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脂质体介导的基因转染效率与肺癌细胞的增殖特性的关系被引量：6: 2001年; 目的 :探讨阳离子脂质体介导的基因转染效率与肺癌细胞增殖特性的关系。方法 :采用pCMVβ报告基因质粒及自杀基因E .colicd的真核表达载体评价脂质体介导的基因转染效率。肺癌细胞增殖特性的检测包括绘制细胞生长曲线、计算细胞群体倍增时间、流式细胞仪测定肺癌细胞的细胞周期分布。结果 :肺癌细胞的类型对脂质介导的基因转染效率具有显著影响。细胞增殖速度越快 ,处于分裂期 (G2 /M)的细胞越多 ,则脂质介导的基因转染效率越高。结论 :脂质介导的基因转染对细胞增殖的依赖。; 李芳伍新尧徐平区敬华童大跃; 关键词：自杀基因基因转移阳离子脂质体基因治疗

利用电泳迁移分析法初步探讨肺癌细胞株CEA的转录调控: 2002年; 【目的】探讨癌胚抗原 (CEA)表达水平不同的肺癌细胞株在转录因子水平有无差异。【方法】利用电泳迁移分析法 (EMSA)检测这些细胞株与CEA启动子阳性足迹区探针结合的DNA结合蛋白。维甲酸 (RA)诱导分化A5 49细胞 ,检测诱导前后转录因子的变化。【结果】CEA水平高的细胞DNA结合蛋白的条带信号强 ,CEA水平低的细胞DNA结合蛋白的条带信号弱 ,CEA阴性细胞可见到较弱的DNA结合蛋白信号。结合条带信号在诱导后细胞组明显减弱。【结论】CEA基因特异性的表达部分依赖于转录因子的合成。转录因子量的改变与CEA表达的高低有关 ,并且提示RA对CEA阳性肺癌细胞的诱导是在转录水平起作用。; 徐平童大跃李芳伍新尧; 关键词：癌胚抗原转录因子 DNA结合蛋白肺癌

随机引物PCR技术在个体认定及亲权鉴定中的应用被引量：2: 2000年; 随机引物PCR技术 (AP -PCR)检测人DNA指纹图用于法医学个体认定及亲权鉴定是一个非常有效和经济的方法。应用该技术对 10 0例无关个体AP -PCR的DNA指纹进行频率分析和 10个肯定亲生关系的家庭进行亲权鉴定 ,结果该技术的个体识别力非常高 ,亲权鉴定时的非父排除率也很高 ,且操作简便、快速。; 童大跃伍新尧郭语彬李芳徐平区敬华林达; 关键词：DNA指纹亲权鉴定

转染自杀基因pCEAcd-tk的SPC-A-1细胞的死亡机制被引量：4: 2000年; 【目的】探讨自杀基因 pCEAcd tk/前体药物体系旁观者效应的细胞死亡机制。【方法】提取质粒pCEAcd tk ,转染到肺癌细胞株SPC A 1中 ,与未转染的细胞按 2∶8的比例混合后加到 96孔培养板中 (每孔 3× 10 3 ) ,加前体药物 5 FC(5 μmol/L)和GCV(10 μmol/L)孵育 5d后 ,MTT法测定细胞存活率而估计旁观者效应。取处理后的细胞 ,提取DNA ,琼脂糖凝胶电泳 ;Hoechst染色后荧光显微镜观察及碘化丙啶 (PI)染色 ,流式细胞仪分析细胞周期。【结果】①SPC A 1细胞株在转染了pCEAcd tk体系后加前体药物存在明显的旁观者效应 ;②处理细胞的基因组DNA琼脂糖凝胶电泳呈涂布状 ;③处理细胞用荧光显微镜观察到形状变大 ,无凋亡小体形成 ;④流式细胞仪分析到细胞周期发生改变。【结论】SPC A 1细胞在转染了pCEAcd tk后存在旁观者效应 ,这种旁观者效应引起的细胞死亡是一种坏死。; 郭语彬伍新尧骆晓枫李芳徐平何光耀; 关键词：自杀基因旁观者效应 SPC-A-1 肿瘤

随机引物PCR检测人DNA指纹条件的优化被引量：2: 2001年; 【目的】探讨随机引物PCR检测人DNA指纹技术的最优化条件。【方法】应用随机引物PCR技术 ,用一对经筛选的短引物 ,对扩增人DNA指纹的条件进行了优化。【结果】实验结果显示 :DNA模板应新鲜 ,质量浓度在 5 0～ 5 5 0mg/L均有扩增产物。dNTP的浓度 0 2mmol/L最宜。Mg2 + 浓度 5 0mmol/L效果最佳。循环参数以两个三步PCR ,变性温度分别用 94℃、90℃ ,时间各为 30s,退火温度用 43℃、48℃ ,时间分别为 40s、5 0s,延伸温度用 72℃ ,时间分别为 1min、1min 2 0s。【结论】按照优化的实验条件 ,得出的DNA指纹图重复性好 ,个体特异性高。; 童大跃徐平区敬华郭语彬李芳林达伍新尧; 关键词：AP-PCR DNA指纹法聚合酶链反应随机引物

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徐平