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自杀基因疗法联合化疗对癌胚抗原表达型肺肿瘤的杀伤作用: 2001年; 目的　探讨阳离子脂质体介导E .colicd/HSV 1tk融合自杀基因联合长春瑞滨对癌胚抗原阳性肺癌的体内杀伤作用。方法　裸鼠皮下接种肺癌细胞SPCA 1后第 5、9、13天 ,腹腔注射阳离子脂质体 / pE CEAcd tk复合物 ,于第 6～ 15天连续腹腔注射 5 氟胞嘧碇 +丙氧鸟苷前体药物进行自杀基因治疗。于第 5、13天给予长春瑞滨进行联合治疗。结果　阳离子脂质体介导融合自杀基因联合长春瑞滨使小鼠皮下的肿瘤结节的生长受到显著抑制。其平均瘤体体积显著小于单独自杀基因或化疗治疗组的平均瘤体体积 (P <0 .0 1)。结论　阳离子脂质体介导E .colicd/HSV 1tk融合基因联合长春瑞滨化疗在体内可有效抑制肺肿瘤的生长 ,为癌胚抗原阳性肺癌的治疗提供了 1条新的途径。; 李芳伍新尧童大跃; 关键词：癌胚抗原自杀基因阳离子脂质体联合化疗

脂质体介导的基因转染效率与肺癌细胞的增殖特性的关系被引量：6: 2001年; 目的 :探讨阳离子脂质体介导的基因转染效率与肺癌细胞增殖特性的关系。方法 :采用pCMVβ报告基因质粒及自杀基因E .colicd的真核表达载体评价脂质体介导的基因转染效率。肺癌细胞增殖特性的检测包括绘制细胞生长曲线、计算细胞群体倍增时间、流式细胞仪测定肺癌细胞的细胞周期分布。结果 :肺癌细胞的类型对脂质介导的基因转染效率具有显著影响。细胞增殖速度越快 ,处于分裂期 (G2 /M)的细胞越多 ,则脂质介导的基因转染效率越高。结论 :脂质介导的基因转染对细胞增殖的依赖。; 李芳伍新尧徐平区敬华童大跃; 关键词：自杀基因基因转移阳离子脂质体基因治疗

血液肿瘤病人住院不同时期的情绪变化及护理对策被引量：5: 2001年; 顾华英温盛霖陆慕真戈兰李芳; 关键词：护理血液肿瘤情绪变化

阳离子脂质体介导的肺癌细胞基因转染效率的比较研究被引量：6: 2000年; 【目的】提高阳离子脂质体介导的肺癌细胞基因转染效率。【方法】采用表达E .coliβ 半乳糖苷酶的 pCMVβ报告基因质粒及组化染色评价阳离子脂质体的转染效率。优化脂质体介导肺癌细胞基因转染效率的条件包括 :脂质体∶DNA电荷比率 ,DNA转染剂量 ,阳离子脂质体的类型。【结果】当阳离子脂质体∶DNA电荷比率 (+ / - )为 3∶1时 ,pCMVβ 的剂量为4μg/孔 (2 4孔板 )时 ,阳离子脂质体DOSPER介导肺癌细胞株SPC A 1转染效率最高 ,达 (11 9± 0 9) %。【结论】优化转染条件 ,脂质体可有效地将外源基因体外导入肺癌细胞。本实验为阳离子脂质体介导肺癌细胞功能性基因的转移及进一步的肺癌基因治疗打下了基础。; 李芳伍新尧郭语彬区敬华童大跃; 关键词：基因疗法基因转移阳离子脂质体

脂质体介导的融合基因pCEAcd/tk转染肺癌细胞株效率的差异性被引量：8: 2000年; 对脂质体介导的体外肺癌细胞DAN转效率的差异性进行研究。方法 :提取质粒 pCEAcd/tk ,脂质体包裹后转染 6种肺癌细胞株 ,G418筛选 ,计数细胞阳性克隆数。结果 :6种肺癌细胞株中 ,导入了pCEAcdt/tk并获得稳定表达的细胞阳性克隆数差异较大 ;脂质体ESCORT -DNA混合物与细胞孵育时间不同对转染效率也有一定的影响。结论; 郭语彬伍新尧罗超权林达李芳许道松; 关键词：阳离子脂质体介导肺癌转染效率自杀基因

