- 利用PCR技术扩增日本血吸虫SjCHGC06822 ORF全长序列，以pET28a（＋）为载体构建重组质粒，大肠杆菌表达系统进行表达，His-Ni柱层析纯化rSjCHGC06822/His蛋白后，生物信息学分析其可能结构，Western blot分析其抗原性。利用重组蛋白免疫BALB/c小鼠评估其免疫效果，ELISA分析血清抗体亚型变化。结果显示，获得日本血吸虫SjCHGC06822的完整ORF序列591 bp，编码192个氨基酸，序列aa37~aa72含一个EF-hand手性域结构，无信号肽及跨膜结构。获得的SjCHGC06822/His重组蛋白具有较好的抗原性，在2次独立BALB/c小鼠实验中，与PBS对照组相比，SjCHGC06822/His蛋白免疫组诱导小鼠获得30.36%、40.26%减虫率和30.14%、12.28%肝脏减卵率，血清IgG抗体免疫及感染后持续增高，IgG2a和IgG1水平随免疫次数增高，感染后出现下降，但IgG2a/IgG1（〈1）水平持续增加。本研究成功克隆了SjCHGC06822基因，并成功表达纯化了rSjCHGC06822/His蛋白，且免疫原性和反应原性良好。SjCHGC06822蛋白免疫可以诱导BALB/c小鼠产生一定的保护力，诱导宿主的免疫应答更偏向于Th1型。
- 段明明刘群葛程苑纯秀陆柯李浩冯新港
- 关键词：日本血吸虫免疫原性TH1应答
- 日本血吸虫PDIA3的原核表达和多抗血清制备被引量：1
- 2015年
- 为获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)PDIA3(Sj PDIA3)重组蛋白,并制备多克隆抗体血清,本研究以日本血吸虫c DNA文库为模版,利用PCR技术扩增得到PDIA3 ORF全长,并克隆到p ET28a(+)载体中,将得到的重组质粒p ET28aSj PDIA3转化至BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后His-Ni柱亲和层析纯化得到Sj PDIA3重组蛋白,利用重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,Western blot分析重组蛋白的免疫原性。扩增得到长为1482 bp日本血吸虫PDIA3的ORF序列,该序列编码493个氨基酸,含两个硫氧还原蛋白结构域和一段信号肽,无扩膜结构。在原核表达系统中表达得到大小为55 k Da的Sj PDIA3重组蛋白,分析显示其具有良好的抗原性。
- 刘群段明明苑纯秀李丹丹葛程马丽贞冯新港
- 关键词：日本血吸虫原核表达多克隆抗体
