高小玲
- 作品数：7 被引量：58H指数：5
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组冠状病毒核衣壳蛋白血清抗体检测被引量：5
- 2004年
- 目的 SARS冠状病毒的核衣壳 (Nucleocapsid)蛋白 (N蛋白 )是病毒的主要结构抗原 ,重组N蛋白可用作抗原检测患者血清中相应抗体。方法 以纯化的目的蛋白N 1,N 2分别包被 96孔板 ,检测正常人群及患者血清中抗SARS病毒抗体。结果 检测SARS感染患者血清 ,N 1阳性检出率为 5 5 .6 8% ,N 2阳性检出率为 5 6 .82 % ,与华大基因试剂盒相比符合率分别为 90 .12 %和 87.6 5 %。结论 重组核衣壳蛋白可做为检测SARS抗体的抗原蛋白。
- 蒲丹闫歌张秉强宋文鑫高小玲唐霓王丕龙郑建黄爱龙闫惠平檀玉芬
- 关键词：SARS核衣壳蛋白ELISA抗体
- 凋亡抑制因子survivin基因的克隆及在真核细胞中的表达
- 2004年
- 目的 :克隆Survivin编码序列并在真核细胞中表达。方法 :RT -PCR扩增Survivin编码序列 ,建立与绿色荧光蛋白(GFP)共表达的融合重组质粒 ,转染哺乳动物细胞 ,利用GFP绿色荧光和WesternBlot检测Survivin蛋白的表达。结果 :RT -PCR扩增出 4 2 1bp的Survivin编码序列 ,构建融合重组质粒pEGFP -C1-Survivin ,利用GFP荧光和WesternBlot证实Sur vivin蛋白的表达。结论 :成功克隆Survivin基因并在真核细胞中表达。
- 闫歌蒲丹唐霓张秉强高小玲宋文鑫何通川黄爱龙
- 关键词：SURVIVIN绿色荧光蛋白真核细胞
- IκB激酶的研究进展被引量：15
- 2004年
- 细胞核因子κB(NF κB)参与机体绝大多数生物过程的调控 ,尤其是在肿瘤细胞的抗凋亡机制中起着关键的作用。NF κB抑制物 (IκB)激酶 (IKK)是NF κB通路中关键的激酶 ,通过作用于IKK而达到治疗疾病的目的 。
- 高小玲黄爱龙
- 关键词：NF-KBIKB肿瘤细胞
- 重组腺病毒IκBαM在裸鼠体内对人肝癌细胞HepG_2的凋亡作用被引量：2
- 2004年
- 高小玲贾丽萍浦丹闫歌卢年芳唐霓黄爱龙
- 关键词：核因子KB凋亡作用人肝癌细胞IKBΑ蛋白质分子
- RNA干扰技术对肝癌细胞内源survivin基因表达的影响被引量：21
- 2004年
- 应用RNA干扰技术(RNAi)研究针对凋亡抑制因子survivin的siRNA抑制肝癌细胞株内源survivin基因的表达.转染重组质粒pshRNA survivin至肝癌细胞株SMMC 772 1,通过免疫荧光、蛋白质印迹和半定量RT PCR检测survivin蛋白表达及mRNA转录水平的变化.结果表明:构建的三种重组质粒pshRNA survivin1/2/3均能明显抑制survivin基因的表达;应用免疫荧光检测survivin基因的表达,转染重组质粒pshRNA survivin的实验组survivin荧光强度明显低于转染载体pTZU6 +1和pshRNA GFP对照组;蛋白质印迹结果表明,重组质粒pshRNA survivin明显抑制survivin蛋白的表达,抑制率为 6 2 %～ 78%,通过半定量RT PCR检测到survivin基因mRNA转录明显减少,抑制率为5 7%～ 6 4 %.由上述结果可以得出结论:重组质粒pshRNA survivin可明显抑制SMMC 772 1细胞内源survivin的表达和mRNA的转录。
- 闫歌蒲丹 唐霓高小玲宋文鑫卢年芳吴刚Tong-Chuan He 黄爱龙
- 关键词：RNA干扰肝癌细胞株SURVIVIN基因
- RNA干扰介导对乙型肝炎病毒复制的抑制作用被引量：10
- 2004年
- 构建针对乙型肝炎病毒(HBV)核心区或表面抗原编码区的siRNA表达载体pSI-C和pSI-S,在体外HBV复制细胞模型中观察对HBV复制和表达的影响.将pSI-C,pSI-S与1.3倍HBV真核表达质粒pHBV共转染HepG2细胞,分别在转染后24,48和72h,观察pSI-C和pSI-S对细胞上清和胞内病毒抗原表达的影响,并用分子杂交方法从病毒复制、转录和翻译水平检测目的基因的表达情况.实验结果表明,pSI-C及pSI-S能明显抑制细胞内HBsAg和HBcAg的合成,呈序列特异性和剂量依赖性的特点,而对照组siRNA无抑制作用.pSI-C比pSI-S抑制作用更强,转染后第2天对HBsAg和HBeAg抑制率达高峰,分别为92%和85%.Southern和Northern杂交结果表明,HBVsiRNA能降低目的基因转录和病毒复制中间体的表达水平,提示针对乙型肝炎病毒核心区和表面抗原编码区的siRNA能有效抑制HBVRNA分子转录和病毒复制,最终降低病毒抗原表达,这为运用RNAi技术进行HBV基因治疗提供了新的思路.
- 唐霓张秉强闫歌蒲丹高小玲Tong-ChuanHe黄爱龙
- 关键词：抗病毒治疗乙型肝炎病毒RNA干扰病毒复制基因治疗RNA干扰介导
- 融合蛋白胸腺素α1-干扰素α抗乙型肝炎病毒活性的实验研究被引量：5
- 2005年
- 目的观察融合蛋白胸腺素α1-干扰素α(TA1-IFN)体外抗乙型肝炎病毒(HBV)作用,并与胸腺素α1、干扰素α两者联合(TA1+IFN)应用的体外抗HBV作用进行比较。方法HepG22.2.15细胞接种后24h,换用含5种不同浓度(8000、4000、2000、1000、500U／ml)药物的培养基,37℃、体积分数5％CO2条件下培养,每3d换用原浓度含药培养液1次,并于第6天收集培养液,用Abbott诊断试剂盒,分别检测不同组药物作用后上清液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)的含量,并计算其抑制率;同时用四甲基偶氮唑盐比色分析法检测不同组药物对HepG22.2.15细胞的细胞毒性作用。结果TA1-IFN体外对HBsAg、HBeAg的抑制率与药物浓度呈剂量依赖关系,并且在药物浓度达8000U／ml后趋于稳定,此时TA1-IFN对HBsAg、HBeAg抑制率分别为72.2％±0.8％、60.4％±1.1％,细胞存活率为85.2％±2.0％;而相应浓度的TA1-IFN对HBsAg、HBeAg抑制率为40.0％±0.7％、34.5％±3.2％,细胞存活率为70.0％±1.9％,两者HBsAg、HBeAg抑制率及细胞存活率比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论融合蛋白TA1-IFN体外具有良好的抗HBV作用,其体外抗HBV活性比TA1-IFN联合应用强,且细胞毒性比TA1+IFN联合应用时小,本实验为融合蛋白TA1-IFN的临床研究提供了重要的理论?
- 卢年芳黄爱龙郑瑞强朱亚彬夏仲芳唐霓闫歌高小玲吴莹
- 关键词：融合蛋白胸腺素干扰素Α
