李运燕
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 日本血吸虫热休克蛋白70在昆虫细胞Sf9中的表达鉴定被引量：2
- 2013年
- 本研究旨在用杆状病毒/昆虫细胞表达系统表达日本血吸虫热休克70蛋白(SjHSP70),获得重组的rSjHSP70蛋白。利用PCR技术从日本血吸虫cDNA文库中克隆SjHSP70全长序列;亚克隆到pFastBacHTA中,构建重组杆状病毒转移载体pFastBacHTA-SjHSP70,导入DH10Bac感受态细胞,得到重组穿梭质粒reBacmid-SjHSP70,再转染到Sf9昆虫细胞制备重组病毒;将重组病毒感染细胞,用间接免疫荧光技术鉴定重组蛋白的表达;His柱亲和层析法纯化目的蛋白;Western blot技术对纯化蛋白进行抗原性鉴定。SjHSP70基因全长序列1962 bp,在Sf9昆虫细胞中获得高效表达;His柱亲和层析法纯化表达的蛋白可被日本血吸虫感染小鼠的阳性血清识别。用杆状病毒昆虫细胞表达系统成功表达了SjHSP70,为深入研究SjHSP70分子的免疫生物学功能提供了材料。
- 徐瑞敏李运燕段明明刘群苑纯秀杨健美冯新港
- 关键词：日本血吸虫热休克蛋白70杆状病毒免疫原性
- 重组杆状病毒及其表达的SjHMGB1重组蛋白和应用
- 本发明公开了一种重组杆状病毒，该重组杆状病毒包含：编码SEQ ID NO.1所示SjHMGB1蛋白氨基酸序列的核苷酸序列。本发明的重组杆状病毒，在昆虫细胞中能成功表达出SjHMGB1重组蛋白，该重组表达的SjHMGB1蛋...
- 冯新港刘群苑纯秀段明明葛程李运燕徐瑞敏李丹丹杨健美
- 文献传递
- 紫外辐照致弱日本血吸虫活化小鼠骨髓源树突细胞(BmDC)的初步研究
- 本研究目的是比较辐照和正常血吸虫活化小鼠骨髓源树突细胞(BmDC)的功能.常规法取小鼠胫骨和股骨骨髓细胞,分离培养BmDC,然后用体外培养的4d,7d,10d和14d的正常和辐照虫体分别与BmDC共培养,流式细胞术测定B...
- 李运燕徐瑞敏刘群段明明杨健美苑纯秀冯新港
- 关键词：日本血吸虫紫外辐照免疫保护
- 日本血吸虫钙网织蛋白在Sf9昆虫细胞中的表达及其活化树突细胞的初步分析被引量：4
- 2012年
- 为获得在Sf9昆虫细胞中表达的日本血吸虫钙网织蛋白(Schistosoma japonicum calreticulin protein,SjCRT)并分析其活化小鼠骨髓来源树突状细胞的功能,将构建的重组杆状病毒转移载体pFastBacHTA-SjCRT转入DH10Bac细胞,得到重组穿梭质粒reBacmid-SjCRT,再转染到Sf9昆虫细胞,进行重组蛋白的表达。用Western blot和间接免疫荧光对表达蛋白进行鉴定。His柱亲和层析法纯化表达的蛋白,Westen blot鉴定纯化后的蛋白。从BALB/c小鼠产生骨髓来源的树突细胞mDCs,用纯化的重组SjCRT蛋白与mDCs共培养,流式细胞术检测mDCs细胞的表面分子MHCⅡ、CD40和CD86的表达。结果显示,在Sf9昆虫细胞中成功表达了SjCRT蛋白;纯化后的重组SjCRT蛋白既能被感染日本血吸虫42 d的兔阳性血清识别,也能被原核表达的重组SjCRT蛋白免疫鼠的血清所识别。流式细胞术结果显示,与对照组的相比,SjCRT蛋白刺激组mDCs细胞表面分子MHCⅡ和CD86的表达量显著增强(P<0.05)。可见,在Sf9昆虫细胞中表达的SjCRT蛋白能刺激小鼠骨髓来源树突细胞表型的成熟。
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- 关键词：日本血吸虫树突状细胞
