宋文鑫
- 作品数：5 被引量：37H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金重庆市科委基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RNA干扰技术对肝癌细胞内源survivin基因表达的影响被引量：21
- 2004年
- 应用RNA干扰技术(RNAi)研究针对凋亡抑制因子survivin的siRNA抑制肝癌细胞株内源survivin基因的表达.转染重组质粒pshRNA survivin至肝癌细胞株SMMC 772 1,通过免疫荧光、蛋白质印迹和半定量RT PCR检测survivin蛋白表达及mRNA转录水平的变化.结果表明:构建的三种重组质粒pshRNA survivin1/2/3均能明显抑制survivin基因的表达;应用免疫荧光检测survivin基因的表达,转染重组质粒pshRNA survivin的实验组survivin荧光强度明显低于转染载体pTZU6 +1和pshRNA GFP对照组;蛋白质印迹结果表明,重组质粒pshRNA survivin明显抑制survivin蛋白的表达,抑制率为 6 2 %～ 78%,通过半定量RT PCR检测到survivin基因mRNA转录明显减少,抑制率为5 7%～ 6 4 %.由上述结果可以得出结论:重组质粒pshRNA survivin可明显抑制SMMC 772 1细胞内源survivin的表达和mRNA的转录。
- 闫歌蒲丹 唐霓高小玲宋文鑫卢年芳吴刚Tong-Chuan He 黄爱龙
- 关键词：RNA干扰肝癌细胞株SURVIVIN基因
- 凋亡抑制因子survivin基因的克隆及在真核细胞中的表达
- 2004年
- 目的 :克隆Survivin编码序列并在真核细胞中表达。方法 :RT -PCR扩增Survivin编码序列 ,建立与绿色荧光蛋白(GFP)共表达的融合重组质粒 ,转染哺乳动物细胞 ,利用GFP绿色荧光和WesternBlot检测Survivin蛋白的表达。结果 :RT -PCR扩增出 4 2 1bp的Survivin编码序列 ,构建融合重组质粒pEGFP -C1-Survivin ,利用GFP荧光和WesternBlot证实Sur vivin蛋白的表达。结论 :成功克隆Survivin基因并在真核细胞中表达。
- 闫歌蒲丹唐霓张秉强高小玲宋文鑫何通川黄爱龙
- 关键词：SURVIVIN绿色荧光蛋白真核细胞
- 重组冠状病毒核衣壳蛋白血清抗体检测被引量：5
- 2004年
- 目的 SARS冠状病毒的核衣壳 (Nucleocapsid)蛋白 (N蛋白 )是病毒的主要结构抗原 ,重组N蛋白可用作抗原检测患者血清中相应抗体。方法 以纯化的目的蛋白N 1,N 2分别包被 96孔板 ,检测正常人群及患者血清中抗SARS病毒抗体。结果 检测SARS感染患者血清 ,N 1阳性检出率为 5 5 .6 8% ,N 2阳性检出率为 5 6 .82 % ,与华大基因试剂盒相比符合率分别为 90 .12 %和 87.6 5 %。结论 重组核衣壳蛋白可做为检测SARS抗体的抗原蛋白。
- 蒲丹闫歌张秉强宋文鑫高小玲唐霓王丕龙郑建黄爱龙闫惠平檀玉芬
- 关键词：SARS核衣壳蛋白ELISA抗体
- 重组SARS-CoV刺突蛋白基因片段的原核表达及纯化被引量：1
- 2004年
- 目的 :冠状病毒 (SARS -CoV)的刺突蛋白 (spikeglycoprotein ,S蛋白 )是病毒的主要结构蛋白之一 ,也是重要的病毒抗原 ,重组S蛋白的表达可用于检测病毒感染后血清抗体。方法 :根据抗原性预测分析结果 ,将S蛋白中抗原决定簇的编码基因重新拼接成两个新的基因 ,通过全基因合成方式直接合成至原核表达载体pET32a(+) ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,以IPTG诱导表达 ,Ni-NTA试剂盒纯化目的蛋白。结果 :SDS -PAGE证实重组S蛋白的表达 ,并被纯化。结论 :重组刺突蛋白的表达及纯化 ,可做为检测SARS -CoV抗体的抗原 ,有助于进一步开展SARS
- 蒲丹宋文鑫闫歌张秉强唐霓王丕龙郑建黄爱龙
- 关键词：SARS-COV刺突蛋白纯化
- RNA干扰沉默mdrl基因联合阿霉素对卵巢癌耐药细胞株SKOV_3/ADM增殖的抑制作用被引量：11
- 2005年
- 目的:观察RNA干扰沉默mdrl基因后化疗药物对卵巢癌耐药细胞株SKOV3 /ADM增殖的影响。方法:RT -PCR检测靶向于mdrl基因的小发夹状RNA(pshRNA -mdrl)对SKOV3 /ADM细胞内mdr1mRNA表达的影响;采用MTT法及软琼脂克隆形成实验测定pshRNA -mdrl联合化疗药物阿霉素对SKOV3 /ADM的增殖抑制作用。结果:pshRNA -mdrl能抑制SKOV3 /ADM细胞mdr1mRNA的表达,pshRNA -mdr1联合阿霉素明显抑制SKOV3 /ADM细胞的增殖。结论:靶向于mdr1的pshRNA联合阿霉素能显著抑制SKOV3 /ADM的增殖。
- 王萍玲胡丽娜邓凯贤张君宋文鑫
- 关键词：卵巢癌耐药RNAIMDRL基因
