崔运昌
- 作品数：8 被引量：37H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗HFRSV人单抗可变区基因克隆及其序列测定被引量：2
- 1994年
- 从杂交瘤细胞株87-2提取细胞总RNA,反转录合成cDNA链,进行PCR反应。其中扩增重链可变区一对引物分别与人免疫球蛋白重链V区基因5＇端和J区基因3＇端互补;扩增人λ轻链可变区引物与人免疫球蛋白λ轻链V区基因5＇端和J区基因3＇端互补。将重、轻链可变区基因的PCR扩增产物分别插入M13噬菌体,经转化筛选分别获得重组克隆。双脱氧法测定其序列,所得核苷酸序列经计算机分析,轻、重链可变区基因长度分别为309bp和405pb,编码103个氨基酸和135个氨基酸,有明显抗体可变区特征,具有骨架区和抗原互补区。
- 高磊陈苏民陈南春杨安钢崔运昌
- 关键词：肾病综合征出血热单克隆抗体基因工程
- 人源性抗出血热单克隆抗体重链可变区基因克隆及其序列测定被引量：2
- 1992年
- 单克隆抗体已广泛应用于医学生物学的各个领域。但目前使用的单克隆抗体多为鼠源性,在临床应用中常使患者产生抗异种蛋白的免疫反应。人源性单抗用于临床比鼠源性优越,但其制备尚有许多难题,其杂交瘤细胞不稳定、抗体产量低、多为IgM,难以达到临床的应用。
- 高磊陈苏民陈南春杨安钢韩骅刘新平崔运昌
- 关键词：出血热病毒单克隆抗体
- ELISA方法用于McAb亲和常数的测定被引量：23
- 1992年
- 以肾综合征出血热病毒(HFRSV)人McAb的检测为模型,建立了测定McAb亲和常数的简易方法。其基本原理是在两种不同浓度抗原包被的微板上进行系列稀释的抗体测定,然后比较由此获得的两条S形反应曲线的OD50(50％最大OD值),代入方程式便可得出亲和常数K值。该法简便、迅速、可靠,是筛选、测定B细胞杂交瘤产物的理想方法。
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- 关键词：ELISAHFRSV
- 用核型分析法观察影响杂交瘤稳定性的因素
- 1991年
- 作者分析了6株人-阶杂交瘤和人-(人-鼠)杂交瘤细胞的核型、发现人-(人-鼠)杂文瘤细胞株之间染色体数相对稳定,为78.47±6.89(x±S,n=60),人-鼠杂交瘤细胞株之间染色体数差异较大,为76.60±1293(x±S.n=60),表明融合所用的骨髓瘤细胞系是影响杂交瘤稳定的一个重要因素.
- 梁喆崔运昌卢连军
- 关键词：杂交瘤免疫球蛋白核型染色体
- EB病毒转化的人外周血淋巴细胞与SHM—D33细胞系融合制备人单克隆抗体被引量：6
- 1989年
- 用EB病毒转化人外周血淋巴细胞,因克隆化不成功,分泌不稳定而失败。将转化的细胞与KR—12细胞融合,因融合率低而未成功。将转化细胞与SHM—D33细胞融合,成功地建立了3株稳定分泌人单抗的杂交瘤细胞,均产生IgMλ型抗体,30～50μg/ml上清。其中1株(86—2)已连续传代18个月,未经克隆化仍稳定分泌抗体,已适应低血清培养,抗体分泌量不变;可用裸鼠制腹水。
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- 关键词：EB病毒杂交瘤单克隆抗体
- 三种ELISA法检测HFRSV抗原的比较被引量：4
- 1990年
- 本文报告了BA-ELISA、夹心法ELISA和抗体捕获法ELISA对五株肾综合征出血热病毒(HFRSV)细胞培养物和感染乳鼠脑中病毒抗原的检测情况,结果表明BA-EL ISA敏感性最高,对HFRSV细胞培养物的检测滴度平均达1:576～2304,对感染乳鼠脑研磨液上清平均达1:2000～11200。由于三种方法均采用了HFRS单克隆抗体,因此非特异反应显著降低,敏感性得以提高。文中对三种ELISA方法的优缺点进行了讨论。
- 白雪帆扬为松张文彬崔运昌米力李海凤
- 关键词：HFRSV病毒抗原ELISA
- 抗肾综合征出血热病毒独特型人源性单克隆抗体的制备
- 1995年
- 分离肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）恢复期患者外周静脉血淋巴细胞，经分离的Ｂ淋巴细胞ＥＢ病毒转化后分别与人─鼠种间骨髓瘤细胞系ＳＨＭ－Ｄ３３和小鼠骨髓瘤细胞系Ｘ６３－Ａｇ８．６５３融合，融合率分别为９６％和９０％。杂交瘤生长孔分泌抗ＨＦＲＳＶ抗体阳性率达３３％和２３％。而且均有一孔为抗ＨＦＲＳＶ独特型抗体阳性，经克隆化筛选各得到一株杂交瘤细胞系，命名为Ｃ８和Ｆ３。经鉴定两株杂交瘤细胞系分泌的人源性单克隆抗体均为ＩｇＭ型。Ｆ３抗体产量小于１ｍｇ／ｍｌ，Ｃ８抗体产量为３０～５０ｍｇ／ｍｌ，且已稳定传代两年以上。抗ＨＦＲＳＶ独特型人源性单克隆抗体的成功制备，为ＨＦＲＳＶ疫苗的研制开辟了一条新路。
- 高磊陈苏民陈南春崔运昌米力梁吉
- 关键词：人单克隆抗体出血热病毒杂交瘤肾综合征出血热
- HFRSV内影像型抗独特型人单抗重链可变区基因克隆
- 1994年
- 利用反转录－ＰＣＲ方法，从分泌肾综合症出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）内影像型抗独特型人单抗杂交瘤细胞系（Ｃ８）中，成功地克隆了抗ＨＦＲＳＶ１ｄ人单抗重链可变区基因，并将此基因重组入Ｍ１３噬菌体ＤＮＡ中，测定了此重链可变区基因全序列。经计算机分析，基因全长共３５１ｂｐ、编码１１７个氨基酸，氨基酸序列同源性分析发现所推得的该单抗ＣＤＲ２区与ＨＦＲＳＶＧ２蛋白Ｃ端有同源区，此区可能具有较强的抗原性。
- 高磊陈苏民陈南春赵忠良刘新平杨萍杨安钢米力崔运昌
- 关键词：肾病综合症出血热病毒