阳离子脂质体介导pE-CEA-cd-tk对CEA阳性肺癌的杀伤作用被引量：1: 2002年; 目的　增强E .colicd/HSV 1tk自杀基因的细胞毒性 ,实现阳离子脂质体介导pE CEA cd tk/5 FC +GCV体系靶向杀伤CEA阳性肺癌。方法　PCR法分别扩增出CMV增强子 ,CEA启动子 ,cd tk ,构建真核表达载体 pE CEA cd tk ;MTT法检测pE CEA cd tk/5 FC +GCV体系的体外细胞毒性。体内实验采用肺腺癌细胞SPC A 1裸鼠皮下移植瘤模型。通过肿瘤局部或鼠尾静脉注射脂质体 /pE CEA cd tk复合物 ,腹腔注射GCV +5 FC前体药物进行治疗。结果　阳离子脂质体介导pE CEA cd tk/5 FC +GCV体系体外可靶向杀伤CEA阳性肺癌细胞 ,这种杀伤作用存在显著的细胞差异 ;体内可抑制小鼠皮下肺肿瘤结节的生长 ,荷瘤鼠存活期延长。结论　阳离子脂质体介导 pE CEA cd tk/5 FC +GCV体系体内外对CEA阳性肺癌均具有较强的杀伤作用。; 李芳伍新尧罗超权; 关键词：自杀基因阳离子脂质体

随机引物PCR技术在个体认定及亲权鉴定中的应用被引量：2: 2000年; 随机引物PCR技术 (AP -PCR)检测人DNA指纹图用于法医学个体认定及亲权鉴定是一个非常有效和经济的方法。应用该技术对 10 0例无关个体AP -PCR的DNA指纹进行频率分析和 10个肯定亲生关系的家庭进行亲权鉴定 ,结果该技术的个体识别力非常高 ,亲权鉴定时的非父排除率也很高 ,且操作简便、快速。; 童大跃伍新尧郭语彬李芳徐平区敬华林达; 关键词：DNA指纹亲权鉴定

阳离子脂质体介导自杀基因对癌胚抗原阳性肺癌的杀伤作用: 目的:本实验以阳离子脂质体作载体,介导融合自杀基因真核表达质粒pE-Ccd-tk,期望该脂质体:质粒DNA复合物可作为药物体系,直接用于癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)阳性肿瘤(肺癌)...; 李芳伍新尧罗超权; 文献传递

转染自杀基因pCEAcd-tk的SPC-A-1细胞的死亡机制被引量：4: 2000年; 【目的】探讨自杀基因 pCEAcd tk/前体药物体系旁观者效应的细胞死亡机制。【方法】提取质粒pCEAcd tk ,转染到肺癌细胞株SPC A 1中 ,与未转染的细胞按 2∶8的比例混合后加到 96孔培养板中 (每孔 3× 10 3 ) ,加前体药物 5 FC(5 μmol/L)和GCV(10 μmol/L)孵育 5d后 ,MTT法测定细胞存活率而估计旁观者效应。取处理后的细胞 ,提取DNA ,琼脂糖凝胶电泳 ;Hoechst染色后荧光显微镜观察及碘化丙啶 (PI)染色 ,流式细胞仪分析细胞周期。【结果】①SPC A 1细胞株在转染了pCEAcd tk体系后加前体药物存在明显的旁观者效应 ;②处理细胞的基因组DNA琼脂糖凝胶电泳呈涂布状 ;③处理细胞用荧光显微镜观察到形状变大 ,无凋亡小体形成 ;④流式细胞仪分析到细胞周期发生改变。【结论】SPC A 1细胞在转染了pCEAcd tk后存在旁观者效应 ,这种旁观者效应引起的细胞死亡是一种坏死。; 郭语彬伍新尧骆晓枫李芳徐平何光耀; 关键词：自杀基因旁观者效应 SPC-A-1 肿瘤

随机引物PCR检测人DNA指纹条件的优化被引量：2: 2001年; 【目的】探讨随机引物PCR检测人DNA指纹技术的最优化条件。【方法】应用随机引物PCR技术 ,用一对经筛选的短引物 ,对扩增人DNA指纹的条件进行了优化。【结果】实验结果显示 :DNA模板应新鲜 ,质量浓度在 5 0～ 5 5 0mg/L均有扩增产物。dNTP的浓度 0 2mmol/L最宜。Mg2 + 浓度 5 0mmol/L效果最佳。循环参数以两个三步PCR ,变性温度分别用 94℃、90℃ ,时间各为 30s,退火温度用 43℃、48℃ ,时间分别为 40s、5 0s,延伸温度用 72℃ ,时间分别为 1min、1min 2 0s。【结论】按照优化的实验条件 ,得出的DNA指纹图重复性好 ,个体特异性高。; 童大跃徐平区敬华郭语彬李芳林达伍新尧; 关键词：AP-PCR DNA指纹法聚合酶链反应随机引物

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李芳

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